Ⅰ型糖尿病自身抗体检测

Ⅰ型糖尿病自身抗体检测

糖尿病的分型诊断的进展1979年WHO提出了原发性临床糖尿病分为胰岛素依赖型和非胰岛素依赖型，依赖型与非依赖型的区别主要依据胰岛素β细胞功能受损的程度，临床上是否依赖胰岛素而言，并不反映其发病本质1997年WHO建议取消依赖型与非依赖型，改为1、2型。1、2型的区别要看病因是否由胰岛β细胞自身免疫破坏造成，1型与2型是完全不同的两类疾病，但2型非依赖型可发展成1型胰岛素依赖型，成人缓慢进展型就经历了这个过程。WHO（1997年）建议的糖尿病

分型方案

1型糖尿病（T1DM）胰岛β细胞破坏导致胰岛素绝对缺乏：A.免疫型；B.特发型2型糖尿病（T2DM）胰岛素抵抗为主体的胰岛素相对缺乏，或胰岛素分泌受损为主体的胰岛素抵抗其他特殊类型糖尿病妊娠期糖尿病

1型糖尿病的流行病学主要见于15岁以前的儿童和未成年人；亚洲及我国发病率相对较低（我国儿童中的发病率为0.59/10万每年，全国T1DM的总数至少200-400万）各国的1型糖尿病较以前有逐年增加趋势；不少地区的1型糖尿病的发病率与季节有关1型糖尿病的发病机制

遗传易感性环境因素感染、饮食、地理、气候

β细胞自身免疫损伤

β细胞破坏、功能损害胰岛素分泌缺乏

1型糖尿病的病程β细胞量1型糖尿病的病程遗传易感性环境因素胰岛素正常自身抗体阳性血糖正常胰岛素↓血糖正常应激血糖↑胰岛素↓↓血糖↑80%β细胞破坏胰岛素缺乏临床糖尿病1型糖尿病和2型糖尿病的比较

T1DMT2DM

起病急进行性内源性Ins低或缺乏正常，升高或降低酮症常见少见发病年龄各年龄段绝大多数为成人体重通常非肥胖肥胖或非肥胖治疗Ins饮食，口服降糖药，Ins

家族史10-15%30%

孪生子发病一致率30-50%70-90%HLA相关HLA-DR,HLA-DQ无关自身抗体多见（>85%)少见1型糖尿病和2型糖尿病的区分一般<30岁，起病急，中到重度症状明显体重下降，消瘦，尿酮或DKA空腹或餐后C肽低下免疫标记物(GADA,ICA,IA-2)

是否

T1DM

T2DM免疫介导型1型糖尿病亚型的特征急性发病型缓慢发病型（LADA)患病率（%）约80%约20%性别男女相近男略多于女起病年龄多为儿童青少年多为成年人，一般>30岁起病方式急，有者以酮症酸中毒（DKA）发病酷似非肥胖T2DM，多在病后3年内发生DKA糖耐量减低发病时严重数年后显著或严重伴其他自身免疫病常无可有（Addison，恶性贫血，重症肌无力等）依赖Ins治疗发病后即依赖初期对饮食和/或口服降糖药有效随后依赖胰岛β细胞功能发病后即严重受损，血中C肽水平低或侧不出发病时尚有残存功能，数年后同急性型β细胞自身抗体起病时急剧升高，发病后下降，数年后可阴转低水平持续阳性，有人超越10年抗胰岛细胞抗体(ICA)

1974年Bottazzo采用间接免疫荧光法在胰岛素依赖性糖尿病患者血清中首次检测到抗胰岛细胞抗体（isletcellautoantibodies,ICA）。ICA是针对胰岛细胞内多种抗原的一组抗体,其靶抗原至今尚未完全阐明。与糖尿病相关的自身抗原不仅在β细胞表达，这些抗原的组织分布可分为：

(1)β细胞特异的，如胰岛素；

(2)胰岛细胞特异的；

(3)神经内分泌特异的，如分子量为65kD的谷氨酸脱羧酶（GAD65kD）、ICA512、神经节苷脂（ganglioside）、脑硫脂（sulfatides）等；

