生物化学第一章

第一章蛋白质化学胡一节 蛋白质（protein）及其生物学功能生物化学的基本内容包括：发现和阐明构成生命物体的分子基础－生物分子的化学组成、结构和性质；生物分子的功能与生命现象的关系；生物分子在生物机体中的相互作用及其变化规律。生物信息大分子具有如下特征：生物分子中最重要的是糖、酯、核酸和蛋白质四类物质分子量一般都很大由结构小分子结构单元组成.顺序排列。结构复杂：线性信息，三维信息2、蛋白质的重要生物学功能3、氧化供能其他生物学功能：营养蛋白，结构，毒蛋白第二节 蛋白质的分子组成一、元素组成1、主要元素：碳、氢、氧、氮和硫，有些蛋白质还含有少量磷和金属元素。2、特点：各种蛋白质的含氮量很接近，平均含氮量为16%。3、定氮法测定蛋白质含量：蛋白质含量＝6.25×样品含氮量二、结构单位——氨基酸（aminoacid）1、蛋白质的结构单位D-氨基酸：抗生素，生物碱Ty范r存在和用途Gly甜味，胶原中含25%，可治疗胃酸过多与肌力衰竭Ala丝纤维蛋白中含25%Val卵和乳蛋白含10%Leu谷物，玉米蛋白中含22-24%Ile蜂蜜、肉蛋白中含5-6.5%Phe一般蛋白含4-5%Tyr奶酪中含量最多，明胶中最少Try各种蛋白中均含少量Ser丝蛋白中含量丰富，精蛋白中占7.8%Thr酪蛋白较多，肉、乳、卵蛋白占5%，有抗贫血作用存在和用途Cys毛，发，角，蹄等角蛋白中含量多，解毒，促进细胞再生Met肉、卵蛋白中含3-4%，抗脂肪肝，治疗肝炎，肝硬化Asp多种蛋白中均有，植物蛋白中尤多Glu谷物蛋白中含20-45%，用于降血氨，治肝昏迷，味精Asn多种蛋白中均有Gln多种蛋白中均有Arg鱼精蛋白的主要成分Lys肉、卵蛋白中含7-9%，血红蛋白中含量也高His血红蛋白中含量最高，可作消化性溃疡的辅助治疗剂Pro结缔组织与谷蛋白中最多，明胶中含20%非蛋罢白质介氨基乡丰酸存在和用途β-丙氨酸泛酸及辅酶A的组成成分γ-氨基丁酸与脑组织营养及神经传递有关高半胱氨酸甲硫氨酸生物合成的中间产物高丝氨酸Thr，Asp，Met代谢的中间产物鸟氨酸尿素生成的中间产物瓜氨酸尿素生成的中间产物苯甘氨酸抗菌素甲基天冬氨酸天冬霉素蛋白陵质基诊本结嫁构单否位：庄L－－氨圈基酸－氨遍基酸麻：脯械氨酸陪（亚留氨基刷酸）意除外L－凭氨基势酸：古甘氨医酸（胡无不丧对称捏C）熟除外氨基增酸结同构通沿式：袍RC愉H(留NH2)C密OO嫁H常见设氨基血酸种尾类：商20微种。小结2、论氨基抽酸分冒类：按其寺侧链R的结机构和梅理化丘性质是分类①非现极性肺、疏矩水氨记基酸谱(非矮极性熄R基娘氨基参酸)外：Va看l,委L付eu肾,奸Il耽e（格支链哨）；音Gl州y（稍无旋岂光异最构）版；M盏et暂（含球硫）脾；P青he丸（芳妥香族椅）；接Pr阶o（统亚氨蛾基）②极压性、赴中性舒氨基箭酸(走不带邮电荷辽的极经性R愉基氨贤基酸勤)维：Se宿r,将T认hr妻（含阴羟基吐）；闸Ty骄r,母T养rp污（芳睛香族而）；紧Cy涨s（飘含硫白）；休Gl乌n,鉴A奴sn垄（含片酰氨牌）③酸来性氨牲基酸给（含贺有两内个羧泳基）暮：Gl垫u（骄含γ至羧基劣）、队As障p（劲含β袖羧基兔）④碱当性氨铸基酸舟（含惠有两士个以鹊上氨猫基）矛：Ar席g（势胍基患）、图Hi狡s（假咪唑侄基）商、L絮ys血（ε蓄氨基报）含硫醒氨基钓酸：洋Me井t、惕Cy贱s芳香禁族氨俱基酸枣：P仆he乞、T芳yr盗、T知rp三、蒜氨基谱酸的算理化蓄性质1、害物理托性质2、互两性逝解离等电卖点（is误oe杂le蜡ct庙ri络c羞po计in跳t,云pI峡）：搞在某迟一p驱H环牺境中神，氨厦基酸刘解离酸成阳果性离勺子及塑阴性桨离子幕的趋涛势相暖等，抬所带净电付荷为倘零，在丹电场绳中不仗泳动渠。此梅时，责氨基舰酸所谊处环使境的pH削值称为桨该种丽氨基介酸的起等电嘉点(迅pI映)。甘氨今酸的端酸碱免滴定职曲线(z拢wi煌tt煎er溪io出n)等电凉点计叙算①侧主链为请非极笔性基踢团或始虽为填极性腐基团梁但不坝解离丙的氨陪基酸浇：p刻I=恢½(在pK1+p击K2)②酸斜性氨惭基酸于(G渐lu缴、A支sp抚)及樱Cy斑s：隐pI盐=½醒(p全K1+p姑KR)③碱径性氨塘基酸密(赖坐、精雄、组帽)：喊pI嚷=½氧(p弦K2+p境KR)带电百状态缸判定pI绩-p纱H<疼0衣…汁……沙……材.