三氯生质量标准样本

资料内容仅供您学习参考，如有不当或者侵权，请联系改正或者删除。USP32三氯生质量标准以无水物计,本品含C12H7Cl3O2应在97.0%到103.0%之间。包装和贮藏:避光,密封保存。USP对照品:2,4-二氯苯酚;对氯苯酚;三氯生;三氯生有关物质混合物A。鉴别:A:红外鉴别B:采用含量测定方法,所得色谱图中样品的主峰保留时间与对照品色谱图一致。水分:采用美国药典方法1,不得大于0.1%。溶解性:1.4g三氯生应该能够完全溶解在10ml丙酮中,为澄清透明溶液。重金属:采用美国药典方法2,不得大于0.002%。有关物质:色谱系统:同含量测定项下供试品溶液:同含量测定项下方法:供试品溶液进样约0.5ul,将色谱柱以每分钟20℃升温直到140℃,随后以每分钟4℃升温直到240℃,维持该温度至少5分钟。记录色谱图,计算峰面积,以下列公式计算每个杂质相对于三氯生的量。计算公式:100(ri/rs),其中ri是每个杂质的峰面积,rs是所有峰面积和。任何单一杂质的量不得超过0.1%,总杂质不得超过0.5%。单氯酚和2,4-二氯酚限量:磷酸盐缓冲液:将1.38g无水磷酸二氢钠和1.42g磷酸氢二钠加入到1000ml容量瓶中,用水溶解并定容到刻度,混匀。流动相:乙腈-磷酸盐缓冲液(1:1),过滤并脱气。必要时调整比例(见系统适用性项下)标准品溶液:定量称取对氯苯酚和2,4-二氯苯酚对照品,用一定体积的乙腈溶解,以相等体积的水稀释,混匀。取一定量的上述溶液到合适容器内,用乙腈-水(1:1)混合溶液稀释到含对氯酚0.5ug/ml,2,4-二氯苯酚0.1ug/ml。供试品溶液:精密称取三氯生约250mg,置于25ml低光化性容量瓶中,先加入20ml乙腈溶解,再加入水到刻度,混匀。色谱系统:液相色谱仪配库仑阵列电化学检测器,电极1设置电压0.45V,电极2设置电压0.75V,两个电极均有一个阳极和一根填料为C18的4.6mm×25cm色谱柱。流速为1ml/min。记录对照品色谱图,按照以下方法记录色谱峰响应值,2,4-二氯苯酚的多次进样结果的相对标准误差应小于9%。方法:分别进相同体积(20ul)的标准品和供试品溶液,记录色谱图,测定峰响应值。供试品溶液色谱图中对氯苯酚和2,4-二氯苯酚的峰面积不得大于标准品溶液中两者的峰面积。1,3,7-三氯二苯并-对-二恶英,2,8-二氯二苯并-对-二恶英,2,8-二氯二苯并呋喃,2,4,8-三氯二苯并呋喃限量:流动相:乙腈-水-冰醋酸(70:30:0.1),过滤并脱气。必要时调整比例。供试品溶液:精密称取约2g三氯生,加入到具塞离心管中,加入5ml的2N氢氧化钾溶液,振摇10分钟使溶解。加入3ml正己烷,振摇10分钟,静置使分层。将有机层转移到合适容器内,水相继续加入3ml正己烷,振摇10分钟,静置使分层,分离有机相,去除水相。合并两次的有机相,加入3ml的2N氢氧化钾溶液,振摇10分钟,静置使分层。去除水相,有机相中再加入3ml的2N氢氧化钾溶液,振摇10分钟,静置使分层。将有机相转移到合适容器内,用氮气吹干,用1ml甲醇溶解,混匀。色谱系统:液相色谱配220nm检测器,采用4.6mm×25cm的C18色谱柱。流速为1.5ml/min。进样三氯生有关物质A混合物对照品溶液,按照下面的方法记录色谱峰:2,8-二氯二苯并呋喃的相对保留时间为0.59,2,8-二氯二苯并-对-二恶英的相对保留时间为0.71,2,4,8-三氯二苯并呋喃的相对保留时间为0.88,1,3,7-三氯二苯并-对-二恶英的相对保留时间为1.0;重复进样的相对标准偏差应小于15%,以2,8-二氯二苯并-对-二恶英峰面积计算。方法:供试品溶液进样20ul,记录色谱图,计算色谱峰的响应值。