(4)较广泛的分布，如HSP62等。目前所知的ICA主要抗原的是谷氨酸脱羧酶（GAD）和酪氨酸磷酸酶（IA2）检测方法：间接免疫荧光法组织化学染色法免疫沉淀化学法

ELISA法

目前ICA的检测方法主要是以猴胰腺为基质的间接免疫荧光法，但易受组织的固定方法的影响。抗胰岛细胞抗体与胰腺的内分泌部位反应，可见所有胰岛细胞胞浆呈现均质到颗粒型荧光。检测方法的标化：

1983年瑞典的Ludvigsson为一名1型糖尿病新发病者做了血浆置换,这份血浆在青少年糖尿病基金会(FDA)组织的ICAs定标实验中,在参加这项工作的所有实验室检测时均为ICAs阳性,于是用这份血样定出了ICAs的JDF单位,并逐渐成为国际上较为通用的单位。敏感度81%(44%～100%)，特异度96%(64%～100%)特异度较GADA和IA2A差ICA可作为早期预测指标能早于T1DM发病8年前被检测出高滴度的ICA（大于20-40JDF单位）预示疾病进展的高危险性。大部分T1DM病人的ICAs在发病2年后消失，ICA持续阳性超过2~3年者，仅占T1DM的10%。ICA滴度的持续高水平通常与β细胞的损伤有关，ICA的水平与C肽水平呈负相关。ICA和其他胰岛自身抗体（如GAD或IAA）同时阳性对疾病更有诊断价值，这类病人发生T1DM的危险性是仅ICA阳性的病人的3-5倍。IC存A在不郊同人养群中老的阳阻性率IC荣A的检教测对1型糖智尿病嫌有很烘好的海预测慎价值

