大面积烧伤深烧伤演示文稿

大面积烧伤深度烧伤演示文稿目前一页\总数六十一页\编于二十点优选大面积烧伤深度烧伤目前二页\总数六十一页\编于二十点大面积烧伤的定义：≥50%体表面积的烧伤。深度烧伤的定义：≥21天愈合的创面。尽管烧伤是个病，但创面修复仍然是重中之重。如何早期修复，不仅挽救患者的生命，同时也可以减少功能和外形问题。目前三页\总数六十一页\编于二十点Medical

ObjectivesSurvivalEarliestclosureLeastdonorskinMinimumscarAcuteburnsBurnscarsCongenitallesionsChronicwounds目前四页\总数六十一页\编于二十点供皮区（donorsite）不足是主要问题自体皮的厚度来考虑（刃厚、超薄）自体皮的扩大倍数自、异体（种）皮的间隔（混合移植）临时生物敷料覆盖争取时间争取非手术创面良好覆盖下的奇迹长皮复合移植（人工真皮+自体表皮或表皮细胞）组织工程皮肤和未来的干细胞治疗目前五页\总数六十一页\编于二十点自体皮的扩大倍数邮票状植皮网状植皮Meek植皮目前六页\总数六十一页\编于二十点异体（种）皮的间隔（混合移植）间隔植皮（Jackson,1954）打孔镶嵌（上海瑞金医院,1960）微粒皮(张明良，1986)目前七页\总数六十一页\编于二十点复合移植（人工真皮+自体表皮或表皮细胞人工真皮Integra，Pelnic,脱细胞真皮（异体和异种）意义：不仅在于使创面愈合，而且使创面愈合的更好(修复——再生)目前八页\总数六十一页\编于二十点陆树良教授：瘢痕形成机制的研究：完善了真皮“模板缺损”学说（中华烧伤杂志2007）1981BurkeJF，YannasIV首先在研发Integra时首先提出Template和Neodermis1995LiveseySA在动物实验中首次发现脱细胞异种真皮加自体断层皮片移植没有炎症反应和免疫排斥，因此提出“真皮模板”陆教授深入研究，深化了该假说，提出了真皮组织的三维结构和成分在调控Fb的功能。尤其是真皮支架孔径的大小因素。目前九页\总数六十一页\编于二十点真皮再生的可能性胎儿伤口无瘢痕愈合真皮再生模板真皮再生“因子”的引入干细胞技术的发展与应用目前十页\总数六十一页\编于二十点胎儿伤口无瘢痕愈合在诸多影响胎儿无瘢痕愈合的因素中，生长因子的差异是最重要的因素。有研究显示，在无瘢痕愈合伤口中，TGF-β3高表达而TGF-β1低表达

PDGF呈低表达血管内皮生长因子（VEGF）在无瘢痕愈合伤口中可以快速上调，促进血管形成和长入。目前十一页\总数六十一页\编于二十点胎儿伤口无瘢痕愈合Teusner等通过DD-PCR研究胎儿无瘢痕愈合基因表达差异发现胚胎期细胞的一种转录产物对创面愈合有强烈的正调节作用，它编码一种含有249个氨基酸残基的蛋白，被命名为FcgammaRⅢ-X，有利于胚胎期皮肤的无瘢痕愈合。目前十二页\总数六十一页\编于二十点真皮再生模板真皮替代物在皮肤重建中具有重要作用，是真皮再生的模板（dermalregenerationtemplate，DRT），可减少瘢痕过度增生，控制挛缩，提高创面愈合速度，增加创面愈合后皮肤的弹性、柔软性及机械耐磨性，而且有些真皮替代物中存在的活性Fb可促进表皮生长、分化，诱导基底膜形成。目前十三页\总数六十一页\编于二十点真皮再生模板真皮替代物天然真皮替代物Alloderm

人工合成真皮替代物无细胞真皮替代物Integra，PELNAC

含细胞真皮替代物Dermagraft目前十四页\总数六十一页\编于二十点Integra，PELNAC都应用较长时间了，经得住临床验证，但都需要2-3周的血管化。

目前十五页\总数六十一页\编于二十点PELNIC移植后2周目前十六页\总数六十一页\编于二十点去除表层硅胶膜后目前十七页\总数六十一页\编于二十点自体刃厚皮打孔目前十八页\总数六十一页\编于二十点移植后即刻目前十九页\总数六十一页\编于二十点一周存活后目前二十页\总数六十一页\编于二十点一个月后目前二十一页\总数六十一页\编于二十点复合皮移植后78个月复合移植皮肤基本近似正常，表面稍显干燥目前二十二页\总数六十一页\编于二十点汗腺的再生？（脱细胞异种真皮移植6.5年后）目前二十三页\总数六十一页\编于二十点移植后6.5年目前二十四页\总数六十一页\编于二十点目前二十五页\总数六十一页\编于二十点真皮再生“因子”的引入

