2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库历年考点含答案

2023年生物技术期末复习-基因工程原理（生物技术）考试上岸题库（历年考点)含答案（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共85题)1.用同一种酶切割载体和目的基因后进行连接，连接产物会含大量自身环化载体，采用下列哪种酶处理，可防止自身环化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端转移酶D、碱性磷酸酶2.外源基因(或DNA片段)插入到某一基因内的位点后，这个基因不再有任何功能。3.基因工程所用的克隆载体不需要具备下列哪一个元件A、复制原点B、SD序列C、较高的拷贝数D、选择标记4.pUCl8质粒是目前使用较为广泛的载体,pUC系列的载体是通过________和M13两种质粒改造而来。5.巴斯德毕赤氏酵母表达系统较酿酒酵母表达系统具有哪些优势？6.Southern杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体7.YAC是下列哪种克隆载体的缩写A、酵母人工染色体B、人工Y染色体C、细菌人工染色体D、粘粒8.M13噬菌体属于A、双链噬菌体B、单链噬菌体C、质粒D、亚病毒9.下列哪种酶的发现对于PCR的应用有里程碑的意义A、PwoDNA聚合酶B、Taq聚合酶C、PfuDNA聚合酶D、VentDNA聚合酶10.经典的DNA测序方法有两种，即Sanger双脱氧末端终止法和_______________。11.RNA分子经凝胶电泳后按大小不同分开，然后被转移到一张硝酸纤维素膜(尼龙膜)上，同一放射DNA探针杂交的技术称________。12.非接合质粒13.在用单一限制酶切载体和目的基因并进行连接时，为防止载体自身环化，常用____________处理载体。14.什么是生物制药？15.基因敲除的应用有哪些前景和展望A、基因功能研究B、建立人类疾病模型C、疾病的基因治疗培育新的生物品种16.基因工程又叫A、分子克隆B、基因克隆C、遗传育种D、遗传工程E、重组DNA技术17.pSC101质粒是第一个成功克隆真核DNA的载体，属于松弛控制型的质粒。18.以病毒为载体产生转基因的动物是_________。19.Watson和Crick两位科学家于1953年提出来的DNA是以一种_______________形式存在。20.甲醇酵母表达系统具有的抗药性基因是A、氨苄青霉素和卡那霉素B、四环素和氨苄青霉素C、氨苄青霉素和庆大霉素D、四环素和庆大霉素21.下列哪一种疾病是获得性免疫缺陷综合症A、血友病BB、心血管疾病C、艾滋病D、囊性纤维化22.试述限制性核酸内切酶的命名原则。23._________是植物细胞出去细胞壁后的部分，是一个质膜包围的裸露细胞。24.何谓YAC？主要特性是什么？25.在实验室研究中，重组大肠杆菌的培养基常使用牛肉膏蛋白胨培养基。26.外源基因经pET载体的表达，其表达量往往超过总蛋白的A、40%B、20%C、30%D、50%27.Ⅱ型限制性内切核酸酶：A、有内切核酸酶和甲基化酶活性且经常识别回文序列B、仅有内切核酸酶活性，甲基化酶活性由另外一种酶提供C、限制性识别非甲基化的核苷酸序列D、有外切核酸酶和甲基化酶活性28.一种间歇的培养方式，除了进气、排气和补加酸碱调节pH外，在培养过程中与外界没有其他的物料交换。这种培养方式是A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、分批培养29.影响连接反应的因素有A、DNA末端的形式B、DNA分子浓度的影响C、连接反应温度与时间的影响D、连接缓冲液的影响E、酶浓度的影响30.基因工程中有三种主要类型的载体：_________、病毒DNA质粒和病毒DNA杂合体。31.将含有一个mRNA的DNA拷贝的克隆称作一个cDNA克隆，源于同一批RNA制备物的克隆群则构建了一个______。32.对pBR322描述正确的是()A、经人工改造的酵母质粒B、天然的大肠杆菌质粒C、经人工改造的大肠杆菌质粒D、天然的酵母质粒33.Kan表示A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、潮霉素D、四环素34.末端脱氧核苷酸转移酶起作用时需要A、二价阳离子B、一价阴离子C、二价阴离子D、一价阳离子35.在整个基因治疗领域内（）开展的研究最为深入和广泛A、日本B、英国C、美国D、中国36.常规PCR反应程序中，子链延伸的温度一般设置为A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃37.关于II类限制酶说法正确的是A、具内切核酸酶和甲基化酶活性B、仅有内切核酸酶活性C、识别序列为回文对称结构D、II类限制酶反应条件只需要Mg2+E、II类限制酶反应需要Mg2+,ATP38.