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文档简介

作物生产技术专业/教学资源库微生物的诱变育种一、诱变育种中的几个原则

指利用物理或化学诱变剂处理微生物群体细胞，促进其突变率显著提高，然后设法从中选取少数符合育种目的的突变株。2个主要环节：诱变（随机）选用合适的诱变剂和诱变剂量处理大量均匀、分散的微生物细胞，以引起绝大多数细胞致死的同时，使存活个体中的突变频率大大提高。筛选（定向）设计有效的筛选方法，将少量正变株中的优良菌株挑选出来。（一）出发菌株（originalstrain）出发菌株指用于诱变育种的起始菌株。具有有利性状（如高产、生长速度快、营养要求粗放、标记明显等）；对诱变剂敏感野生型菌株；从生产中选育的自发突变菌株；诱变获得的高产菌株出发菌株的选择标准：出发菌株的来源：（二）菌悬液的制备1.选用单细胞或单孢子悬液（均匀、分散）目的：①使每个细胞能均匀接触诱变剂；

②减少表型延迟现象（诱变后性状的分离及退化现象）2.同步培养（生理状态一致）3.菌龄：对诱变剂最敏感时期

营养细胞：对数期孢子或芽孢：萌发前期4.菌悬液的制备方法

物理诱变：生理盐水配制化学诱变：缓冲液配制5.菌悬液的浓度

酵母菌，霉菌的孢子：106个/mL

细菌，放线菌孢子：108个/mL

（三）诱变剂的选择及处理方法1.诱变剂的选择（高效，简便）物理诱变剂：频度低、大损伤，难修复，且操作简便；化学诱变剂：频度高，点突变，易回复突变，操作麻烦。(NTG——超诱变剂）UV是最常用的一种诱变剂2.剂量的选择突变率随剂量的增加而提高，但到达一定程度后，再提高剂量,反而会使突变率下降。正变较多出现在偏低剂量中，而负变较多出现在偏高剂量中。在产量变异工作中，常采用相对杀菌率为70~75%,甚至30~70%的剂量。UV的剂量:固定UV功率和照射距离,以照射时间长短来确定剂量多少。最适剂量：在提高突变率的基础上，既能扩大变异幅度，又能使变异向正突变范围移动的剂量。常以杀菌率来表示相对剂量（剂量-存活率曲线）3.诱变处理方法单因素处理或多因素的复合处理：①同一诱变剂的重复使用；②两种或多种诱变剂的先后使用；③两种或多种诱变剂的同时使用.诱变育种的基本原则：选择简便有效的诱变剂；挑选优良的出发菌株；处理单细胞或单孢子悬液；选用最适的诱变剂量；充分利用复合处理的协同效应；利用和创造形态、生理与产量间的相关指标；设计高效筛选方案；创造新型筛选方法。

诱变育种的程序：

出发菌株（纯化）前培养（CM，培养至对数期）

菌悬液制备活菌计数

诱变预备实验（剂量存活率曲线）

诱变处理（相对杀菌率为70-75%，30-70%）活菌计数

中间培养（CM，培养过夜，克服表型延迟）

突变株分离

初筛

复筛

生产性能试验菌种（鉴定与）保藏

1.从生产中选育

2.定向培育优良品种一般指用特定因素长期处理微生物群体，同时不断地对它们

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