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文档简介

动物实验技术常用实验动物大小鼠豚鼠第一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

常用实验动物小鼠大鼠

豚鼠

兔犬

猴小型猪等第二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五主要内容生物学特性在生物医学中的应用常用品种品系饲养管理要点第三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第六章小鼠实验小鼠(mouse),实验小鼠来自于野生小鼠,经人们长期选择培育而成。17世纪就被用做动物试验,是目前应用最广泛、被研究得最详尽、品种最多的哺乳类实验动物。基因工程小鼠在当前生物医学研究中占据重要地位。第四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五一、生物学特性

(一)、动物学分类位置小鼠属于脊椎动物门,哺乳纲、啮齿目、鼠科、小鼠属、小家鼠种。第五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

(二)、一般特性

1、外观:小鼠全身被毛,面部尖突,头呈锥体形,嘴脸前部两侧有触须,耳耸立呈半圆形,白色小鼠眼睛大而鲜红。体长10~15cm,尾长约与身长相等,尾部覆有短毛和环状角质鳞片,有四条明显的血管。健康小鼠皮毛光滑紧贴皮肤,四肢匀称,眼睛亮而有神。小鼠有多种毛色,如白、黑、棕、灰色等。第六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、体型小出生体重仅1.5克左右,一月龄体重达18-22克,可供实验使用。成年小鼠每日食量5-8克,饮水4-7毫升,排粪1.4-2.8克/天,排尿1-3毫升/天。由于体型小,适于操作和饲养;且占据空间小,适于大量生产。第七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、生命周期短,成熟早,繁殖力强。雌性35-50日龄,雄性45-60日龄即可性成熟。雌性65-75日龄,雄性70-80日龄可达体成熟,此时即可交配。性周期4-5天,妊娠期19-21天,哺乳期20-21天,年产6-9胎,每胎6-15只。属全年多发情动物,产后即发情。寿命2年左右。第八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、性情温顺,胆小怕惊,反应敏感。对多种病原体、毒素及致癌物都很敏感,外界环境光照、噪音、营养、温度、空气质量等多种因素均可对小鼠造成影响。第九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五5、群居,昼伏夜动,喜啃咬。因门齿生长较快,需经常啃咬坚硬物品。喜光线较暗的安静环境,进食、分娩都常发生在夜间,傍晚和黎明前是小鼠活动的两个高峰。第十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五6、小鼠有20对染色体(2n=40),推测有3万多个结构基因,已查明的有648个。是目前被研究得最清楚的实验动物。第十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五1、骨骼:全身骨骼包括头骨、椎骨、胸骨、肋骨和四肢骨。上、下颌骨各有2个门齿,6个臼齿,门齿终生不断生长,需经常磨损来维持齿端的长短,保持恒定。

下颌骨形态分析技术进行近交系小鼠遗传质量监测。(三)、解剖生理特点第十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五头盖骨:第十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、内部脏器:食道细长约2cm,位于气管背面,其内壁有一层厚的角质化鳞状上皮,利于灌胃操作。胃分前胃和腺胃,胃容量小(1-1.5ml),功能较差,不耐饥饿。有胆囊。第十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

胰腺分散在十二指肠、胃底及脾门处;淋巴系统发达,无腭或咽部扁桃体,外界刺激可使淋巴系统增生,诱发淋巴系统疾病。脾脏有明显造血功能;骨髓为红骨髓而无黄骨髓,终生造血。第十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

肺分五叶,左肺单叶,右肺四叶,气管及支气管不发达,不适于做慢性支气管炎模型及祛痰平喘药的疗效实验。心脏由四腔组成,同其他哺乳动物。心尖位于近胸骨端第四肋间,此处为心脏采血进针部位。第十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

雌鼠为双子宫型,呈Y字形,卵巢有细膜包绕,不与腹腔相通,故无宫外孕;乳腺发达,共有五对乳头,胸部3对,腹部2对;雄鼠为双睾丸,幼年时藏于腹腔内,性成熟后下降到阴囊;前列腺分背、腹两叶。第十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五雄性小鼠内生殖器雌性小鼠内生殖器第十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、小鼠皮肤无汗腺,它的唾液分泌能力很有限,只能改变体温以部分地代偿环境的改变。适宜温度21~25℃。低温繁殖率下降,持续高温(32℃)引起死亡或产生后效应。第十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、由于小鼠的蒸发表面与整个身体相比所占的比例大,减少饮水较大多数哺乳动物更为敏感。呼出的气体在鼻腔内冷却以及尿液的高效浓缩,都有助于水分保持。这是其有别于其他动物的特性。第二十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

阴道栓,是小鼠交配典型特征,被视为交配成功的标志。

性周期,雌鼠性成熟后,卵巢产生卵细胞并分泌雌性激素,出现明显的动情周期。根据阴道涂片所观察到的阴道上皮细胞变化,可进一步推测卵巢、子宫、激素变化和所处的发情阶段。第二十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

血配,分娩24小时内又可受孕。

假妊娠,雌鼠与去势雄鼠交配,转基因技术中作代孕鼠。

分娩,夜间或黎明,每4分钟一只,整个产程约1小时,1分钟后胎盘产出,母鼠食之。第二十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五二、在生物医学中的应用(一)、药物研究1、实验药物毒性和安全性评价。小鼠常用于药物的急性、亚急性、慢性毒性试验以及半数致死量和最大耐受量的测定等,“三致”试验(致畸、致癌、致突变)也常用小鼠进行。