质粒载体的装载容量为10Kb-20Kb。39.cDNA文库的特点是什么？40.具平末端的DNA片段的连接方法主要有？41.蛋白质的融合表达式指外源基因与载体已有的担体蛋白的编码基因拼接在一起，并作为一个新的____________进行表达。42.连接反应中，为了维持还原环境，稳定酶活性，需在连接缓冲液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP43.基因工程中使用的II类限制性内切核酸酶不仅有内切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。44.原核启动子在转录起始点上游有一段富含A和T的区域称为A、-15区B、-35区C、-45区D、-10区45.一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取，克隆载体的选择与改造，____________的连接，重组DNA分子导入受体细胞，筛选出转化子。46.多数II类限制酶反应最适PH是A、PH:2-4B、PH:4-6C、PH:6-8D、PH:7-1047.启动子从转录模式上可分为哪两种？表达系统常选用哪一种？其机理是什么？48.BAC载体的最大容载能力是_______。49.基因工程中常用的DNA聚合酶有哪些？50.表达人类蛋白质的最理想的细胞体系是A、E.coli表达体系B、酵母表达体系C、昆虫表达体系D、哺乳类细胞表达体系51.基因重组只能通过人工进行。52.以mRNA为模板合成CDNA时，所用的工具酶是A、DNA聚合酶IB、DNA连接酶C、逆转录酶D、核酸内切酶53.连接反应中，下列哪项物质是T4DNA连接酶所必须的辅助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP54.现在最常用的pUC载体是pUC18，这种载体可在辅助质粒的帮助下合成单链DNA。55.原核表达系统中表达效率最高的是A、色氨酸启动子B、乳糖启动子C、乳糖和色氨酸的杂合启动子D、T7噬菌体启动子56.把那些没有可检测表型的质粒称为_________。57.列举质粒载体必须具备的4个基本特性。58.Klenow大片段酶具有几种酶活性A、1种B、2种C、3种D、4种59.含有多种限制性内切核酸酶识别序列的DNA片段称为_________。60.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子Tac又叫A、乳糖启动子B、乳糖和色氨酸的杂合启动子C、噬菌体的左向启动子D、色氨酸启动子61.构建GST蛋白表达系统的载体是为了使目标蛋白以哪种方式表达?A、融合表达B、分泌表达C、独立表达D、包涵体表达62.基因治疗的载体只有病毒载体系统。63.请写出基因工程的基本操作顺序？64.从E.coli中分离的连接酶A、需要NAD作辅助因子B、可以进行平末端和黏性末端连接C、作用时不需要模板D、需要ATP

作辅助因子65.第一个用于构建重组体的限制性内切核酸酶是____。66.利用反义RNA、核酶等反义技术及RNA干扰技术等能特异地封闭基因表达的特性，抑制一些有害基因的表达，以达到治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因修正B、基因增补C、基因激活D、基因失活67.商品化的限制性核酸内切酶均加多少浓度甘油作为保护剂A、10%B、20%C、50%D、30%68.限制性内切酶可特异性识别A、双链DNA的特定碱基对B、双链DNA的特定碱基序列C、单链RNA的特定碱基序列D、单链DNA的特定碱基序列69.大肠杆菌DNA聚合酶有几种酶活性A、5种B、2种C、3种D、4种70.植物基因转化受体系统应具备的条件？71.试述分子杂交技术的原理？72.同一种限制性核酸内切酶分别切割目的基因DNA与载体DNA时，酶切片段不能互相连接的是A、载体DNA与载体DNA之间B、目的基因与载体DNA之间C、目的基因与mRNA之间D、目的基因与目的基因之间73.某学生在用EcoRI切割外源DNA片段时，出现了星号活性，请分析可能的原因？74.Cohen等在_________年构建了第一个有功能的重组DNA分子。75.目前应用最广泛的原核表达系统是A、酵母菌表达系统B、枯草杆菌表达系统C、大肠杆菌表达系统D、葡萄球菌表达系统76.什么是S1核酸酶作图(S1nucleasemapping)？77.用蓝白斑筛选重组子时，IPTG的作用是：A、作为显色反应的指示剂B、作为酶的作用底物C、诱导载体上的抗性基因表达D、诱导载体上的LacZ基因表达78._________是指利用基因工程技术，将人们想要研究的基因在动物体实现表达。79.显性质粒80.pSCl01是一种________复制的质粒。81.克隆即无性繁殖的意思，通过克隆可以在无性的条件下获得遗传结构和表型完全相同的一群个体。82.一般情况下，质粒既可以整合到染色体上，也可以独立存在。83.