中药的含量测定

第六章中药的含量测定反映其制剂中有效成分、指标成分或毒性成分的含量衡量其制剂工艺的稳定性和中药制剂的质量优劣

1常用定量分析方法方法学评价2结果表示二丁颗粒本品每袋含紫花地丁以秦皮乙素（C9H6O4）计，不得少于1.8mg。二至丸本品每1g含女贞子以齐墩果酸（C30H48O3）计，不得少于8.0mg。十滴水

本品每1ml含桉油以桉油精（C10H18O）计，不得少于6.3mg。七叶安神片本品每片含三七叶总皂苷以人参皂苷Rg3（C53H90O22）计不得少于5.0mg。左金胶囊本品每1粒含黄连以盐酸小檗碱（C20H18ClNO4）计，不得少于5.5mg。红景天本品按干燥品计算，含红景天苷（C14H20O3）不得少于0.50%3化学分析法紫外-可见分光光度法原子吸收光谱法薄层扫描法气相色谱法高效液相色谱4第一节化学分析法适用于含量较高的成分及无机成分的测定包括：重量分析和滴定分析无机药物、总生物碱、总皂苷等5一、重量分析挥发法：水分测定萃取法：地奥心血康胶囊中甾体总皂苷测定沉淀法：西瓜霜润喉片中西瓜霜测定例西瓜霜润喉片中西瓜霜（以Na2SO4计）测定精密取约18g，加水150ml，振摇，离心，滤过，水50ml分次洗涤，合并滤液，加盐酸1ml，煮沸，缓缓加热氯化钡试液水浴加热，静置，用无灰滤纸滤过，沉淀用水洗涤，至洗液不再显氯化物的反应，干燥，并炽灼至恒重，精密称定，与0.6086相乘，计算，即得。6二、滴定分析：含量1%以上酸碱滴定法：生物碱、有机酸、内酯类

沉淀滴定法：含朱砂、红粉中药制剂配位滴定法：含Ca2+、Mg2+等矿物药制剂氧化还原滴定法：酚类、糖类及含Fe、雄黄等矿物药制剂71．滴定度（TT/A）计算

滴定度（TT/A）：每1ml某摩尔浓度的滴定液所相当的被测药物成分的质量（mg）如：每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相当于5.788mg的莨菪碱（C17H23NO3）（mg/ml）

82.样品中被测成分的含量计算直接滴定法测定：

返滴定法测定：

如：每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相当于5.788mg的莨菪碱（C17H23NO3）实际硫酸液浓度为0.01023mol/L则F=0.010230.019例颠茄酊中生物碱的含量测定（酸碱滴定法）

◆精密取100ml，蒸发至约10ml，加乙醇适量使溶解，加0.1mol/L硫酸溶液10ml，用三氯甲烷分次提取，合并三氯甲烷液，用0.1mol/L硫酸溶液10ml洗涤，洗液并入酸液中。

◆加浓氨试液使呈碱性，用三氯甲烷分次提取。三氯甲烷液用同一水10ml洗涤，合并三氯甲烷液，蒸干，加乙醇3ml，蒸干，80℃干燥2小时，残渣加三氯甲烷2ml微热使溶解。

◆精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）20ml，水浴加热，除去三氯甲烷，放冷，加甲基红指示液1～2滴，用氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）滴定。

◆每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相当于5.788mg的莨菪碱（C17H23NO3）。10试样100ml提取和纯化游离生物碱RN精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）20mlRN+-SO4和剩余H2SO4用氢氧化钠滴定液（0.02mol/L）滴定RN+-SO4和Na2SO4甲基红指示液11例：马应龙麝香痔疮膏中炉甘石粉测定（配位滴定法）试样约2g→加三氯甲烷溶散→稀盐酸提取→加缓冲溶液→加铬黑T指示剂→用EDTA溶液滴定例：小儿金丹片中朱砂测定（沉淀滴定法）试样约0.5g→加硫酸、硝酸钾→加热至乳白色→加水→加高锰酸钾溶液至红色→加硫酸亚铁至红色消失→加硫酸铁铵指示剂→用硫氰酸铵滴定液12二、可见－紫外分光光度法◆较高灵敏度、准确、价廉、简单。◆成分复杂，干扰多。◆提取、净化、显色。◆总成分测定：总黄酮、总多糖、总蒽醌等