2、药物筛选。如抗肿瘤药物、抗结核药物、抗疟疾药物等的筛选。第二十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

3、药效学评价试验常用小鼠作某些药物的药效学和副作用的研究。如利用小鼠瞳孔放大作用测试药物对副交感神经和神经连接的影响。用声源性惊厥的小鼠评价抗痉挛药物。

4、生物效应测定和药物效价的比较:血清、疫苗等鉴定、效价测定、生物效应研究。第二十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(二)、肿瘤学研究

1、肿瘤实验研究:自发性肿瘤:诱发性肿瘤:人癌细胞移植肿瘤遗传学研究第二十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(三)、遗传学研究

1、遗传学分析:如:毛色基因是遗传标记和品系鉴定的依据之一。

2、基因研究:重组近交系;同源近交系;转基因小鼠第二十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

3、遗传性疾病模型动物:具有遗传性疾病的突变系为研究人类遗传性疾病的病因、发病机理和治疗提供了自然的动物模型。如家族性肥胖、遗传性贫血、全身性红斑狼疮、侏儒症、尿崩症等都有相应的突变系小鼠可供研究用。第二十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五对照突变体第二十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(四)、病原体所致疾病的研究主要对病毒性疾病、细菌性疾病、寄生虫性疾病的研究。由于小鼠对多种病原体和毒素敏感,可用于制作感染诱发的人类传染性疾病的动物模型,如:疟疾、血吸虫、马锥虫、流感、狂犬等。对这些疾病的病理过程、机理和治疗等进行研究。

对钩端螺旋体不敏感。第二十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(五)、免疫学研究

1、制备单克隆抗体:用BALB/C、AKR、C57BL/6J等小鼠免疫后的脾细胞与骨髓瘤细胞融合,进行单克隆抗体的制备和研究。单克隆抗体已广泛用于疾病诊断、治疗和分子生物学研究。第三十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、利用免疫功能缺陷小鼠进行免疫学研究。无胸腺的突变系裸鼠,缺乏T细胞,SCID小鼠,是先天性T和B细胞联合免疫缺陷的突变系动物,

NZB小鼠,具有自发性的自身免疫贫血症,用于研究自身免疫疾病的机制。第三十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

(六)、老年病学研究

1、小鼠是研究胶原老化的模型动物:

2、老龄鼠大脑物质代谢:

3、生长激素与老化的关系:第三十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(七)、内分泌疾病的研究小鼠内分泌腺结构的缺陷常引起类似人类的内分泌疾病:肾上腺皮质肥大造成肾上腺功能亢进,发生类似人类柯兴氏综合症;

垂体性侏儒症以及生长激素缺乏造成的snell侏儒症;第三十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

(八)其他方面

1、神经系统疾病:如亚急性坏死性脑脊髓病、癫痫等。

2、呼吸系统疾病:小鼠在氢氧化铵雾剂刺激下有咳嗽反应,是研究镇咳药的首选动物。

3、计划生育:第三十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五三、常用品种品系近交系

1、BALB/c:白色,1923年培育为近交系,1979年从美国引入中国。

特性:乳腺癌发病率低,但当用乳腺肿瘤病毒诱发时发病率增高;肺癌发病率雌性26%,雄性29%;相对血压较高,多有心脏损害,常发动脉硬化;对放射线照射极为敏感;生产性能良好,所需饲料中蛋白质含量要求高。

常用于单克隆抗体与免疫学研究。第三十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、C57BL

黑色,1921年培育,1937年从此系中分离出C57BL/6和C57BL/10两个亚系。1975年从日本引入中国。特性:乳腺肿瘤自然发生率低,化学物质难以诱发乳腺和卵巢肿瘤;对放射物质耐受性强;补体活性高;对结核杆菌敏感;对鼠痘病毒有一定抵抗力,嗜酒精性高。常用于肿瘤学、生理学、免疫学、遗传学研究。第三十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第三十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、C3H

野生色,1920年白化雌鼠与乳腺肿瘤高发DBA系雄鼠杂交,再经20代以上近交培育而获得。1975年从美国引入中国。

主要特性:乳腺癌发病率高,6--10月龄雌鼠乳腺癌自然发生率达85--100%,14月龄肝癌发生率为85%。补体活性高,干扰素产量低。血液中过氧化氢酶活性高,雄鼠对氨气、氯仿、松节油等甚为敏感,死亡率高。对狂犬病毒敏感,对炭疽杆菌有抵抗力。主要用于肿瘤学、生理学、核医学的研究。第三十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第三十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、DBA:淡灰色,1909年在毛色分离实验中建立,为最古老的近交系小鼠。1929年在亚系间进行杂交,建立了两个亚系:DBA/1、DBA/2

DBA/1系主要特征:抗DBA/2系所生长的瘤株;P1534瘤株的生长率为50%;一年以上雌鼠乳腺癌发生率为75%;对结核菌敏感。对疟原虫感染有抵抗力;对鼠伤寒C5敏感;老龄雌鼠都有钙质沉着。第四十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第四十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