所有限制性核酸内切酶的最适反应温度为37℃。84.YAC是至今最大容量的克隆载体。85.有关基因工程的叙述正确的是A、限制性内切酶只在获得目的基因时才用B、重组质粒的形成在细胞内完成C、质粒都可以作为运载体D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:D2.正确答案:错误3.正确答案:B4.正确答案:pBR3225.正确答案:生长迅速，外源蛋白表达水平高，产物可翻译后修饰，产物可正确折叠和高效分泌，可利用简单无机盐培养基，高密度发酵，生物量大，实验室和工业操作简单。6.正确答案:A7.正确答案:A8.正确答案:B9.正确答案:B10.正确答案:化学降解法11.正确答案:Northern杂交12.正确答案:指不含nic/born基因，不能自我转移的质粒。13.正确答案:碱性磷酸酶14.正确答案:指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业，核心是通过重组DNA技术生产具有药用功能的生物制品。15.正确答案:A,B,C,D16.正确答案:A,B,D,E17.正确答案:错误18.正确答案:病毒载体法19.正确答案:DNA双螺旋结构20.正确答案:A21.正确答案:C22.正确答案:以酶来源的生物体属名的第一个大写字母和种名的前两个小写字母构成酶的基本名称。23.正确答案:原生质体24.正确答案:(1)含有来自其他生物DNA的酵母人工染色体，叫YAC；(2)主要特性是可以克隆较大的外源片段。25.正确答案:错误26.正确答案:D27.正确答案:B28.正确答案:D29.正确答案:A,B,C,D,E30.正确答案:质粒DNA31.正确答案:cDNA文库32.正确答案:C33.正确答案:B34.正确答案:A35.正确答案:C36.正确答案:D37.正确答案:B,C,D38.正确答案:错误39.正确答案:基因特异性、器官特异性、代谢或发育特异性、不均匀性、各cDNA均可获得表达。40.正确答案:直接连接法；同聚物加尾法；衔接物连接法。41.正确答案:开放阅读框42.正确答案:A43.正确答案:错误44.正确答案:D45.正确答案:目的基因与克隆载体46.正确答案:C47.正确答案:启动子从转录模式上分为：组成型启动子和诱导型启动子，表达系统常选用诱导型启动子，机理：指在某些特定的物理或化学信号的刺激下，该种类型的启动子可以大幅度的提高基因的转录水平。48.正确答案:300kb49.正确答案:大肠杆菌DNA聚合酶；Klenow大片段酶；T7DNA聚合酶；T4DNA聚合酶；修饰过的T7DNA聚合酶；逆转录酶；TaqDNA聚合酶。50.正确答案:D51.正确答案:错误52.正确答案:C53.正确答案:D54.正确答案:错误55.正确答案:D56.正确答案:隐性质粒57.正确答案:（1）独立复制；（2）有选择标记；（3）有独特的酶切位点；（4）能转化但不扩散。58.正确答案:B59.正确答案:多克隆位点60.正确答案:B61.正确答案:A62.正确答案:错误63.正确答案:目的基因的制备；目的基因与载体连接；目的基因导入受体细胞；目的基因的表达与检测。64.正确答案:A65.正确答案:EcoRl66.正确答案:D67.正确答案:C68.正确答案:B69.正确答案:C70.正确答案:（1）高效稳定的再生能力；（2）较高的遗传稳定性；（3）具有稳定的外植体来源；（4）对选择性抗菌素敏感；（5）对农杆菌侵染有敏感性。71.正确答案:将标记的核酸探针以碱基互补配对原则与组织细胞中的待测核酸进行特异性的杂交组合，形成探针标记与待测核酸的杂交体，然后利用各种标记物的显色技术，在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下探察待测目标核酸的存在及位置。72.正确答案:C73.正确答案:盐离子浓度不对，温度不对，甘油浓度过高。74.正确答案:197375.正确答案:C76.正确答案:S1核酸酶作图是一种对RNA转录产物的末端和剪接位点进行作图的方法。77.正确答案:D78.正确答案:转基因动物79.正确答案:指宿主细胞由于含有某种质粒而呈现出新的性状。80.正确答案:严紧型81.正确答案:错误82.正确答案:错误83.正确答案:错误84.正确答案:正确85.正确答案:D卷II一.综合考核题库(共85题)1.基因工程的两个基本特点是分子水平上的操作和_________。2.在DNA分离过程中，通常要进行透析，其目的是_________。3.能防止载体自连的酶是A、T4噬菌体DNA连接酶B、逆转录酶C、碱性磷酸酶D、末端脱氧核苷酸转移酶4.逆转录酶具有下列哪些酶活性A、5’-3’聚合酶活性B、5’-3’DNA外切酶活性C、3’-5’外切酶活性D、末端转移酶活性E、RnaseH活性5.显微注射技术一般是在显微镜下将目的DNA分子注射进入动物受精卵的哪一部位中，从而产生转基因动物A、雌原核B、雄原核C、极体D、核仁6.诱导型启动子7.