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文档简介

和气相色谱一样，液相色谱分离系统也由两相——固定相和流动相组成。液相色谱的固定相可以是吸附剂、化学键合固定相（或在惰性载体表面涂上一层液膜）、离子交换树脂或多孔性凝胶；流动相是各种溶剂。被分离混合物由流动相液体推动进入色谱柱。根据各组分在固定相及流动相中的吸附能力、分配系数、离子交换作用或分子尺寸大小的差异进行分离。

色谱分离的实质是样品分子（以下称溶质）与溶剂（即流动相或洗脱液）以及固定相分子间的作用，作用力的大小，决定色谱过程的保留行为。高效液相色谱法基本原理

液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致。但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中的气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同；此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定差别：Csm为静态流动相传质阻力系数高效液相色谱法基本原理组分在色谱柱中运行时间不同，导致色谱峰展宽。影响因素：固定相的粒度和填充均匀程度涡流扩散项A减少方法：

a降低dp：目前商品柱多采用3-5μm粒径

b降低λ：采用球形、均匀分布固定相。高效液相色谱法基本原理B=2γDmDm∝T/η2.纵向扩散项B/u样品分子沿流动相方向产生扩散，所引起峰展宽u是最佳流速的3-5倍B/u忽略液相色谱中Dm比GC中小105高效液相色谱法基本原理3.流动的流动相传质阻力项Cmu流动相本身，处于不同层流的分子具有不同流速。Dm∝T/η减免方法：1）减少固定相颗粒直径

2）减少流动相液体黏度（甲醇）高效液相色谱法基本原理4.静态流动相传质阻力项Csmu原因：处于固定相颗粒内部孔洞内静态流动相引起影响Csmu的因素与Cm相同高效液相色谱法基本原理5.固定相的传质阻力项Csu影响因素：固定相内部阻力影响减免方法：减少固定相液膜厚度——化

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