带薯负电pI感-p道H>黑0瓶…伪……浊……素.带踢正电pI蚁-p脱H＝亭0匪…肝……俩……撇.不已带电等电堪点的被计算3、惩紫外夹吸收扶：Tr核p、甲Ty孕r和篮Ph擦e在慰28盾0n童m波载长附印近具灵有最枣大吸貌收峰为，其戚中T板rp介的最鬼大吸它收最消接近葡28症0n遗m氨基播酸的这化学痕反应由α-氨基箱参与卵的反戴应1.枣与亚振硝酸巡寿的反符应：Va仁n饺Sl坚yk怀e定镰氮法愈,生威产上运常用卧于测胀定蛋言白质驾的水辞解程貌度。氨基匪酸的软化学验反应由α-氨基附参与笛的反画应2.雾与甲许醛反熟应：代甲猴醛滴重定法应用棍：氨摄基酸满定量购分析性－甲诞醛滴掘定法吧（间零接滴尸定）A.梢直接示滴定痒，终拨点p蔬H过叫高（枕12扔），盒没有怜适当卡指示换剂。B.陵与甲多醛反槽应，的滴定舱终点俗在9珠左右煮，可缎用酚桃酞作床指示献剂。C.度避免忙氨基钩的干冰扰D.滚简单嘉快速璃，一勤般用疲于测禁定蛋寺白质典的水女解速研度。3.谦与醛面类反伯应氨基摆酸的闪化学粱反应由α-氨基已参与刊的反衔应4.孙氨基崭酰化谢：氨闪基保盗护氨基梅酸的摘化学稳反应由α-氨基蛾参与仆的反趁应5.枣二硝碌基氟鞋苯：参黄色诉，肽离链末两端分宗析应用口：鉴皱定多怨肽或吴蛋白叉质的啦N-估末端侮氨基概酸A.尽虽然岩多肽使侧链铲上的闷ε-气N摧H2完、酚山羟基衔也能各与D武NF侦B反描应，忙但其醒生成卷物，旋容易劫与α枪-涨DN般P氨悄基酸投区分设和分巾离★首拉先由只Sa劫ng你er津应用庙，确雅定了倒胰岛丹素的咽一级建结构A.威肽分但子与仔DN滋FB发反应赞，得悦DN聚P-欲肽B.奶水解闲DN盯P-绢肽，扬得D笔NP至-N镇端氨骡基酸泽及其杰他游妻离氨某基酸C.留分离贴DN盗P-电氨基占酸D.速层析丙法定誉性D娘NP捉-氨握基酸虫，得池出N增端氨仰基酸秆的种篮类、膏数目氨基贵酸的脸化学智反应由α-氨基执参与骄的反塔应6.短与异边硫氰歇酸苯筑酯（升PI犁TC拖）的杜反应Ed构ma宣n轻（苯尿异硫腊氰酸阳酯法樱）氨受基酸瓜顺序区分析旱法实押际上次也是抱一种怪N-喂端分苦析法案。此肺法的技特点爆是能贞够不冷断重斜复循搜环，逮将肽晕链N茶-端销氨基惹酸残勇基逐手一进事行标崇记和辆解离争。肽链界（N羡端氨孤基酸庸）与糊PI妻TC已偶联贼，生剑成P境TC奶-肽环化磁断裂偿：最碎靠近丝式PT谈C基网的肽耽键断追裂，摇生成篇PT蓬C-矛氨基坡酸和游少一残惭基的匠肽链躲，同稀时P嫁TC裤-氨元基酸严环化胀生成订PT柴H-递氨基互酸分离糊PT某H-杏氨基叶酸层析备法鉴厨定Ed蔬ma卖n降欢解法泥的改到进方赛法-贱--暑D施NS犯-E督dm贺an然降解堪法用D茫NS鲜(二误甲基突萘磺金酰氯雾)测萝定N符端氨丹基酸原理醉DN李FB懒法相找同但水谜解后拿的D惜NS顽-氨埋基酸签不需滩分离遮，可淡直接库用电捞泳或盖层析脊法鉴垃定由于时DN爸S有顷强烈目荧光床，灵捡敏度课比D璃NF芽B法亮高1躬00愧倍，扭比E拘dm斥an什法高恶几到令十几台倍可用赢于微满量氨废基酸响的定杏量氨基装酸的献化学追反应由α-羧基龄参与趣的反完应1.痕成盐改反应2.芒成酯你反应氨基绕酸的响化学剩反应由α-羧基鞋参与娇的反耍应3.锁酰化乏反应4.呢脱羧潜反应显色反应：茚三酮反应:氨基羧基同时参加反应氨基丑酸与邪水合兽茚三值酮共梳热，竿发生贷氧化音脱氨邪反应千，生逼成N犯H3捉与酮你酸。飘水合汁茚三歉酮变怨为还洋原型闲茚三恋酮。加热孩过程冶中酮混酸裂亏解，醉放出眯CO者2，孔自身耗变为傍少一揭个碳居的醛讨。水木合茚释三酮扔变为计还原犹型茚用三酮变。NH伙3与栏水合怨茚三箱酮及名还原锐型茚石三酮助脱水幕缩合煌，生右成蓝求紫色半化合猪物。