人群阳性率（%）健康对照组0.1-0.2T1DM患者直系亲属2-5新近诊断的T1DM患者60-80T2DM患者5-7谷氨枯酸脱浅羧酶均抗体(G轰AD丢-Ab)谷氨寻酸脱听羧酶γ氨基显丁酸（GA语BA）的祥合成攀酶表达班于人趋脑及拣胰岛补中均拐有，懒主要废位于拘细胞阻浆中具有某抑制彻生长害抑素嫂和胰蓬高糖袋素分枕泌的寻作用斯，并恋可调属节胰勉岛素翁的分鹊泌和现胰岛凯素原胀的合壁成19猴90年，Be献ak颂ke形sk崖ov首次偿证明GA耳D是1型糖勇尿病矩的自章身抗耐原GA裙D分子锻存在65熄kD和67呢kD两种倘形式围，两鸦者在慈氨基慕酸水在平上该有65篮%的同横源性唱和80蜻%的相膛似性海，免娃疫源铃性也猛基本删相同替，目喜前认员为T1传DM中抗GA陪D6券5抗体宋更常稻见检测净方法任：免疫辽沉淀瓜酶活灭性法放射物免疫座法EL拣IS斑A法间接稍免疫崇荧光树法化学芦发光欧法最常旦用的GA乐D-Ab的检狭测方覆法是EL酷IS滴A法和双放免倍法。放免到法由束于存梨在放稻射性搅污染青目前行已逐遥渐被EL司IS熟A法替越代EL哨IS厕A法采次用亲他和素放和生情物素傅扩大连级联含反应应增强拾了检物测的昨敏感衫性GA域D检测震方法钟的评杨价GA谋D自身危抗体:4转1个实许验室宝测定途了血部清GA絮Da渐b,其中威多数筒运用歌重组禽人GA黑D的RI突A法,其调克整敏境感性街是0～91贵%垃(平均81病%蓄)。EL涛IS家A法与RI帝As法比费较,有较掏好效煌果,其调稀整敏阿感性77旬%河,双管赏测定凭的阳针性或忧阴性野一致楼性为10尊0浅%。在12洗5例血祥清RI饶A法的困阳性闹率为22恐.4财%，EL经IS可A的阳炊性率亿为26淋.4颤%，季两者冰的显浊著相移关（P=损0.跪02桂5)。均司与IC还A显著塞相关P值分溪别为0和0.哭01。服说案明EL由IS奏A法可号以替罢代RI矩A法做饲为1型糖猛尿病愈自身饼抗体绍筛选苗的有保效手末段。（RI弓A试剂——欧蒙陵公司繁；EL除IS乒A试剂——美国BL穿OM蛙ER枝IC油A公司钉）GA虾D在T1陷DM发病洋机理繁中的失作用分子幸模拟(m士ol隐ec罩ul齿ar孟m泪im舞ic觉ry费)机制兼致病怜学说凶：病毒弃蛋白举如柯宫萨奇B病毒p2往C蛋白脱肽段,胰岛β细胞育抗原路分子愁谷氨过酸脱吸羧酶(G象AD恋)的部耳分肽秆段序售列相填似,前者(外源鸦性蛋广白多片肽)在诱岸导机灶体产及生免驴疫的弓同时,亦可昆能诱轻发针精对自热身胰担岛β细胞纹的攻彻击，粘导致β细胞转的损贯伤。GA刘D-Ab具有椅与β细胞呜缓慢考损伤阀相关恳性好鲁、出营现早旨、持糟续时挡间长门、年屡龄跨状度大爷、阳别性率著高、烛检测珍易标倍准化夏等特愿点，键是目述前公箩认的解诊断LA版DA及预精测胰恼岛功避能的死免疫薪学指撇标GA忌D-Ab可于电发病谦前10年测裤出，茂且在市此期肿间呈水高低拼度持汁续存主在，浆约80埋%新发并患者芹血清唇中GA糖D阳性眉且水煤平较耻稳定绑，病矿程10年以讽上仍靠存在姐高滴蜡度GA攻D抗体岸。GA若D的临拍床应标用GA昌D抗体静在大姿多数T1紧DM患者逐中阳韵性，艰且阳物性率爽不随抛病程冤延长慌而下备降。实验著显示凤新诊旱断的碗患儿括中GA戚D抗体须阳性庄率为74杠%，长吩病程死者为67庙%，而络他们学的IC冤A阳性这率分议别为64炼%和14昌%。如在橡初发T1昂DM患者骨中查角到GA朗D抗体婆有助豪于排捡除T2汇DM，以为助于DM诊断呀分型怀并指忘导治枝疗。在T1瘦DM一级攻亲属愧（高规危人点群）修，33瘦.3民%的GA负DA阳性渣者可灭能患TI肚DM。TI从DM一级设亲属扭中GA绒D抗体桥阳性依率为15宝%左右暴，其之中1/雁3在6~诵18个月寨后发母展为T1劫DM。GA朱DA在僵样人综农合征租（SM检S）中柳的阳目性率抚为10督0%费,此外野还见赏于与T1稻DM相关踢的多某腺体遗自身况免疫川综合机征。GA剂D在不厕同人嚼群中池的阳悦性率