各种生长因子的基因导入物理或化学结合：VEGF、bFGF、Ang、GM-CSF等从快速血管化考虑问题目前二十六页\总数六十一页\编于二十点表皮真皮皮下组织正常皮肤，HE×100支架＋自体皮移植，Masson×100表皮真皮支架目前二十七页\总数六十一页\编于二十点移植后1周，Masson×200

真皮侧支架内无新生血管，基底侧新生血管开始长入，已有较多成纤维细胞侵入支架，但支架内未见新生胶原合成。移植后4周，Masson×200

新生血管已长到支架真皮侧（），真皮侧支架内成纤维细胞已合成较多新生胶原（）。目前二十八页\总数六十一页\编于二十点

支架()能诱导真皮成纤维细胞长入其中，成纤维细胞合成的新生胶原成团束状()，类似真皮胶原的结构。Masson×400Masson×100目前二十九页\总数六十一页\编于二十点HE×400Masson×400 HE染色可见到支架内梭形的成纤维细胞（）及其合成的新生胶原（）。Masson染色可见蓝染的新生团束状胶原（）目前三十页\总数六十一页\编于二十点

透射电镜（TEM）证实支架内新生胶原的合成。移植后1周，可见支架结构（）移植后4周，可见支架结构（）,并可见支架内新生胶原合成（）。目前三十一页\总数六十一页\编于二十点CBA:TEM×970B:TEM×6200C:TEM×39000新生血管支架新生胶原成纤维细胞A目前三十二页\总数六十一页\编于二十点

支架诱导真皮组织再生可能与支架的血管化能力有关

血管化慢，一方面使移植的薄层自体皮存活性降低，部分自体皮坏死后真皮自身进行修复（而非再生），镜下可见其真皮结构的改变（主要是胶原束状结构的改变）；另一方面，支架内的缺血状态使异物巨细胞在早期就增多，吞噬降解支架，使支架对成纤维细胞的诱导支撑作用丧失。

血管化快，一方面使移植的薄层自体皮存活性增高，镜下可见其真皮结构无明显改变；另一方面，支架内异物巨细胞少，成纤维细胞沿支架分布，合成细胞外基质，各种细胞分泌的胶原酶降解支架，使支架的降解与组织的再生得到同步。目前三十三页\总数六十一页\编于二十点组织工程皮肤和未来的干细胞组织工程皮肤（永久和长期）

Apligraf

转化医学：临床GMP

我们的研究未来的干细胞

iPS目前三十四页\总数六十一页\编于二十点组织工程皮肤（永久和长期）Apligraf目前三十五页\总数六十一页\编于二十点ComparisonsofCellTypesinNative,Engineered&GraftedSkinTissueTypeCellTypeNativeSkinSTSGTESkinHealedSkinEpidermisIFKeratinocytes++++Hairfollicle+–––Sebaceousgland+–––Sweatgland+–––Melanocytes+±±±Immunecells++–+Nerve++–±

DermisFibroblasts++±+Endothelialcells++–+Smoothmuscle++–±Immunecells++–+Nerve++–±目前三十六页\总数六十一页\编于二十点Partial-thicknessWounds目前三十七页\总数六十一页\编于二十点Epidermal