显色啄反应固：茚三类酮反坊应茚三晕酮反辟应:脯洒氨酸差，羟豆脯氨雪酸，忠黄色弊物质例外宅：P宿ro诉黄色结；A舒sn患棕色成肽茶反应挨：黄色反应：与HNO3生成黄色物质鉴定苯丙氨酸、酪氨酸Millon：HgNO3和HNO3(红色物)Folin：还原磷钼酸、磷钨酸(蓝色物)鉴定酪氨酸，蛋白质定性定量测定乙醛或二甲基氨甲醛(紫红色化合物)还原磷钼酸、磷钨酸(蓝色物质)鉴定色氨酸，蛋白质定性定量测定坂口反应：α-萘酚+次氯酸钠(红色物质)鉴定精氨酸Pauly反应：重氮盐化合物(棕红色物质)组氨酸、酪氨酸测定亚硝基亚铁氰酸钠(红色)半胱氨酸、胱氨酸测定乙酸或磷酸成酯保护丝氨酸、苏氨酸羟基，蛋白质合成第三码节堤氨基漂酸的尘分离洲纯化(一)层析顷技术摘的原众理俄国隶植物唉学家门M.阿Ts齿we无tt罢发现顾并使抗用这缎一技框术证准明了唯植物史的叶枕子中袋不仅姥有叶朗绿素各还含庸有其墨它色慕素。请现在冷层析栋法已患成为咱生物澡化学句、分像子生持物学推及其施它学匹科领补域有寇效的款分离愈分析闸工具炉之一。一、层析丈技术贝的原瓣理层析贿法是衣利用孔不同琴物质做理化仿性质纸的差碧异而振建立霸起来援的技愿术。俱所有叙的层群析系歇统都堡由两软个相激组成例：一狂是固气定相匹，它馆或者幸是固霸体物幸质或佣者是错固定湿于固吧体物辫质上陪的成盾分；丢另一堆是流予动相尺，如源水和融各种溶剂。当洗待分痒离的倚混合问物随列流动旁相通句过固菌定相株时，系由于时各组跪份的扔理化阶性质皱存在副差异断，与粪两相忍发生圾相互瞎作用胡（吸浩附、晌溶解铲、结膊合等坛）的顿能力呼不同掘，与席固定盈相相锦互作搭用力勒越弱申的组吐份，坐随流鄙动相贝移动乌时受酸到的召阻滞废作用桌小，机向前愧移动部的速遗度快预。反押之，拢与固乳定相出相互脆作用甲越强电的组也份，点向前弄移动经速度皇越慢直。分新部收疲集流授出液蹲，可局得到胜样品娃中所姨含的畏各单踩一组犹份，右从而水达到刺将各私组份丈分离校的目仔的。利用伍化合们物在霸两种咐互不巷相溶拜（或倾微溶不）的彼溶剂环中溶续解度章或分竭配系桑数的脉不同织，使办化合萌物从室一种庆溶剂访内转塌移到榆另外咏一种腹溶剂候中。折经过育反复秃多次疏萃取那，将峡绝大臂部分层的化控合物絮提取萄出来叶。分配僵层析顾（萃峰取的心原理贫）A、垫B两沈个溶牲液系喜统、I（师A:莫B=贼2:手1）掠1牧g借I慰I（置A:恨B=屠1:坟3）阔1赠g第一漫次萃隆取后A中谅I有龙2/宵3g堆,幕II追有1棵/4擦g伐I表:I家I=坛8:悠3晶（2遇.6算倍）B中作I有朝1/拾3g伶,请II电有3忧/4蝇g且I治:I鸦I=闸4:度9仗（2艇.1巡寿5倍宋）第二赛次萃匀取后A中赞I有羞4/货9g昏,县II福有1暑/1者6g得I:容II剩=6世4:扑9逮（7葵.1充倍）B中扮I有投1/肥9g艳,肯II欲有9渴/1域6g票I:安II缎=1驱6:杠81办（5边.1数倍）HP擦LC决:根据出峰的悲位置企及峰验高或针峰面样积，涂可以辨定性井及定挤量。省层析浑法与磁光学不、电歇学或伍电化曲学仪住器连技用，可使蹈操作爱及数四据处旦理自急动化准，大昏大缩届短分撤析时馒间。虹由于怠层析难法具壤有分黎辨率韵高、冈灵敏贿度高陶、速靠度快拉等特查点，转因此和适用惰于杂柜质多衰、含慨量少倾的复株杂样杨品分污析，欺尤其爱适用恩于生巧物样嚼品的障分离坡分析任。近忙年来多，已俯成为致生物纹化学渗及分吧子生恭物学殊常用性的分委析方开法。尊在医肤药卫徐生、剃环境辛化学第、高坚分子刘材料亏、石既油化帽工等购方面戚也得究到了朝广泛欠的应变用。二、庭电泳订法(走el柜ec插tr讨op沸ho号re恭si伟s)概念铃：带亮点质慢点在摇电场嚼中与慢本身占电荷尖相反蛛的电个极移昨动的拴现象踏。氨基病酸具蜘有两猪性解煌离，窗PH洽值决储定带陪电情掀况。凝胶工电泳等点态聚焦招电泳双向遮凝胶还电泳三、仙氨基州酸的筹显色嘉反应各种氨基酸0.5%茚三酮乙醇溶液蓝紫色多种氨基酸1%吲哚醌酒精冰醋酸溶液不同颜色各种氨基酸1%溴酚蓝酒精溶液蓝色甘氨酸0.1%邻苯二醛酒精溶液墨绿色酪氨酸α-亚硝基β-萘酚酒精硝酸溶液红色酪氨酸对氨基苯磺酸-碳酸溶液浅红色组氨酸对氨基苯磺酸-碳酸溶液桔红色丝氨酸碘酸钠甲醇溶液及醋酸铵溶液黄色精氨酸尿素萘酚酒精溶液、氢氧化钠溴溶液红色半胱氨酸亚硝酸铁氰化钠甲醇溶液红色脯氨酸吲哚醌-醋酸锌异丙醇溶液蓝色色氨酸对甲基苯甲醛丙酮溶液蓝紫色第四节葱蛋白攀质的橡分子元结构概念蛋白夫质是师由一昨条或侦多条研多肽千(p佣ol乓yp敬ep报ti梦de锄)链灰以特竿殊方模式结狮合而搁成的技生物虏大分滥子。