DBA/2系主要特征:对大部分DBA/1系的瘤株有抗性,但黑色素瘤S-91在两亚系小鼠中均能生长;自发淋巴瘤;雌鼠乳腺肿瘤发生率为:繁殖鼠66%,处女鼠3%;36日龄小鼠听源性癫痫发作为100%,55日龄后为5%;血压较低,心脏有钙质沉着;对疟原虫感染和鼠伤寒C5有抵抗力;嗜酒精性低;红细胞计数高。主要用于肿瘤学、遗传学和免疫学研究。第四十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五5、TA1和TA2:白色,系我国培育的近交系。1955年天津医学院育成TA1,1963年育成TA2。1985年被国际小鼠遗传命名委员会承认。主要特性:TA1为自发低乳腺癌系,TA2为自发高乳腺癌系。

主要用于乳腺肿瘤的研究。第四十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五6、615

深褐色,国内育成。1961年中国医学科学院血液病研究所用KM种小鼠雌鼠与苏联引进的C57BL雄鼠杂交,尔后又作近交培育而成。1985年被国际小鼠遗传命名委员会承认。主要特性:8月龄后出现衰老现象,自发肿瘤发生率为10-20%,雌性为乳腺癌,雄性为肺癌;对津638白血病病毒敏感。主要用于白血病等的研究。第四十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五7、CBA/J//Ola

淡灰色,1920年Strong用Bagg白化雌鼠与DBA雄鼠交配后,选择低乳腺肿瘤发病率动物培育培育,1947年引到Andervont近交35代后,于1948年引到JAX,1983年引到OLAC。野鼠色。单倍型为H-2k第四十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五封闭群

1、昆明小鼠(KM):白色,1926年美国从瑞士引入白化小鼠先培育成瑞士小鼠,1946年我国从印度将瑞士小鼠引入昆明,1952年从昆明引入北京生物制品研究所,1954年推广到全国。

是我国特有的封闭群小鼠。主要特性:繁殖率和成活率高,抗病力和适应性很强,雌鼠乳瘤发生率为25%。广泛用于药理、毒理、病毒和细菌学的研究,以及生物制品和药品的检定。第四十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、NIH

白色,由美国国立卫生研究院(NIH)培育。主要特性:繁殖力强,产仔成活率高,雄性好斗,易打伤致残。免疫反应敏感性比昆明鼠强,是国际广泛通用的实验动物。主要用于药物毒理研究和生物制品检定。第四十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、ICR

又称SwissHanschka,CD-1,Ha/ICR。为美国培育的Swiss种小鼠,因美国癌症研究所(InstituteofCancerResearch)分送各国饲养实验,各国称为ICR品种。主要特性:白色,繁殖力强,适应性强,生长快速,实验重复性好。是国际通用的封闭群小鼠。广泛用于药理、毒理、肿瘤、食品、生物制品的研究生产。

第四十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五四、饲养管理要点1、饲料、饮水及喂养一般喂全价颗粒饲料,保证小鼠营养需要,但要注意有些小鼠的品系对营养的特殊要求。小鼠胃容量小,随时采食,应采取少量勤添饲喂。饲料平时要放在专用容器中保存,并放于通风干燥处,一周内应用完。饮水,消毒灭菌水,每周换水2-3次,保证饮水不间断。应经常清洗并消毒饮水瓶及吸水管。第四十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、笼具和垫料笼具应选用国家标准笼具,一般用塑料饲养笼,清洁级以上小鼠的笼具需消毒,TPX塑料饲养盒可达到耐120度高温的要求。垫料是直接接触动物的铺垫物,有吸湿、保暖、作窝的作用,故应有强吸湿性、无毒、无刺激性、无粉尘、不可食并舒适。一般选用以阔叶林木的刨花或锯末为宜,切忌用针叶林木(松、杉)刨花做垫料。垫料常采用高压消毒。第五十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五IsolatorColonyManagementIsolator=smallbarrierroomSelfcontainersystemSuppliesgammairradiatedWaterultra-filter,UVexposed第五十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、工作常规:

每周更换两次垫料,加食2次,换水2-3次。注意每天观察动物,及时作好工作记录和环境记录。第五十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、性别鉴别:成年鼠易区分,雄鼠阴囊明显,雌鼠可见阴道开口和五对乳头;仔鼠或幼鼠则主要从外生殖器与肛门的距离判定,近者为雌性,远者为雄性。第五十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五5、动物健康的外观检查:食欲旺盛;眼睛有神、反应敏捷;体毛光滑,紧贴皮肤;肌肉丰满,活动有力;身无伤痕,尾不弯曲;天然孔腔无分泌物,无畸形;粪便黑色呈麦粒状。第五十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第七章大鼠

大鼠(Rat),是野生褐家鼠的变种,起源于北美洲,于17世纪初期传到欧洲。18世纪后期开始人工饲养,19世纪,美国费城维斯塔尔(Wistar)研究所在开发大鼠作为实验动物方面作出了突出贡献,目前世界上使用的许多大鼠品系品种均起源于此。大鼠体形较小,对实验条件反应近似。使用量仅次于小鼠。第五十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五一、生物学特性外型特征行为习性解剖特点生理特性营养特点第五十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

大鼠与小鼠相似,几乎大十倍,为多种毛色。大鼠在实验动物中也属于较小型动物。出生时体重为5.5-10g,视品种和产仔数而不同,一个半月龄可达180克以上,为常用大鼠规格。雄性大鼠身体前比后大,雌性大鼠身体苗条,头尖小,后比前大。成年大鼠体长不小于18-20cm,尾上覆有短毛和环状角质鳞片,有200多片。(一)外型特征第五十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(二)行为习性-1