人群阳性率（%）

健康对照组0.3-0.6T1DM患者直系亲属3-4

其他的自身免疫性内分泌疾病患者1-2

新近诊断的T1DM患者55-85T2DM患者10-15

妊娠糖尿病10抗酪纺氨酸役磷酸骄酶抗竟体(I公CA雅5球12煤/I辈A门2a陆b)IC肚A竞51毙2/劝IA糖2是利能用1型糖矮尿病锋患者莫或其鞋前期杯病人扰的血众清免泳疫筛私选胰阵岛细樱胞的cD中NA文库筝得到械的一锣个新佳的β细胞货自身汪抗原琴。其氨染基酸理序列思与T淋巴稻细胞成蛋白仇酪氨沾酸磷孕酸酶(P词TP役)C脂D4哥5相似微，而桌碱基严序列主与人肺胰岛亭素瘤澡克隆椒的cD刷NA(I绣A2见)相近肥。No御rt产he没rn印迹皆示IC写A讨51袜2/蓄IA晃2在胰川岛、夺脑和怀垂体蛾中均成有表预达。Ra湿bi稻n等发既现IC卧A5票12实际省上是IC妹A的一冒个片衡段。IA往2A存在照于大仍约65谨%（55察%-怕75鄙%）的唯新发T1钻DM病人适中，四而正怪常对弟照人腐群中麦阳性足率小钉于1%。IA搁-2爆Ab特异喂性强,在不用伴1型DM的自猎身免椒疫病率患者旗中较招少发摄现。T1渠DM患者竭中IA巩2A阳性模率可早能受深多种辉因素爸影响跨，15岁以呈上T1马DM者IA澡2A阳性斥率最掉高，表随增形龄阳晨性率垦逐渐直下降叫，但滚其发摆生率都与DG先A抗体个无关主。携带IA特-2抗体滤的个喘体在5岁时穗患Ⅰ型糖娇尿病戚的风年险是34岁时娇的11倍。检测取方法酶联朋免疫群吸附换分析这法(浇EL辅IS仇A)放射搂配体熄分析车法(R肿LA有)35S标记疏的放河射免备疫沉传淀法抗胰谢岛素贷自身谊抗体(I馆AA动)IA方A的识脑别的是抗原植表位才是胰缝岛素A链的A8塘-A谣13残基守和B链的B1把-B筑3残基IA深A与逆斧转录壮病毒垂的p7局3蛋白蒙间存毒在交垫叉反境应，迹提示仪内源蓬性的工逆转创录病词毒感水染与T1猜DM的发致生有饲关IA宫A与胰财岛素算治疗评诱导拖的抗百胰岛伤素抗迷体相压似IA瓜A在新绩诊断厌的T1啦DM患者朝中的沉阳性圾率为40什%，多恒见于忘儿童承（≤4岁）吴，在奇成人血中的急阳性马率仅丈为4%，在5岁以块前发际生的IA纯A阳性稼率达50院%，IA搏A滴度船随增欠龄而侵降IA跃A与IC如A相关鸟，在逢高危凤人群秤中约40展%I求CA阳性扇者IA且A阳性烫。IA半A水平类与T1寸DM发生委的速足度呈候相关筹性，宝高滴筋度IA毕A者发残病较法快检测岸方法放免敬法；EL浙IS劫A法不同龄实验煌室及榜不同亮方法晴测定IA程As,结果震的一控致性宴显著言低于IA案2A和GA劝DA洁s。自身蹄抗体趟对T1萄DM的诊败断伙敏感厕性和该特异起性自身抗体敏感度（%）特异度(%)IAA40~7099GADA70~8099IA-2A50~7099ICA8495T1答DM患者颤中胰楼岛自配身抗约体的字阳性浇率常患因种钩族、虑发病动年龄年、病捕程和妨临床红亚型委不同鞭而不痰同。房诚单一恨的自锈身抗桃体的别检测野缺乏致最佳殃的敏岁感性馆和特只异性抽，目谦前常缠采用宝多项告自身擦抗体欺的联圈合检咬测，指对T1垫DM的诊缴断准瓦确性姨更高IA厨2－Ab联合GA洲D－Ab及IA附A两种呼以上厘抗体配阳性伐具有68筝%的阳洞性预畜测价常值,怎80俱%敏感确性和10敢0椒%特异隆性。预测则率最忘高的叼组合注是IC补A加IA笔-2候A和（贡或）IA姿-2致β抗体井。另蜻一项途研究肿发现拥采用础两步厘筛查油法，前即先阿筛查IA叉-2僵A和（宜或）GA良D抗体隔，然南后筛亚查IA陆A和（服或）IC柄A，对趴糖尿董病的客预测昨敏感垃度最饲高枝。另有风人认吼为IC璃A的检掉测缺所乏稳邻定性朗，通肥常所描用的奏间接装免疫张荧光要法仅洒能做锐到半武定量霸，而材推荐愿使用IA韵22蛛Ab联合GA何D2少Ab及IA纠A的筛雁选组芒合。近来,国外步还建茂立了汇一种GA点D-Ab和IA缓2-意Ab一步缴性联膊合检牢测法斩。其录结果映与GA荡D-Ab、IA忙2-背Ab分别怖检测有结果朋高度弓一致游。此坡法简断单高忧效、创成本袋低、狭重复持性好,并可狠用毛傲细血避管血恩作为争标本,适于两在一龙般人恨群特滑别是资少儿艘中进樱行普架查。胰岛虎细胞自身况抗体吸的组箱合预测Ⅰ型糖长尿病跟踪否的年叶数糖尿吼病的恼发病慌率Pr饥og奋re脉ss缝io智n渗to骑D组ia健be层te扒svsNu仆mb锦er登o议fAu肃to因an贪ti渴bo田di晴es(G寒AD盟,