蛋白菌质与淹多肽牙并无顿严格洞的界仆线，筝通常饭是将吊分子潮量在傅60冬00娇道尔迷顿以迹上的尝多肽基称为抛蛋白核质。蛋白券质分膜子量滑变化溜范围命很大办,仰从大打约6围00屠0到锐10若00卧00托0道以尔顿甜甚至泻更大一、颈蛋白摘质分电类生物息体内坟的作激用不仿同结构芳蛋白功能梢蛋白辨：活邮性蛋悬白、意信息高蛋白分子趴形状塌分球状打蛋白纤维蔽状蛋扒白一、逼蛋白约质分金类分子毕组成载成分1.棵单纯哨蛋白(1流)清翁蛋白膝、球翅蛋白坏：水宰，甘己氨酸(2留)谷旷蛋白凡、醇翼溶蛋葡白：挽不溶行于水(3拔)精态蛋白拦、组姨蛋白伞：碱勾性氨弦基酸辩，细窝胞核(4党)硬溜蛋白右：纤储维状哭蛋白饲，不末溶于菠水、料稀酸标稀碱天和有爆机溶漫剂，强含大抽量胱端氨酸一、盆蛋白支质分朝类分子琴组成悔成分1.呈结合舟蛋白(1堤)核屋蛋白册：核竭酸(2燃)色幸蛋白扭：辅仗基是黑金属惜色素(3卖)糖鸦蛋白参：辅念基是管糖或订者糖块的衍喊生物柔，所招有组双织，梢多种矛功能(4勤)脂敞蛋白睁：脂跳肪类械脂结恰合，仔与脂瓶质代看谢、村运输(5揭)磷砖蛋白时：辅品基磷陕酸。浑酯键撕，丝爬氨酸禾，苏讨氨酸最羟基题结合异。酪龄蛋白二、程蛋白地质结虾构中卷的化趴学键1.粘肽键萝p炒ep沃ti森de辣b抗on杨d（遵化学悟键）2.炸二硫客键随di贤su燥ff车id旬e泥bo滋nd械（化轻学键私）不同硬肽链挎，同孕一肽袭链不禁同部仿位半胱渡氨酸稳定旬共价乳键、炉稳定购肽链杯空间指结构破坏爬，蛋背白质樱活性菠丧失渴。角蛋饺白二、谈蛋白辞质结剧构中唤的化辉学键3.谈酯键碌e轿st圈er阶b纯on哲d（妨化学茄键）丝氨节酸、菠苏氨纺酸羟婶基与芳氨基袭酸的菊羧基磷蛋灶白：但丝氨循酸、柄苏氨装酸羟汁基维系魂蛋白柏质结努构，赌行使盲功能4.镇离子资键朽io迈ni睛c铲bo嚷nd务（库缩慧伦作忠用）相反哗电荷陡的基兰团碱性谈氨基工酸，胁生理呈条件瓣下高浓耍度盐锄、过船高过琴低P暑H羧基沃PK剂低，葱氨基家PK脉高，文1-炊2个脖PH枪单位二、标蛋白止质结撤构中桶的化衡学键5.跌配位奇键幻玉da热ti承ve豪b窝on印d（娘共价否键）金属隶离子垮：F英e,耀Cu帖,M杨n,末Zn高级讯结构熔：锌榜指结劫构螯合获剂，怒蛋白来质解楚离成培亚基吸，变饼形失幻玉活6.骆氢键牌h扛yd何ro京ge不n贺bo喂nd氢原真子与醋两个胜电负公性强束的原贼子（萝F,岛O,杠N）弱键课，供毒体原磨子、肾氢、题受体辨原子灭处在稍一条龙直线氢供芳体：盒=N朱H,旱-O小H,周-N浪H2云,-游NH别3+搜,-侨CO宗NH猎2氢受锅体：惜-C睬OO芹-,色>C土=O二、贯蛋白融质结溪构中双的化邮学键7.缓范德邀华作偶用力原子凭、基欺团、薪分子似之间僚弱相哗互作肥用非专爪一性僻的吸朴引力取向泰力、恋诱导厚力，核色散趣力与距管离6她次方蛙成反蚀比，老吸引学不相崖碰蛋白昌质内舰部非烦极性漏结构隐，维债系蛋沾白质盗高级挺结构8.舍疏水低作用贸hy腿dr余op籍ho钻bi挣c傻bo显nd非极拔性侧哪链（高疏水崇基团名）在厅极性趴溶剂膜中为息了避阅开水厘相互简彼此抽靠近材所产碗生的桶作用判力本质粮范德锐华作睬用力蛋白孤质的饺内部简结构勇中次级谅键介痰导蛋脖白质把高级怜结构异形成（一鸭）、蛋顿白质忠的基纪本结影构形舞式1、种连接笔方式渗：肽键肽键瓦(p浩ep波ti籍de塘b帽on流d)帝：一伪个氨瓶基酸咬的羧抖基与姥另一跪氨基运酸的痕氨基屡缩水廊而成镜的酰喉胺键爪称为网肽键说。（使…C志ON生H…锻）肽平漠面(崭pe盯pt岁id淘e栏un秆it烂)：乐由肽遵键中孩的四附个原掩子和法与之扫相邻原的两洗个碳到原子敏共同觉构成膀的刚伶性平烤面。纷（CαCO跌NH皆Cα）特点幻玉：肽键盖的特姜点是就氮原冶子上朱的孤惑对电欧子与货羰基葵具有糕明显榜的共起轭作京用。肽键道中的贞C-矿N键伴具有珠部分藏双键娇性质回，不茫能自虫由旋闭转。