1、大鼠喜欢啃咬,性情温顺,易于捕捉。但孕鼠和哺乳鼠也有攻击人。

2、大鼠对新环境适应能力强,昼伏夜动,夜间和清晨比较活跃,采食、交配多在此期间进行。

3、大鼠喜独居,喜安静环境,对外界刺激反应敏感,适宜作行为学研究。第五十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(二)行为习性-2

4、大鼠对空气湿度耐受性差,相对湿度低于40%时,常发生坏尾症。

5、大鼠嗅觉灵敏,对氨气、硫化氢、尘埃等极为敏感,易引发呼吸道疾病。

6、大鼠是杂食性动物,食性广泛,随时采食,喜食煮熟的动物肉。第五十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(三)解剖特点-11、骨骼系统包括头骨、椎骨、胸骨、肋骨和前后肢骨。上下颌骨各有2个门齿,6个臼齿。门齿终生不断生长,故需经常磨损以维持其恒定。磨牙的解剖形态与人类相似,给致龋菌丛和致龋食物可产生与人一样的龋损,适用于建立龋齿的动物模型。

第六十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(三)解剖特点-22、消化系统胃分为前后两部分,前胃壁薄,形成盲状,后胃壁厚,富含肌肉腺体,伸缩性强,胃中有一皱折,收缩时会堵住喷门,因而不会呕吐。肝分为6叶(左外叶、左中叶、中叶、右叶、尾状叶和乳突叶),再生能力强,切除60-70%后可再生;肝枯萎细胞95%有吞噬能力,适用于肝外科实验研究;

无胆管,来自各叶的胆管形成胆总管,在距幽门括约肌2.5cm处通人十二指肠,适宜作胆管插管模型。第六十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

3、呼吸系统肺结构特别由5叶组成,左肺为一整叶,右肺4叶(上中后副叶)。气管位于食道的腹侧。气管和支气管腺不发达,不适于作慢性支气管炎模型及去痰平喘药的疗效实验。

4、循环系统大鼠心脏有4个腔组成。心脏的血液供给既来自冠状动脉,也来自冠状外动脉。后者起源于颈内动脉和锁骨下动脉。最大的安全采血量1ml(三)解剖特点-3第六十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

5、泌尿系统:右肾比左肾靠近头侧,其头极在第一腰椎水平,尾极在第三腰椎水平。肾只有一个乳头和一个肾盏,可有效地进行肾套管插入术研究。

6、生殖系统雌鼠子宫为Y型双子宫,胸腹部各有3对乳头;雄鼠有高度发育的副性腺,包括大的精囊、尿道球腺、凝固腺和前列腺;腹股沟管终身保持开放,睾丸40天开始下降到阴囊。

(三)解剖特点-4第六十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五7、内分泌系统垂体附着在漏斗下部,可用吸管吸除垂体,适宜制作垂体摘除模型。8、皮肤缺少汗腺,仅分布于爪垫上,主要通过尾巴散热。运输中常出现“发汗”死亡。(三)解剖特点-5第六十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(四)生理特性-11、生长发育生命周期短,寿命约2.5-3年,易于饲养管理。新生鼠体重5.5-10g,全身无毛,两耳关闭;3-4天两耳张开,8-10天长门齿;14-17天开眼,16天被毛长齐;20-21天可离乳独立生活,50-60g。成年雄鼠300-600g,雌鼠250-500g,45天左右可达180g以上,是常用的规格。第六十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(四)生理特性-22、生殖生理雄鼠出生后30-35天睾丸下降进入阴囊,45-60天产生精子,60天可自行交配,但90天体成熟后才使最适繁殖期;雌鼠70-75天阴道开口,初次发情排卵也是在阴道开口前后,80天体成熟后才使最适繁殖期;雌性周期4-5天,妊娠期19-23天,哺乳期20-22天,每胎产仔6-12只,年产6-9胎,繁殖生产使用期为90-300天。第六十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(四)生理特性-33、体温与水的调节大鼠汗腺不发达,仅在爪垫上有汗腺,尾巴是散热器官,周围环境温度过高时常靠流出大量的唾液来调节体温。最适温度21-25℃。4、大鼠的嗅觉灵敏。对空气中的灰尘、氨气、硫化氢极为敏感。当长期慢性刺激时,会引起肺部大面积进行性坏死。第六十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(四)生理特性-4

5、大鼠对空气的湿度耐受力较差,当空气中湿度低于40%时,常发生坏尾症,近一步发展可致尾巴一段段地脱落。第六十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(五)营养特点

大鼠杂食,食性广泛,喜食各种煮熟的动物肉。胃容量3--7ml。大鼠是研究营养学的优良动物模型。对各种营养素缺乏非常敏感。大鼠也是研究钙磷代谢的常用动物。第六十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五大鼠常规营养成分指标

指标维持生长繁殖水分,%≤1010粗蛋白,%≥1820粗脂肪,%≥44粗纤维,%≥55粗灰分≤88钙,%1.0~1.81.0~1.8硒,%0.6~1.20.6~1.2钙,磷,%1.2:1~1.7:11.2:1~1.7:1第七十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

大鼠氨基酸指标指标维持生长繁殖赖氨酸,%≥0.821.32蛋氨酸+胱氨酸,%≥0.530.78精氨酸,%≥0.991.10组氨酸,%≥0.400.55色氨酸,%≥0.190.25苯丙氨酸+酪氨酸,%≥1.101.30苏氨酸,%≥0.650.88亮氨酸,%≥0.441.76异亮氨酸,%≥0.701.03缬氨酸,%≥0.841.17第七十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