131．比耳定律摩尔吸光系数ε：λ一定，溶液为1mol/L，厚度为1cm时的吸光度

百分吸光系数：λ一定，溶液为1%，厚度为1cm时的吸光度2．仪器校正和检定◆波长校正

◆

吸收度的准确度校正◆

杂散光检查143．对溶剂的要求溶剂截止波长：溶剂在1cm光径中透光率＜25%的波长。溶剂试样的溶解性、安全性溶剂的最大使用波长即截止波长15164．测碎定法●参比吸溶液刚的选纸择●λma班x，±2价nm●吸光饶度在0.佛3～0.丹7间⑴浇对照义品比季较法●cx为供促试品氏溶液芬浓度●cR对照恩品溶筛液浓络度●cR=(织10传0%躁±1迟0%休)cx●cx=(战Ax/AR)cR17例厅黄杨裂宁片计中环鱼维黄骑杨星D测定对照考品溶粮液：每1m及l含环泛维黄销杨星D征10致μg供试笼品溶愧液制障备：取样沙，置50酸ml量瓶捉，加0.使05股mo仪l/抛LN饱aH2PO4至近钱刻度案，80姿℃水浴骡温浸源，放精冷，画加缓吗冲液身至刻惑度，程离心恢，取斧上清卸液测定包法：精密疫量取奇二种照溶液悠各5m昂l，置垦分液赔漏斗请，各缎精密陵加溴疾麝香率草酚周蓝溶董液5m列l，摇巨匀，尊各精爽密加声三氯葡甲烷10拔ml提取逮，取载三氯迹甲烷池液，蛙加0.酷5g无水写硫酸宵钠，崇振摇输，静柱置，沙取上谈清液悔，以放试剂漆空白跟为参语比，东在41付0n哥m处分谅别测诉定吸户光度18⑵姨吸收雁系数踢法●百分吸收系数＞100●无需对照品●方法简便●仪器的校正和检定例掌岩白没菜素摩含量躺测定取约20摊mg，置50岗ml量瓶挨，加透甲醇毅溶解婆至刻尘度，灾摇匀绝，精俩密量将取1m练l，加学甲醇奴稀释鱼至25繁ml，以乓试剂除为空暴白，肌在27耕5n菌m测吸举光度介，按拜岩白侦菜素院吸收把系数24益8计算歌。19⑶馒标准尊曲线停法●标准盯系列垦一般统要求5～7个点●相关听系数模（r）不柳得小惨于0.掘99烫9●供试慨品溶铁液的昆吸光趟度在郑线性拴范围再中部例签排石狭颗粒叔中总心黄酮摄测定对照考品溶蠢液：每1m胃l含无芝水芦适丁0.盛2m放g标准恋曲线绕：精密拔取对馒照品紫液1m绝l、2m移l、3m挂l、4m服l、5m烟l，分疗别置10包ml量瓶退，加50末%甲醇挠至5m率l，加5%亚硝享酸钠0.卵3m度l，放膀置6m茄in，加10柱%硝酸蔽铝0.首3m屡l，加尺氢氧许化钠秀试液4m递l，加50阳%甲醇童至刻泳度摇槽匀，笔以试肃剂为币空白颂，在51毯0n妄m测定滤吸光的度样品胡测定瓦：··祸·20三、朗原子海吸收承分光压光度陶法◆准确佩度高◆灵敏铸度高◆选择权性好◆抗干辨扰能盒力强◆分析识速度鹿快含量储测定掘：龙劣牡壮区骨颗携粒中潜钙四、贷荧光仰分析抽法有害室元素迈的检狡查：Pb、Cd、As、Hg、Cu共17个品偶种项21薄层败洗脱新定量薄层臭上直删接定桐量薄层递扫描扫描棒方式测定目方式五、忽薄层于扫描患法22六、辫气相松色谱芽法●以气谢体为游流动灭相。●分离论效能赚高、忧样品种用量锹少、柜分析唉速度眼快。●适合绿于含词挥发酸性成晃分的板中药针鉴别耳和含腊量测喝定。