组成锄肽键撤的原瓣子处极于同乌一平垃面。在大疏多数渡情况命下，卖以反朵式结嫩构存谎在。2、竹肽分嫁类、私命名在多嗓肽链金中，充氨基盈酸残略基按兼一定丛的顺革序排达列，拨这种谱排列宗顺序氧称为库氨基乓酸顺辱序通常树在多扣肽链侍的一旷端含甲有一带个游认离的番α-可氨基溜，称辛为氨持基端朋或N查-端艘；在夺另一积端含签有一猎个游灯离的某α-默羧基萍，称誓为羧验基端室或C扭-端义。氨基予酸的这顺序坑是从咳N-朵端的伶氨基怀酸残诉基开观始，联以α般-端捐氨基先酸残敬基为魂终点为的排灾列顺甜序。饮如上驾述五滋肽可选表示蛮为：Se滥r-怖Va思l-恒Ty裳r-晚As妖p-棕Gl谣n3、乐生物鸭活性药肽：谷胱们甘肽神经钟肽：继脑啡济肽(5作)、内进啡肽(3亿1-晌16朗)、强仔啡肽(1饶7,爽9)、P弄物质潜、Y松肽肽类苍激素井：催胸产素男、胰高伙血糖令素、康促肾胸上腺睛皮质柳激素湾、加压些素等其他定：生栏长因堆子；饮短杆绘菌肽；青霉冠素等二、椒蛋白钟质的眠一级溉结构(p妨ri也ma划ry苦s世tr却uc浇tu铁re搭)一级筑结构苗是指基蛋白闪质的趴多肽戒链中殊氨基笨酸的位排列去顺序杆；主卡要靠傲肽键质维系悼。二～脆四级叔结构什称为落蛋白蓝质的伍空间文结构上，或烦空间穷构象请；主选要靠制次级吨键维业系，优尤其劈燕是疏拦水键倾。一级巡寿结构千体现说生物详信息蹈：2镇0n……街……优.多嫌样一级顽结构茶是空蛛间结序构及绕生物渗活性批的基特础…阁..瞧特异（一装）蛋砍白质赌的氨且基酸苗组成氨基爷酸组渗成的迈种类施、含苗量蛋白僵质纯悬化蛋白禾质彻灭底水统解成变氨基掘酸利用封层析渠技术温将氨扫基酸艰进行贤分离氨基体酸定眯性定链量分诸析蛋白页质氨化基酸挤组成拨：残基产质量仁百分尤数氨基枝酸分街子数森目例题旱1：逮10谎0g赖胰岛点素经蜜过分报析苯香丙氨授酸有炼8.呀6g厅，苯洒丙氨译酸残我基质健量百袜分数汪是多拳少（苯奇丙氨脖酸相膜对分热子量柳是1座47皱，苯沈丙氨筐酸残棵基1桨65少）8.恼6X订(1抽47赞/1脏65纺)=辛7.帖7g例题纠2：奖胰岛华素的术相对愉分子贱质量抽是6羡00线0，湾经过看分析勤丙氨缺酸占粥4.按6%分，请调计算被胰岛尺素中泥有多棉少个没氨基嘴酸残登基（丙纺氨酸项相对匠分子葬量是晓89已，丙专氨酸粮残基川71馋）4.艘6%舌X(娱71教/8乱9)锄=3摸.6青6%60聋00紧X3错.6络6%谣=2充1921钱9/校71纸=3三、薄二级惯结构蛋白爱质的锈二级纸结构配是指多肽诞链骨毙架原搭子的相对空间位置，不涉担及侧盟链的构膊象，直也就扶是该曾肽段狠主链曾骨架棚原子海的相痰对空若间位拐置，尼主要蛛有α-专螺旋阔、β姐-折柄叠、丝式β-凑转角胸和无授规则振卷曲。维刃持二暂级结大构的对力量拥为氢键。构型截：不可对称爽化合外物中乡丰不对注称中朗心上发的几借个原纯子或畅基团眠的空乞间排务布方渣式。达排列觉方式咏改变光共价野键形余成或祥破坏灿，与围氢键态无关罚。构象服：分撕子结隐构中搬一切营原子膜沿共土价单贸键转边动时虾产生枣的不饥同空齐间排饼列。遣不改崭变共遍价键捉，涉岭及氢杀键的饭形成毙或破点坏。1、α-搏螺旋(α叛-h唯el型ix弯)血浆鞭蛋白者、多认肽激昂素、笔钙调夕蛋白躺、蛋耻白激谈酶角蛋村白、塌肌肉贪的肌维球蛋搞白，湖数条凯α-兴螺旋震缠绕慌，机也械强缠度、爽弹性蛋白船质表泛面存悔在α枣-螺呀旋，期具两妈性特翻点ψ国-4捡7°罪φ需-5蓄7°1、双α-镇螺旋厅(α悬-h技el蔑ix么)右手崖螺旋零：3暑.6唤个A寻A/址圈，妇螺距掀0.拿54膜nm怖；每个狸肽键迹N-清H与现第四渡个肽宝键的环羰基焦形成签氢键氢键蝴维系洗：链都内氢虎键（艳AA1…A榜A4），犬平行阀长轴味；侧链货伸出溜螺旋SN：S为跪螺旋两每圈女的残蹈基数教，N铜是形莫成氢促键O活与N抛原子归间在雅主链五上的灶原子盈数3.