大鼠维生素指标指标维持生长繁殖维生素A,IU/Kg≥700014000维生素D,IU/Kg≥8001500维生素E,IU/Kg≥60120维生素K,mg/Kg≥35维生素B1,mg/Kg≥813维生素B2,mg/Kg≥1012维生素B6,mg/Kg≥612烟酸,mg/Kg≥4560泛酸,mg/Kg≥1724叶酸,mg/Kg≥46生物素,mg/Kg≥0.10.2维生素B12,mg/Kg≥0.0200.022胆碱,mg/Kg≥12501250第七十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五大鼠矿物质和微量元素指标

指标维持生长繁殖镁,%≥0.20.2钾,%≥0.50.5纳,%≥0.20.2铁,mg/kg≥100.0120.0锰,mg/kg≥75.075.0铜,mg/kg≥10.010.0锌,mg/kg≥30.030.0碘,mg/kg≥0.50.5硒,mg/kg≥0.1~0.20.1~0.2第七十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五二、在医学生物学中的应用(一)肿瘤学研究大鼠可复制成各种肿瘤模型,是肿瘤实验研究最常用的实验动物。特别易患肝癌,应用化学致癌物诱发肝癌应用广泛。还常用于人类肿瘤细胞同位移植实验。第七十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

(二)药物学研究大鼠繁殖力强,易饲养。体形大小合适,给药容易,采样量合适方便。畸形发生率低,行为多样化。常用于药物毒理、药效评价、新药筛选等研究。第七十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

1、用于药物的毒理实验作为药物亚急性试验的动物,评价和确定最大给药量、药物排泄速率和蓄积倾向。药物慢性实验,确定药物的吸收、分布、排泄、剂量反应曲线和代谢,以及服药后的临床和组织学检查。研究药物致畸试验。

2、药效学研究神经病药物评价,心血管药物评价,治疗炎症药物的筛选评价。第七十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(三)内分泌研究大鼠的内分泌腺容易摘除,常用于研究各种腺体及激素对全身生理生化功能的调节;激素腺体和靶器官的相互作用;激素对生殖功能的影响等。(四)营养、代谢疾病的研究大鼠对营养物质缺乏敏感,可发生典型缺乏症状。第七十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(五)行为学研究大鼠行为表现多样,情绪反应敏感,具有一定的变化特征,常用以研究各种行为和高级神经活动的表现。如进行迷宫试验,奖励和惩罚试验,成瘾习惯药物的行为学研究。(六)老年病学研究使用大鼠进行衰老机理的研究。(七)感染性疾病的研究(八)心血管疾病研究第七十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五三、大鼠常用品种品系1、Wistar大鼠白色封闭群大鼠。1907年由美国Wistar研究所育成,现已遍及世界各国的实验室。是我国引进早、使用最广泛,数量最多的品种。特点为头部较宽,耳朵较长,尾的长度小于身长。性周期稳定,繁殖力强,产仔多,生长发育快,性格温顺,对传染病的抵抗力较强,自发性肿瘤发生率低。第七十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、SD(SpragueDawley,SD)大鼠

白色封闭群大鼠。1925年一农场用Wistar大鼠培育而成。特点为:头部狭长,尾长接近于身长,产仔多,生长发育较Wistar快。性情比Wistar大鼠稍凶猛。对疾病的抵抗力较强,尤其对呼吸道疾病的抵抗力很强。自发肿瘤的发生率较低。对性激素敏感性高。第八十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、F344/N

白色近交系大鼠。1920年由哥伦比亚大学肿瘤研究所培育,我国从NIH引进。平均寿命较短,雄鼠为31个月,雌鼠为29个月。旋转运动性低,血清胰岛素含量低。自发肿瘤率高,可允许多种肿瘤移植生长。广泛用于毒理学、生理学、肿瘤学等研究领域。第八十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、SHR大鼠白色突变系大鼠,又称自发性高血压大鼠。,该鼠生育力和寿命无明显下降,可养13--14个月,繁殖时应选择高血压大鼠为亲本,其特征是自发高血压,且无明显原发性肾脏和肾上腺损伤,心血管疾病发生率高,该鼠对抗高血压药物有反应,是筛选抗高血压药物的良好动物模型。第八十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五四、饲养管理要点(一)明确质量标准■符合有关实验动物的国家标准。■体格健壮,体形正常,被毛光泽浓密。■胡子长直,不脱落,尾直肥,血管发育良好呈粉红色。■呼吸匀畅,粪便正常,眼鼻无粘液,脸、脚、尾不肿胀或溃烂。第八十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五大鼠国家质量标准普通级

清洁级SPF级无菌级第八十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五小鼠、大鼠病原菌检测项目动物等级病

菌动物种类小鼠

大鼠无菌动物无特定病原体动物清洁动物沙门菌Salmonellaspp单核细胞增生性李斯特杆菌

Listeriamonocytogenes假结核耶尔森菌Yersiniapseudotuberculosis小肠结肠炎耶尔森菌Yesiniaenterocolitica皮肤病原真菌Pathogenicdermalfungi念珠状链杆菌Streptobacillusmoniliformis支气管鲍特杆菌Bordetellabronchiseptica支原体Mycoplasmaspp鼠棒状杆菌Corynebacteriumkutscheri泰泽病原体Tyzzer'sorganism大肠埃希菌O115a,C,K(B)EscherichiacoliO115a,C,K(B)