●可与MS、IR联用肾。23农药仅残留使量的神检查腥：六六岛六、DD腔T、PC炸NB甘草匪、黄恭芪、迹人参龟茎叶鹅总皂气苷、详人参撇总皂炭苷树脂陵残留畏溶剂驾检查贯：正己汗烷仙、甲泊苯国、对撤二甲积苯毛、邻添二甲裤苯忆、苯静乙烯鲁、具二乙抛基苯图、询二乙锣烯苯放、菊苯。触三七库三醇液皂苷毒、三计七皂敲苷、摧灯盏随花素24（一榴）基已本原浑理1．塔尾板理砖论H越小柴，n越大射，柱令效越倒高，苍分离稼性能枯越好2．速手率理袋论H=缓A+独B/担U+汉CU指导术分离荷条件哲选择派：载级体粒很度和断分布面、填套充均旧匀度漫、载核气种饺类和月流速疲、柱赖温、搂固定夜液液辣膜厚测度25（二食）系裤统适冒用性溉试验1．色殖谱柱化的理垒论板骆数（n）：嗓规定吉最低户板数2.分离度(R)：R≥子1.秘53．重授复性嘴：连漠续5次，RS寸D≤老2.你0%4．拖课尾因致子（T）T应在0.追95～1.驱05之间26（三枕）仪角器一积般要荒求与绑条件脚选择1．载冰气源叉与载其气的初选择：一般纪用N2作载锦气2．进煤样系梨统：直接沿进样鉴或顶咸空进针样；分充流比柴；进样民口温钻度高蚊于柱乔温30～50亏℃；3．色缝谱柱发：填或充柱角或毛议细管述柱怎；常拉用固磁定液评：甲螺基聚趁硅氧薄烷、晃苯基色甲基素聚硅旺氧烷营、聚缸乙二艳醇等274．柱稿温的胖选择纳：扇恒温疗和程誉序升拣温野；柱冠温低垒于固镰定液极最高践使用竞温度川；合敢符要点求的收前提好下，早尽可供能采哗用较唇低柱披温5．检今测器：FI斜D；温码度应坦高于坑柱温昌，＞15爱0℃28（四坊）定牌量分隆析方鲁法●内标场法●外标屋法●归一毒化法●内加哀法291、内席标法内标码物溶吼液：如水匹杨酸巴甲酯芳，加义乙酸篮乙酯万溶解对照蒜品溶威液：如龙畜脑，尿加内殖标溶页液溶迁解供试普品溶屈液：如冰辅片，疗加内礼标溶绍液溶书解取样狮量m定容犹体积戒如：50京mlcsmg/mlcscimg/mlmg/mlcscxmg/mlmg/ml30进样降体积V，如1μ偿ltmVtmVtmVAsAiAs/Ax内标百液对照也品供试辩品则求帖出cx31内标非物须处为原照样品投中不饼含有众的组因分对内绒标物晚要求冰：内标决物与零待测波物保拉留时武间应箱接近由，且R>漫1.卫5内标缘瑞物为佛高纯尽度标拒准物碍质，永或含冲量已环知物搞质内标煤物与级待测敬组分春的理秩化性脸质相回似32●消除车进样另体积胸的误有差。●只需嫌待测识组分蛮和内计标物魔出峰●适合辫测定满微量忧组分优点呼：制样疼要求剩高找合讲适内秩标物街困难已知节校正歇因子缺点舱：33例：情丁香填罗勒责油（雕丁香推酚测鸣定）固定财相：二甲城基聚谈硅氧圆烷（SE趁-3础0），亦浓度退为10瞒%柱温蠢：11怖0℃内标斤溶液棚：每1m萌l含20突mg水杨捐酸甲狮酯的耀无水训乙醇驳溶液校正肯因子宣测定菠：精密着取约50烫mg对照辫品，虏置10竹ml量瓶庙，精帝密加洽内标铃溶液2m锻l，加帖无水沿乙醇挪稀释恐至刻份度。残吸取2μ栽l进样蹈测定供试螺品溶灭液制踏备和挪测定图：精密蚕取约50尺mg，置10谎ml量瓶鞋，精印密加奇入内烛标液2m背l，加它无水乏乙醇国至刻幅度，军吸取2μ肌l进样椅测定34a．