你6131、α-妹螺旋(α碑-h真el迟ix键)蛋白吃质中矿都是胃右手唤的，壁右手资比左貌手稳粗定2、腔β-巡寿折叠日(β盼-p纹le植at搁ed窄s亿he纺et株)多肽份链充耻分伸奸展，伏肽平珍面折意叠成肝锯齿删状；比α-细螺旋更坚盏硬肽键框4个倡原子任处于贷同一勉平面碧，α言-碳卸原子墙位于匠折叠弟的角轨上2、尺β-疏折叠却(β营-p遮le最at靠ed赖s掏he滨et蝴)侧链却交错竿位于垫锯齿灭状结需构的仗上下鼠方，与堆棱角荣垂直2、赌β-胡折叠麻(β逼-p愉le伏at低ed拉s水he虾et着)氢键速维系筐：氢破键的盲方向壳垂直换长轴娇；不同熟肽链啄、同姓一肽营链不傍同肽贼段，查所有狭肽键筛参与可有天顺平僵行片冻层和众反平近行片绝层结肤构。2、推β-壤折叠尚(β注-p图le取at摸ed衣s廉he驴et户)顺平扶行β圣片比塌反平原行β负片更墙规则丢，最马适合经氢键嫂形成顺平驶行β皮片是阶大结仓构，监大于强5个拖，反菌平行趟β片汇可以厚少到背两个球状斗蛋白土是顺庸平行椅反平庆行都禁有、像纤维久状蛋痛白主我要是庸反平线行3、爸其它（1后）肽宽链主消链出疗现的彩18既0°胸回折球部分册称β跑-转车角。由4罩个连胳续氨炕基酸念组成订，第贝一个究残基仓的C挪O与遣第四娱个氨距基酸阳的N拦H形轻成氢供键。甘氨畏酸和克脯氨搭酸β-森转角冰在球具蛋白坦中大勤量存踢在，则约占刷全部啦残基奴的1绒/43、怖其它（2允）蛋执白质兴分子冰中那醒些没芽有确抛定规刊律性惕的部汪分肽鉴链构纪象称凡为无常规卷并曲。影响皆二级辜结构者形成牢的因旷素四、唤超二筑级结东构、丑域结祝构1、枕超二贿级结柿构(惨s速up馋er姜se铜co羡nd白ar闷y梁st徒ru直ct忆ur微e愉)（1竭）基耐序或淡模序允（m辨ot酸if役s商or法m羞od骡ul奴es眯，模乎体符斥）在一些半具有碧特殊俩功能卖的球火状蛋白嫂质中迟，由若弯干个相邻桨的二疗级结菌构单贺元按朴照一扔定规来律有钞规则衰地组揉合在蔑一起丝式，相咐互作寻用，喷形成去在空栽间构文象上乞可彼缠此区剪别的部二级馋结构想组合袄单位称超鞭二级茶结构或模序握。它来们可似直接球作为蜻三级题结构以的“陕建筑禾块”唇或域瞧结构果的组印成单钢位，燃是蛋铲白质萄发挥明特定隐功能奥的基块础。（2腿）类碧型：博αα祸、β纪β、否αβ揪α、诵锌指助结构夹、亮绢氨酸宾拉链2、拉域结压构（膨do危ma湿in衰，结脱构域洪）域结务构是魔在较冒大的炕蛋白陈质分雷子中，一宣条长释的多练肽链售有时惯要先淹分别乎折叠拴成几博个相振对独合立的婶区域菜，在妨组装进成球令状或林颗粒庸状的座三级乱结构机。这籍种自冻二级颂或超毙二级彻结构矮基础两上形铸成的更特定页区域糠，称己为结茧构域蚁。短的粒多肽拣如果秤只有巾1个葡结构披域，如结构透域与澡三级戚结构辣为同娃一结涉构层覆次较大骗蛋白蒜质有扶多个辰结构绞域2、乘域结会构（辞do饰ma席in涂，结臭构域舒）每个轻结构弓域自丈身是锐紧密竟装配乘的结构笋域之富间的窜联系绣可以爸松散绣，可咳以形当成功汪能域具有凶相对考独立河的空竟间构疯象和嚼生物仔学功缓能同一厦蛋白风质中炉的结婶构域崖可以欺相同（硫残氰酸栋酶）或不紧同（木职瓜蛋猫白酶播）不同茄蛋白哲质中叫的结虾构域酬也可父能相厅同或趴不同五、术三级船结构蛋白裹质的贯三级容结构利是指拾在一绕条多悠肽链堤中所戒有原呈子的奶整体储空间纪排布采，包忙括主所链和个侧链稼。是由求不同禁区段咬上R熔基相无互作蛙用形沈成的透空间歼构象折。三级韵结构重的形仔成使坑得在开序列源中相贝隔较晚远的欧氨基盯酸侧豪链相慌互靠毛近。长度劲缩短收：球店形、扮椭球抹形、欲杆状罪，等多数知同时非含有治α-文螺旋乓和β戴-折辆叠氨基蚂酸位盗置由借侧链行极性堵决定他：非脾极性蒸（内闲）、侦极性伶（表历面，碎少数滩内部陶）、斜带电突（表进面）次级浊键维惨系：度疏水冈键、悠盐键壁、氢垫键、右范德晚华力弱、二题硫键功能者区：湾表面吧或特汁定部钟位蛋白浸质分个子中连各个舞亚基型的三牢维空坏间排祝布及难亚基派接触作部位伸的布妹局和治相互颈作用桨，称分为蛋浅白质始的四题级结视构亚基虽(s墓ub徐un傍it峰)：初寡聚牺蛋白恳中的占单条协独立抱的多娃肽链惊，具求有独番立的消一、刃二、搁三级摊结构娃，单成独存破在时笋一般球无生胀物学勤活性活。亚院基可桑以相鄙同或科不同蹲。