以下列公式计算每个分析物相对于三氯生的浓度。计算公式:(C/W)(ri/rs),其中C是三氯生有关物质A混合物中每个分析物的浓度,以ug/ml计;W是三氯生取样量;ri和rs为供试品溶液以及三氯生有关物质A混合物对照品溶液中每个分析物的峰响应值:2,8-二氯二苯并呋喃浓度不得超过0.25ppm;2,4,8-三氯二苯并呋喃浓度不得超过0.5ppm;1,3,7-三氯二苯并-对-二恶英浓度不得超过0.25ppm;2,8-二氯二苯并-对-二恶英浓度不得超过0.5ppm。2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英,2,3,7,8-四氯二苯并呋喃限量:(这两种物质为有毒物质,操作时需小心)固定相A-将10g硅胶置于合适容器内,加入约3ml的1N氢氧化钠,混匀。固定相B-将60g硅胶置于合适容器内,加入约74ml的浓硫酸,混匀。色谱柱A-将5.1g固定相A、0.5g硅胶、6.2g固定相B、3.2g硫酸钠置于玻璃色谱柱中,色谱柱内径10mm。用50ml正己烷冲洗柱子,弃去流出液。色谱柱B-将2.5g氧化铝、2.5g硫酸钠置于内径为6mm的玻璃色谱柱中,用30ml正己烷冲洗,弃去流出液。内标溶液:准确称取2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英,13C标记,2,3,7,8-四氯二苯并呋喃,13C标记于壬烷中,用2,2,4-三甲基戊烷定量稀释,使浓度达到1.0pg/ul。供试品溶液:精密称取约30g三氯生,置于分液漏斗中,加入30ul内标溶液,用200ml的1N氢氧化钠溶液溶解后,用30ml正己烷提取,共四次,合并提取液。加入3g无水硫酸钠到提取液中,静置30分钟,定量转移到圆底烧瓶中,采用搅拌蒸馏装置和刺形蒸馏柱蒸馏,直到剩余1ml。将该溶液置于色谱A顶端,用50ml正己烷洗脱。将洗脱液置于色谱柱B顶端,用30ml正己烷和二氯甲烷(98:2)混合溶剂洗脱,弃去洗脱液。用40ml正己烷和二氯甲烷(1:1)混合溶剂洗脱,将洗脱液收集到一个圆底烧瓶中,蒸馏该洗脱液,装置同上。直到剩余1ml。继续用氮气吹干到50ul,室温蒸干,用10ul2,2,4-三甲基戊烷溶解。色谱系统:气相色谱,配拥有电子碰撞电离源的高效质谱,0.25mm×60m毛细管柱,包裹G48。载气为氦气,以下列方法进行。起始柱温80℃,进样后1分钟,温度以每分钟20℃上升到220℃,随后以每分钟2℃上升到270℃,维持在270℃至少20分钟。进样口温度保持在280℃。内标溶液进样,按以下方法记录色谱图:质荷比321.89处的信噪比不得小于50。方法:供试品溶液进样1ul,记录色谱图,计算质荷比319.90、321.89、331.88、333.93、303.90、305.90、315.94、317.94处的峰面积。2,3,7,8-四氯二苯并-对-二恶英在质荷比319.90处的峰响应值不得大于内标溶液在质荷比331.88处的峰响应值;2,3,7,8-四氯二苯并呋喃在质荷比303.90处的峰响应值不得大于内标溶液在质荷比315.94处的峰响应值。含量测定:标准品制备:精密称取三氯生对照品,用乙酸乙酯溶解并稀释,使最终浓度达到0.4mg/ml。供试品制备:精密称取约40mg三氯生原料,置于100ml容量瓶中,用乙酸乙酯溶解并定容。色谱系统:气相色谱,配火焰离子化检测器,装填G3的0.53mm×15m毛细管柱。载气为氦气,维持压力6psi。进样口温度维持在34℃,进样后迅速升高到200℃,柱温维持在34℃,检测器温度维持在260℃。进样标准品溶液,按方法记录色谱图:重复进样结果的相对标准误差应小于2.0%。方法:分别进样对照品溶液和供试