Healing

MigrationProliferationStratification&Differentiation目前三十八页\总数六十一页\编于二十点TemporarySkinSubstitutes(dressings)Name/Source“Dermis”“Epidermis”Apligraf/OrganogenesisCollagengel+alloHFStratifiedalloHKOrcel/OrtecInternationalFDcollagen+alloHFAlloHKMySkin-allo/CellTran(preparedwound)AlloHKlayeronpolymerTransCyte/AdvBioHealingAlloHFBiobraneDermaGraft/AdvBioHealingVicryl+alloHF(none)目前三十九页\总数六十一页\编于二十点PermanentSkinSubstitutes(grafts)Name/Source“Dermis”“Epidermis”EpiCel/GenzymeBiosurgery(preparedwound)AutoHKsheetCellSpray/ClinicalCellCult(preparedwound)AutoHKspray±STSGMySkin-auto/CellTran(preparedwound)AutoHKlayeronpolymerIntegra/IntegraLifeScienceCollagen-GAGSilicone/STSGAlloderm/LifeCellCorpAcellularallodermisSTSGESS/Shriners&UCincinnatiCollagen-GAG+autoHFStratifiedautoHKLaserSkin/FidiaBiopolymersHyaluronanAutoHKInVitra/InVitrxVicryl+autoHFAutoHK目前四十页\总数六十一页\编于二十点SkinSubstitutesCostsProductPermanencyTakeRateCost(ft2)Biobrane®NoN/A$150AllograftNo/YesVariable$1,000Alloderm®Yes70-80%$4,650Transcyte®No80-90%$5,000Integra®Yes>90%$8,000Epicel®Yes40-60%$13,000Apligraf®NoN/A$15,000CincinnatiESSYes80-90%>$15,000目前四十一页\总数六十一页\编于二十点BiologicProcessesforTEProcessPurposeOccursLocationCytogenesisGeneratecellsYesInVitroMorphogenesisOrganizetissueanalogYesInVitroHistogenesisRecoverpartialfunctionsYesInVivoOrganogenesisRecoverallfunctionsNo(InUtero)目前四十二页\总数六十一页\编于二十点MassCultureofKeratinocytesNuncCellFactories,~6250or1250cm2each目前四十三页\总数六十一页\编于二十点KeratorBioreactor目前四十四页\总数六十一页\编于二十点CellGrowthSummary

(Assumptions:10cm2skin@1X106cells/cm2,lag=1d/sc,growthrate=1PD/d,ESSinoculum1X106cells/cm2)SubcultureESSFactor1°CP2°3°106/cm2cm2Totalinoculum1.0*1071.92*1071.92*1076.14*108%CFE35050Pi3.0*1059.60*1063.07*1082.0*1010PDs666Days7777Pf1.92*1071.92*1076.14*1081.97*10102.0*104目前四十五页\总数六十一页\编于二十点CompositionEngineeredSkinSubstitutesbiopolymersubstratelyophilizedcollagen-GAGgamma-irradatedESShistologyfibroblastsfillbiopolymerkeratinocytesstratifycornifiedsurfaceformsavascular目前四十六页\总数六十一页\编于二十点BrdUlabelingofDNASynthesisKalyanaramanandBoyce,JSurgRes,2009目前四十七页\总数六十一页\编于二十点ESSwithHKfromKeratorLeft)A,B,Kerator;C,D,Flasks Right)Plotof%OriginalWoundAreaA,C,Twoweeks;B,D,SixweeksKalyanaramanandBoyce,JSurgRes,2009目前四十八页\总数六十一页\编于二十点PatientEnrollment&TreatmentParameterEnrolledTreatedTotals7048Survived5543Expired155Excluded8Evaluated40IDE980023:1998-2003Boyceetal,JTrauma60:821-829,2006目前四十九页\总数六十一页\编于二十点PatientDemographicsParameterMean±SEMRangeAgeinyears7.5±0.90.6–17Genderratio(M/F)(26/14)n.a.%TBSAburn75.8±1.753-95%%TBSAFTburn73.4±2.234-95%%TBSACSS/pt27.8±3.15-88%Daysto1stCSS32.8±1.124-56n=40patients目前五十页\总数六十一页\编于二十点SurgicalMethods

ESSwere:-~6X6cm,or12X12cm-coveredwithN-Terface™-attachedwithstaples

Dressingswere:

-finemeshgauze-coarsegauze-irrigatedwithantimicrobials-stretchedSpandex™目前五十一页\总数六十一页\编于二十点ResultsPOD14POD28ESSESSAG目前五十二页\总数六十一页\编于二十点ResultsPOD182POD365目前五十三页\总数六十一页\编于二十点HealedSkinHistologyCSSAG1month1year0.1mmESSAG目前五十四页\总数六十一页\编于二十点ResultsTBSAclosed:POD28TBSAcoveredvs%FTburnESS目前五十五页\总数六十一页\编于二十点Results:VancouverScoreESS目前五十六页\总数六十一页\编于二十点SacramentoShrinersDGreenhalgh,MD,TPalmieri,MD:6ptstreatedCSS目前五十七页\总数六十一页\编于二十点CulturedS