亚基吹之间田以非煌共价鼓键联腐系，脖包括嫌疏水衫键（索主要尾）、惯盐键浅、氢眠键、嘱范德墓华力亚基抢可以叛相同苦或不多同亚基谁不一浮定只顶有一像条链宁（胰茅岛素字中A为链与评B链俭，二图硫键拼连接名)六、梅四级崭结构第四繁节恭蛋白腥质结筐构与竞功能俩的关猪系蛋白恩质一晚级结挎构是傅空间险结构设和生伯物功陆能的衫基础心，一疼级结青构决昨定空如间结销构；扫但一级级结消构并区非决爪定空亚间结举构的住唯一昏因素针。空托间结伶构是槐生物渣活性谦的直河接体葱现。1、远一级涛结构裤中的业保守皆序列芽决定捧空间柴结构（1吐）同妙一蛋小白质城不同甩状态供的比怒较：女一级宰结构跨决定误空间抛结构【经州典举势例】愿蛋白陷变性乓与复华性一、躬一级颈结构尘与功繁能的掉关系1、关一级忍结构激中的葬保守奔序列己决定益空间挤结构（2皂）不尼同蛋愿白质毒之间太的比孤较：王相似杨结构梅相似扶功能净、不资同结懒构不喊同功融能一、之一级伤结构株与功怕能的方关系1、阵一级膏结构改中的俩保守尤序列馒决定圣空间礼结构（3越）保赞守序磨列、舰保守风氨基娇酸改皂变，降功能谁改变税；保郊守氨铲基酸请不变架，功咱能不熄变【经剖典举资例】光分子足病一、良一级示结构洋与功骂能的阁关系2、职一级芹结构唱并非贫影响化空间杜结构伴的唯亿一因轨素分子愤伴娘揉(m挣ol刷ec可ul仿ar先c相ha序pe档ro继ns复，分呜子伴伶侣)浑：在跌蛋白凯质加冻工、柿折叠陶形成笨特定危空间岁构象扔及穿晌膜进渴入细锯胞器狗的转咳位过踢程中部起关婶键作典用的约一类孤蛋白杨质。Th木e曾Gr占oE乌L-肆Gr轿oE软S-解AD随P钳co青mp刮le餐x目cr晚ys舍ta不l袖st翁ru丢ct绣ur专e2、伏一级绍结构工并非热影响欺空间押结构臣的唯剃一因语素分子胳伴娘与未考折叠醉的肽蝴段（赏疏水园部分形）进自行可旨逆的枪结合趟，辅园助二阳硫键偷的正促确形币成；引导拖肽链棒的正股确折肌叠并辨集合胀多条屡肽链格成为临较大口的结缝构；可以桑解聚旧错误恳聚合索的肽迎段，胸防止务错误泽发生召。1、抱空间恰结构忌体现块生物宋特异茅性2、章空间便结构略体现邮生物纪活性3、甩空间壮结构锄的灵引活性次，体标现了念生物隆活性失的可策调节洲特性二、吩空间辫结构穿与功奔能的条关系空间羡结构孝中的赴特定况区域背体现林生物要活性肌红汗蛋白彻与血裕红蛋裤白别构筐效应昼（别犁位效凤应、览变位今效应央，al徒lo矩st挤er忧ic产e滔ff鲜ec闯t）：婚蛋白盗质分唇子的长特定剃部位间（调肾节部周位）秀与小护分子自化合险物（戚效应荒物）疤结合物后，低引起染空间回构象恢发生楚改变仙，从混而促厚使生捆物学增活性觉变化态的现远象称陕为变松构效劣应。觉包括紫正协槐同、宿负协摆同效呜应【经糕典举序例】帜血红毒蛋白寻（H骑b）脖：由椅α2β2四聚烟体组竖成，享每个下亚基棍含有苍1个筒血红浴素辅肥基；查Hb挑的氧叔解离愈曲线麻呈“场S”阁型。多种预空间粪构象阔，多歇种活牛性状捏态4、闷空间浩构象按并非逼生物蠢活性携的唯省一影夺响因买素【举屠例】谊低温蛙下酶联活性程低，垄但并撇不影京响构齐象；乳盐析丘时沉毛淀的笼酶无笑活性章，但董构象做不变及。5、张蛋白膨构象皂疾病面：错误缸构象瞧相互稼聚集委，形泉成抗米蛋白铺水解荐酶的耀淀粉汁样纤滨维沉删淀，欣产生轨毒性萍而致获病。老年砖痴呆疯牛逃病亨汀的顿舞拒蹈病1、捷蛋白薄质的婚变性简与复月性去除介部分鄙变性鼻剂温和储复性温和识复性天然纱蛋白（具鲜有正提确的木一级誉结构路和高霞级结漂构，独因此蕉具有奇生物身活性重）变性雅蛋白（具从有正害确的蛋一级腹结构迅但无矛高级宣结构滤，无沈生物百活性唱）变性询环境非天纠然蛋康白（具汤有正日确的页一级根结构档和错颂误的假高级验结构盛，无委生物牢活性绪）【经擦典举拿例】两Rn述as息e蛋白破质的活性踏状态扛与非硬活性读状态2、招前体叛蛋白寄与活萍性蛋培白的锦转变（切除冗余及其它变化）前体蛋白（一级结构冗余，高级结构错误，因此无生物活性）活性蛋白（具有正确的一级结构和高级结构，因此具有生物活性）适合环境【经扒典举稿例】邻酶原独激活跟：胃源蛋白野酶原异切除蚀N端菊42哲个氨斩基酸高后形刑成活倾性中渡心及握其他狂空间医构象少，转教变为绞具水遣解蛋奇白质予活性笛的胃客蛋白径酶；仪胰蛋痰白酶用原切匆除N镰端6竞个氨伯基酸耕后形贱成活羊性中锅心及懒其他欠正确棍构象岛，转港变为唤具有胆水解略活性击的胰星蛋白璃酶。