○嗜肺巴斯德杆菌Pasteurellapneumotropica肺炎克雷伯杆菌Klebsiellapneumoniae金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus肺炎链球菌Streptococcuspnemoniae乙型溶血性链球菌β-hemolyticstreptococcus绿脓杆菌

Pseudomonasaeruginosa

●无任何可查到的细菌

●注:●必须检测项目,要求阴性;○必要时检查项目,要求阴性。第八十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五小鼠、大鼠病毒检测项目动物等级病

毒动物种类小鼠

大鼠无菌动物无特定病原体动物清洁动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒

LymphocyticChoriomeningitisVirus(LCMV)汉坦病毒Hantavirus(HV)鼠痘病毒

EctromeliaVirus(Ect.)小鼠肝炎病毒MouseHepatitisVirus(MHV)仙台病毒SendaiVirus(SV)

●小鼠肺炎病毒PneumoniaVirusofMice(PVM)呼肠孤病毒Ⅲ型ReovirustypeⅢ(Reo-3)小鼠细小病毒MinuteVirusofMice(MVM)小鼠脑脊髓炎病毒

Theiler'sMouseEncephalomyelitisVirus(TMEV)小鼠腺病毒

MouseAdenovirus(Mad)多瘤病毒PolyomaVirus(POLY)大鼠细小病毒RV株RatParvovirus(KRV)大鼠细小病毒H-1株RatParvovirus(H-1)大鼠冠状病毒/大鼠涎泪腺炎病毒RatCoronavirus(RCV)/SialodacryoadenitisVirus(SDAV)

●无任何可查到的病毒

●注:●必须检测项目,要求阴性;○必要时检查项目,要求阴性。第八十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五小鼠和大鼠寄生虫学检测指标动物等级应排除寄生虫项目动物种类小鼠大鼠无菌动物无特定病原体动物清洁动物体外寄生虫(节肢动物)Ectoparasites弓形虫

Toxoplasmagondii兔脑原虫Encephalitozooncuniculi卡氏肺孢子虫Pneumocystiscarinii全部蠕虫

AllHelminths●●○○●●●○○●鞭毛虫

Flagellates纤毛虫

Ciliates●●●●无任何可检测到的寄生虫●●注:●必须检测项目,要求阴性;○必要时检测项目,要求阴性。第八十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

(二)选育种与生产

1、选种原则

2、个体要求

3、选种方法

4、育种方法

5、配种生产第八十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五(三)管理措施1、饲喂:勤添少喂,勤换垫料,确保通风良好。2、卫生消毒:干净彻底,严禁交叉污染3、环境条件:温度、湿度、噪音、空气洁净度4、及时记录、认真总结5、计划管理6、保证湿度不得低于40%,避免环尾症发生。第八十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第八章豚鼠第九十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠(Guineapig),又叫海猪、天竺鼠、荷兰猪。染色体数为2n=64动物学分类位置:豚鼠属于动物界、脊椎动物门、哺乳纲、啮齿目、豪猪亚目,豚鼠科、豚鼠属、豚鼠种动物。第九十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第一节生物学特性

1、外形特征2、行为习性

3、解剖学特点

4、生理学特性第九十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五一、外形特征豚鼠体形短粗、身圆、无尾、全身被毛,头部颈粗短,两眼明亮。四肢短小,前足有四趾、后足有三趾,不善攀登和跳跃。耳壳薄而血管明显,上唇分裂。豚鼠有全白、三花及黑色、棕色等多种毛色。第九十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

二、行为习性

1、采食习性:草食性,盲肠发达,对霉变饲料敏感。喜食纤维素较多的饲料,日夜都自由采食。2、居住行为:喜群居,一雄多雌的群体构成明显的群居稳定性。其活动、休息、采食多呈集体行为。3、性情温顺,很少斗殴。胆小易惊,对外界突然的响声、震动和环境变化十分敏感。第九十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、普赖厄反射(听觉耳动反射):机警胆小,嗅觉和听觉发达。5、对抗生素及有毒物质敏感。常在用药48小时后引起急性肠炎,甚至导致死亡。6、体内不能合成VC,必须在饲料中补充,否则就会出现维生素缺乏症。7、豚鼠喜干燥清洁的生活环境且需较大面积的活动场地。(p303)第九十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五三、解剖学特点第九十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五解剖学特点-11、骨骼系统:全身骨骼由头骨、躯干骨和四肢骨组成。其数量因年龄而异,成熟豚鼠约有256~261块骨。齿式为:1013/1013=202、消化系统:豚鼠嚼肌发达。胃壁非常薄,胃容量约为20~30ml。肠管较长,约为体长的10倍,其中盲肠发达占整个腹腔容积的1/3。第九十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五解剖学特点-23、呼吸系统:胸腔内有气管、肺、心脏和食道。心脏位于胸腔的中部偏左。肺呈粉红色分为左肺(3叶)和右肺(4叶:尖叶、中间叶、附叶和后叶)。