工作范曲线赴法：c．外标副两点殿法：前提忘：各次明进样路量要迅很准猴确操作门条件圾要十然分稳答定b．外标形一点童法：sisiAACC=2、苏外标怒法35例：小冠心锦苏合奸丸（岔含土强木香济）固定楼相：聚乙热二醇20睛00坟0（PE生G-库20蜜M；柱财长30转m）柱温看：19膏0℃（30分钟喝），12氧0℃铺/分钟抵升至24倍0℃对照葱品溶母液：每1m南l各含0.意2m杜g土木顾香内葛酯和础异土柔木香迅内酯纹的乙茄酸乙鹅酯溶倍液供试照品溶岂液制圈备：精密疫取约8g，精谎密加典硅藻座土8～12拌g，研歌匀，掀精密摆取约6～8g，精既密加练水饱倒和的舒乙酸雅乙酯25税ml，称缎重，盛超声纳处理疗，补歉重，痰滤过363、归榨一化饺法′37应用盖：药物膊中杂童质和劣杂质穷总量凉限量浸检查前提颜：●试样宵中所北有组桂分都院产生需信号并能纵检出巧色谱俩峰●38七、悦高效旷液相坑色谱后法●仪器烂性能基稳定●灵敏穿准确●分离员模式辜多●检测帝手段似多●应用迟最多391、色抛谱柱C1躬8柱：（oct洲adec周ylsil温an姥eOD字S柱）C8柱：－(C偏H2)7－CH3，罂疫粟壳朱、辛夷魂、芽地奥翁心血贫康苯基监柱：－(C渔H2)3－C6H5，莱菔妇子、椅忍冬及藤氰基绿柱：－(C屡H2)3－CN氨基卷柱：－(C凤H2)3－N纱H2，苦午参、湿毒戒清胶窃囊（一葡）仪膏器一喘般要百求与储实验砍条件国选择402．流久动相●溶剂志种类封：测甲醇捆、水台、乙诱腈●配比●pH值：朵乙酸瞒、磷闲酸山、氨协水、寇三乙荣胺●添加消剂：辛烷羡、庚符烷和垃十二践烷基秩磺酸载钠平消疮片狭中士样的宁册测定剃：流动蹦相：叹乙腈-0球.0慢2m助ol布/L磷酸哥二氢昨钾与0.屑01海mo续l/坚L庚烷配磺酸茎钠等跟量混泡合液楚（用10难%磷酸栗调节pH悼2.会8）（21传∶7叛9）41天麻株首乌遥片（搂二苯垮乙烯后苷）固定珠相：OD堵S流动珠相：乙腈-水（22循∶7究8）检测丽器：UV下D3屋20巡寿nm对照护品溶叼液：每1m绵l含40艺μg的甲剧醇溶堤液供试晋品溶累液制替备：精密惠取约2片，逝精密传加甲恩醇25懂ml，称圈重，颤加热书回流退，补沟重，既滤过测定炊法：精密衫吸取狱二种往溶液就各10炉μl进样达测定规格值：不得甚少于0.塔20塞mg期/片42蒸发姑光散斗射检叶测器驼（EL围SD）◆线性商不过豪零点◆线性非范围止较窄◆低浓科度非茎线性◆二点笨对数公方程碰法43I＝kmb定量订关系峡：lo婚gI＝bl架og浅m＋lo征gkI为散搭射光男强度炊，m为组被分质椒量44例终金贝慕痰咳析清颗以粒（包贝母纹素甲搬和贝既母素您乙）固定溉相：OD肾S流动弯相：乙腈-二乙验胺-水（63欠:0苗.0军3:慨37）检测嫂器：EL衣SD对照灿品溶拴液：每1m危l各含0.侵25繁mg和0.动15红mg的甲在醇液供试羡品溶袍液制灿备：精密戏取约2.虫5g，加洽氨试妥液4m客l，浸盾润1小时弦，精饶密加圾三氯苗甲烷-甲醇荷（