蛋白欺质的活性届状态锻与非它活性简状态3、透分子券病（mo着le字cu宫la拴r依di湾se秒as婆e）：侄由于盈基因莫结构芹改变载，蛋段白质献一级啊结构精中的努关键径氨基乎酸发代生改盯变，愤从而给导致西蛋白宜质功云能障拌碍，置出现稼相应殃的临叹床症砍状，怠这类苏遗传哭性疾朵病称疼为分肆子病喇。【经排典举梢例】鹿镰形晒细胞女贫血暮症：运编码血红胡蛋白β亚基的结宇构基稍因第平六个壶密码姻子由弦CT毅T→胆CA赌T，佩相应飘的多著肽序咬列中宰N端榨的第案六个厌氨基咸酸由筝Gl铁u→拦Vl五a；洽其空无间结其构发具生相洽应改时变，礼在表掠面形执成互隆补区谈，使游蛋白示质分吓子之点间彼愈此聚满合，委促使训红细楚胞在群低氧著压下仍变形煤成镰版形，狗丧失迈运输澡氧的剩生物卖活性。蛋白呆质的活性葬状态晓与非蒸活性艘状态4、寨蛋白逼构象携疾病奏：疯妻牛病艇，由品于朊鹿病毒弹蛋白兴（P语rP僵）构卸象改聚变导伪致蛋白白质柱聚集川，形劈燕成抗遭蛋白饶水解蹲酶的社淀粉银样纤艺维沉漫淀。（二级结构及其它变化）正常动物PrPc

（二级结构多为α螺旋、对蛋白酶敏感、水溶性）致病蛋白PrPsc（一级结构相同，但二级结构全为β折叠，抗蛋白酶、水溶性差、蛋白聚集成淀粉样沉淀）未知蛋白蛋白弯质的活性腾状态朋与非男活性藏状态第五贿节峰蛋白享质的仰理化卡性质灶及分辆离纯幻玉化1、青两性川解离坝与等普电点出：同嗽“氨凉基酸扯两性返解离阅”2、纽奉紫外缘瑞吸收耐：最编大吸啊收波绪长＝系28钥0n材m3、另胶体皆性质进：不蹄能透水过半显透膜4、山沉淀盏、凝绵固蛋白扎质在漏溶液皂中维寄持稳换定的犹因素扩：表面卡电荷塞、水带化层及（溶吊剂化时层）变性代蛋白敞不一更定沉佛淀，业沉淀晶蛋白祝也不之一定或变性一、粘理化这性质蛋白售质的但变性亚作用类：（1勤）沉乱淀：不稳判定蛋塔白质欢从溶盗液中缠析出（2沙）结枯絮：变性章蛋白蔽质不一讨定发矛生沉睡淀，士因为统电荷创稳定渠因素炕未被月破坏闸，当茎调节宿PH愤到等辟电点咽，立度即结逢成絮掘状不棍溶物哭的现煌象。絮状乞沉淀父可溶暖于强器酸、叫强碱（3懂）凝瞧固：絮状霸沉淀如加习热，门则变犬成坚晌固的犯凝块斜，不凑能再溶于强怀酸、统强碱的现惯象（1匹）变足性：在某泳些理稍化因拢素作纺用下郑，蛋驴白质派的空粥间结积构被艺破坏唉，从盾而导系致其烂理化动性质北改变锤、生枣物活协性丧禽失的滤现象悟称为渗变性膏。变天性不桌涉及斤一级邀结构绍的变须化。理化刘性质猜的变萄化：衔紫外其吸收歼、化侵学活也性及脆粘度堤上升谣，易遍被蛋披白酶狮水解打；溶援解度岗下降底、结镜晶能夜力丧蓝失。5、唇变性柄(d乘en以at尿ur堪at雅io叠n)量、复扶性(度re哪na穴tu套ra主ti乐on烂)（2兼）复鼓性（3枪）应栗用①利剩用变嘱性：酒精召消毒高压灰灭菌②防福止变候性：顿低温和保存纠生物证制品③取泼代变糠性：句乳品外解毒捉(用绸于急将救重乌金属导中毒嫌)6、赌呈色亩反应尼：双狭缩尿陷反应复，等双缩脾尿反运应可震检测据蛋白喜质的弟水解听程度二、短蛋白涉质的岛分离滥纯化（一斧）根遗据分语子大容小不字同的急分离皮方法1.压透析焰：蛋滤白质低溶液蓄装在波半透绞膜的按透析激袋里才，放往在蒸祝馏水佣中，总蛋白卵质溶俯液中毕无机价盐小巧分子正通过骡透析爱袋扩纽奉散入介纯水絮中二、削蛋白米质的趁分离帮纯化（一资）根莲据分区子大魂小不欢同的土分离晴方法2.牵超过杂滤：废利用尼外压贺或离论心力亿使水始和其绢他小矩分子衫通过禁半透慢膜，童蛋白骄质留含在膜问上二、衰蛋白被质的公分离乖纯化（一宏）根黎据分局子大库小不挽同的鞭分离广方法3.秩密度枣梯度营离心二、队蛋白通质的贝分离零纯化（一镰）根访据分控子大精小不锡同的任分离益方法4.绞凝胶捏过滤二、涂蛋白笔质的庆分离奖纯化（二徐）根随据溶屯解度腊差异扬的分钓离方陵法1.惯等电疼点沉蓬淀法蛋白剃质在呜等电律点时呀净电今荷为阅零分子佛间的佣静电少斥力绢