豚鼠胸腺与大小鼠不同,全部在颈部皮下气管两侧,附着不牢固,易摘除。第九十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五解剖学特点-34、淋巴系统:较发达,对侵入的病原微生物极为敏感。5、神经系统:豚鼠的大脑半球没有明显的回纹,只有原始的深沟,属于平滑脑组织,与进化程度较高的哺乳动物不同。脑在胚胎期42-45天发育成熟,新生仔鼠有被毛、牙齿和视力,生后4小时即能行走和进食。3-4天就能独立生活。第九十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五解剖学特点-46、生殖系统:♀、♂豚鼠腹部均只有一对乳腺。但雌性乳头比较细长位于鼠鼷部。

雌性:具有无孔的阴道闭合膜,发情时张开,非发情时闭合。卵巢呈囊圆形,位于肾脏下方。子宫有两个完全分开的子宫角,连接输卵管末端。子宫角会合后形成子宫颈,开口于阴道。雄性:有位于两侧突起的阴囊,内含睾丸。睾丸呈椭圆形纵行稍向背外侧排列于阴囊内,出生后睾丸并不下降到阴囊,但通过腹壁可以摸到。用手压迫包皮的前面能将阴茎挤出,包皮的尾侧是会阴囊孔。第一百页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五四、生理学特性第一百零一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五1、生殖生理

性成熟:豚鼠有性早熟特征,雌鼠一般为30~45日龄,雄鼠为70日龄。发情:雌鼠为全年多发情期动物,发情的雌鼠有典型的性行为,即用鼻嗅同笼其它豚鼠,爬跨同笼其它雌鼠。与雄鼠放置一起,则表现为典型的拱腰反应,发情的雌鼠会采取交配姿势。雌鼠性周期15~16天,发情可持续1~18小时,平均6~8小时,多在下午5点到第二天早晨,排卵是在发情结束后。第一百零二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五交配:

豚鼠一般在5月龄左右才达到体成熟,此时方可进行配种繁殖,否则不但母鼠体质过度损耗,其产生的后代体质和生命力也较弱。

交配完成表现为舐毛,迅速跑开。射出的精液含有精子和副性腺分泌物,分泌物在雌性阴道内凝固、形成阴栓。此栓被阴道上皮覆盖,并在适当的位置停留数小时后脱落。查找阴栓可确定交配日期、准确率达85%~90%。第一百零三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五妊娠:妊娠期为65~70天,平均68天,比其它啮齿类动物长得多。在分娩2~3小时后,母鼠出现一次产后发情,此时交配妊娠率可达80%。哺乳:产仔数1~8只,多数为3~4只。豚鼠虽然只有一对乳房,但泌乳能力强,可很好地哺乳4只仔鼠。母鼠间有互相哺乳的习惯,这一点与其它啮齿类及兔、狗不同。仔鼠一般在15~21天断奶。繁殖时限:豚鼠繁殖使用期限一般为1~1.5年。第一百零四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五2、生长发育

新生豚鼠的体重与双亲的遗传特征、母体的营养、窝间距、一窝产仔数和妊娠期的长短有关。一般为50~150g。由于豚鼠妊娠期长,新生仔鼠出生后即能活动,全身覆有被毛,有门齿,眼耳已张开,数小时后即能采食软料。生长发育较快,在出生后两个月内平均每天增重4~5g

。一般二月龄豚鼠体重可达350克;五月龄雌鼠体重可达700克,雄鼠体重可达750克。豚鼠寿命一般为4~5年。

常用规格:250-350g

第一百零五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五3、血细胞指数

红细胞、血红蛋白数量和红细胞压积比其它啮齿动物低。外周血骨髓细胞的形态与人相似。其淋巴细胞中有一种Kurloff细胞,是一种特殊的单核白细胞,胞质内含有大的粘多糖包涵体,称为库氏小体。通常在血液、脾、骨髓、胎盘的血管系统或胸腺内发现,在雌激素刺激和妊娠情况下,其数量增多,最高密集点从肺和脾(红髓)转移至胸腺和胎盘。库氏细胞的起源和机能尚不清楚。一般认为可以帮助保护细胞滋养层免受母源细胞的免疫损伤。第一百零六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五4、速发型和迟发型超敏反应

致敏豚鼠再接触某抗原时常导致速发型过敏反应,其特征是发绀、虚脱或因支气管和细支气管平滑肌收缩发生窒息、死亡。而皮内注射结核菌素可引起迟发型超敏反应。第一百零七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五5、肠道菌群

豚鼠消化系统功能较弱,食物通过盲肠、大肠相当缓慢,部分食物可在肠道保持48小时,许多营养成分由肠道微生物菌群将纤维素分解后释放出来,因而维持肠道微生物菌群的平衡是非常重要的。豚鼠对青霉素、四环素、杆菌肽、金霉素、红霉素等抗生素类药物反应大,较大剂量用药后常可引起急性肠炎、甚至致死。一次肌注5万单位的青霉素能杀死75%以上的豚鼠,死亡发生在注射后的第4天,原因是用药后48小时引起小肠结肠炎、大肠杆菌型的菌血症或细菌内毒素中毒。

第一百零八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五6、其它生理特点

豚鼠体内缺乏左旋葡萄糖内酯氧化酶,其自身不能合成维生素C。豚鼠对麻醉药物及其它某些有毒物质如DDV也很敏感,麻醉死亡率较高。豚鼠抗缺氧能力强,比小鼠强4倍,比大鼠强2倍。第一百零九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五附:豚鼠相关国家标准豚鼠:普通级清洁级SPF级无菌级第一百一十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五质量指标

符合国家质量标准。体态丰满硕长,营养良好,骨骼粗壮结实。毛色光亮,被毛洁净密实。体躯呈流线形,头、颈、胸、腹、臀结构紧凑。行动敏捷活泼。眼明亮,无分泌物。鼻潮湿,无脱毛现象,呼吸平稳。第一百一十一页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠、地鼠和兔病原菌检测项目动

级病

菌动物种类

豚鼠

地鼠

兔无菌动物无特定病原体动物清洁动物普通级动物沙门菌Salmonellaspp单核细胞增生性李斯特杆菌

Listeriamonocytogenes假结核耶尔森菌Yersiniapseudotuberculosis小肠结肠炎耶尔森菌Yesiniaenterocolitica皮肤病原真菌Pathogenicdermalfungi念珠状链杆菌Streptobacillusmoniliformis

○多杀巴斯德杆菌Pasteurellamultocida支气管鲍特杆菌Bordetellabronchiseptica泰泽病原体Tyzzer'sorganism●

●●●●

●嗜肺巴斯德杆菌Pasteurellapneumotropica肺炎克雷伯杆菌Klebsiellapneumoniae金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus肺炎链球菌Streptococcuspnemoniae乙型溶血性链球菌β-hemolyticstreptococcus绿脓杆菌

Pseudomonasaeruginosa

●无任何可查到的细菌

●注:●必须检测项目,要求阴性;○必要时检查项目,要求阴性。第一百一十二页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠、地鼠和兔病毒检测项目动物等级病

毒动物种类豚鼠地鼠兔无菌动物无特定病原清洁动物普通级动物淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒LymphocyticChoriomeningitisVirus(LCMV)兔出血症病毒RabbitHemorrhagicDiseaseVirus(RHDV)

▲体动物仙台病毒SendaiVirus(SV)兔出血症病毒*RabbitHemorrhagicDiseaseVirus(RHDV)

●仙台病毒SendaiVirus(SV)小鼠肺炎病毒PneumoniaVirusofMice(PVM)呼肠孤病毒Ⅲ型ReovirustypeⅢ(Reo-3)轮状病毒Rotavirus(RRV)

●无任何可查到的病毒

●●注:●必须检测项目,要求阴性。▲必须检测项目,可以免疫。*不能免疫,要求阴性。第一百一十三页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠、地鼠和兔寄生虫学检测指标动物等级应排除寄生虫项目动物种类豚鼠地鼠兔无菌动物无特定病原体动物清洁动物普通动物体外寄生虫(节肢动物)Ectoparasites弓形虫

Toxoplasmagondii

●●

兔脑原虫

Encephalitozooncuniculi爱美尔球虫Eimariaspp.卡氏肺孢子虫

Pneumocystiscarinii全部蠕虫

AllHelminths

○○

●●

●鞭毛虫

Flagellates纤毛虫

Ciliates

●无任何可检测到的寄生虫

注:●必须检测项目,要求阴性;○必要时检测项目,要求阴性。第一百一十四页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠常规营养成分指标

指标维持生长繁殖水分,%≤1010粗蛋白,%≥1820粗脂肪,%≥44粗纤维,%≥55粗灰分≤88钙,%1.0~1.81.0~1.8硒,%0.6~1.20.6~1.2钙,磷,%1.2:1~1.7:11.2:1~1.7:1第一百一十五页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

豚鼠氨基酸指标指标维持生长繁殖赖氨酸,%≥0.750.85蛋氨酸+胱氨酸,%≥0.540.68精氨酸,%≥0.801.0组氨酸,%≥0.340.4色氨酸,%≥0.240.28苯丙氨酸+酪氨酸,%≥1.201.50苏氨酸,%≥0.650.75亮氨酸,%≥1.251.35异亮氨酸,%≥0.720.80缬氨酸,%≥0.800.93第一百一十六页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五

豚鼠维生素指标指标维持生长繁殖维生素A,IU/Kg≥750012500维生素D,IU/Kg≥5001250维生素E,IU/Kg≥5070维生素K,mg/Kg≥0.30.4维生素B1,mg/Kg≥7.010.0维生素B2,mg/Kg≥8.015.0维生素B6,mg/Kg≥6.009.00烟酸,mg/Kg≥0.020.03泛酸,mg/Kg≥4055叶酸,mg/Kg≥12.019生物素,mg/Kg≥1.003.00胆碱,mg/Kg≥12001200维生素C,mg/Kg≥15001800第一百一十七页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五指标维持生长繁殖镁,%≥0.150.20钾,%≥0.500.70纳,%≥0.390.44铁,mg/kg≥150250锰,mg/kg≥4060铜,mg/kg≥1214锌,mg/kg≥5060碘,mg/kg≥1.401.70硒,mg/kg≥0.10~0.200.10~0.20豚鼠矿物质和微量元素指标第一百一十八页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五第二节

豚鼠在医学生物学中的应用第一百一十九页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五1、药理学研究豚鼠对某些药物极为敏感,因此它是研究某些药物的“专门动物”。例如豚鼠对组织胺极敏感,很适合作平喘药和抗组织胺药的研究。豚鼠皮肤对毒物刺激反应灵敏,常用于局部皮肤毒物作用的试验。如研究化妆品和外用药物对皮肤的刺激反应。局部麻醉药的药效评价实验。如角膜擦伤、背部拔毛、皮肤灼烧、坐骨神经刺激等。第一百二十页,共一百三十七页,编辑于2023年,星期五豚鼠对人型结核杆菌具有高度的敏感性,因此常用作抗结

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