λ噬菌体DNA和M13单链噬菌体DNA在成熟前的DNA复制都是用滚环模型。8.双链DNA中一段自我互补的序列被称为回文序列，这种序列一般具有哪些特征。A、有对称轴B、两条链的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ类酶的识别序列D、可增强基因的表达E、是I类酶的识别序列9.T4DNA聚合酶具有几种酶活性A、2种B、3种C、4种D、1种10.试述cos质粒载体的特点？11.质粒作为载体使用时必须具备如下条件A、拷贝数较高B、分子量较小C、具有选择标记D、具有较多的限制性酶切位点E、具有复制起始点12.基因治疗有两种途径，一是_____________，二是体内法。13.不同的限制性核酸内切酶都盐离子强度有不同的要求，一般按离子强度不同分为低盐、_________、高盐三类。14.生物学上，利用两个不同系进行杂交，培养出比亲本更出色的后代，就是_________。15.Southern印迹是用DNA探针检测DNA片段，而Northern印迹则是A、用RNA探针检测RNA片段B、用DNA探针检测RNA片段C、用DNA探针检测蛋白质片段D、用RNA探针检测DNA片段16.可以在切口部位起作用的酶是A、外切酶IIIB、λ外切核酸酶C、Bal核酸酶D、S1核酸酶17.作为载体需要具备哪些功能？18.DNA连接酶反应的时间一般为_____________就足以取得较好的连接效果。19.下列对建立cDNA文库的描述不正确的是A、从特定组织或细胞中提取DNA或RNAB、用反转录酶合成mRNA的对应单链DNAC、以新合成的单链DNA为模板合成双链DNAD、新合成的双链DNA甲基化20.在细菌中增殖来自某一生物的染色体DNA或cDNA所形成的全部DNA片段克隆的集合体叫基因库。21.转录水平的鉴定是指_________。22.Tet是下列哪一种抗性标记的简写名称A、氨苄青霉素B、卡那霉素C、氯霉素D、四环素23.通过原位菌落杂交得到的阳性克隆即是重组体，但不能判断插入的外源基因是否进行了表达。24.何谓修饰作用？25.核酸修饰酶包括有哪些酶？26.I型和III型限制性核酸内切酶在同意蛋白酶分子中兼有甲基化酶及依赖ATP的限制性核酸内切酶活性。27.cDNA文库包括该种生物的A、某些结构基因B、内含子C、所有的结构基因D、内含子和调控区28._________决定PCR扩增产物的特异性与长度。29.限制性内切酶通常保存在_________浓度的甘油溶液中。30.用不同的产生黏性末端的限制性内切核酸酶分别切割载体和外源DNA，得到的黏性末端是不亲和的黏性末端。31.westernblot杂交时，探针与膜上的（）杂交A、DNAB、RNAC、蛋白质D、染色体32.用同一种酶切割载体和外源DNA得到黏性末端后，为防止它们自身环化，要用CIP将它们脱磷酸。33.Southern印迹的DNA探针()杂交。A、可与任何含有相同序列的DNA片段B、可与任何含有互补序列的DNA片段C、可与用某些限制性内切核酸酶切成的DNA片段D、只与完全相同的片段34.质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点是：①能自主复制②不能自主复制③结构很小④蛋白质⑤环状RNA⑥环状DNA⑦能“友好”地“借居”A、①③⑤⑦B、②④⑥C、①③⑥⑦D、②③⑥⑦35.II型限制性核酸内切酶的酶蛋白分子是由单一亚基构成。36.下列哪一项不属于cDNA的第二条链的合成的方法A、自身引导合成法B、置换合成法C、引导合成法D、随机引物合成法37.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量为76kDa的大片段，具有两种酶活性:5-3合成酶的活性和3-5________。38.按照人们的意愿，改变基因中碱基的组成，以达到基因突变的技术称为________。39.逆转录病毒载体的优点不包括A、高效感染宿主细胞B、拷贝数高C、侵染范围广D、基因组小并且简单40.λ噬菌体载体根据外源基因整合的方式不同，分为____________和置换型载体两大类。41.酶切法鉴定重组体时，最常用的方法是A、用多种限制性酶将其切出B、用S1核酸酶将其切出C、用DNA酶将其切出D、用重组时的限制性酶将其切出42.连接反应中，哪一种组分的作用是激活连接酶反应A、Tris-HCLB、MgCl2C、ATPD、DTT43.酵母表达系统是最常用的真核表达系统。44.基因工程的基本流程是A、目的基因的分离、获取与制备B、目的基因与载体连接构建成为重组载体分子C、重组DNA分子导入到受体细胞D、外源目的基因阳性克隆的鉴定和筛选E、外源目的基因的表达45.Northern印迹和Southern印迹的基本原理是一样的，都是用于检测结构基因的表达。46.II型限制性核酸内切酶的切割位点是A、识别序列1000bp以外B、识别位点下游24－26bp处C、DNA分子任一位点D、识别序列内47.下列测序方法哪个是属于经典的DNA测序方法A、ABISOLID测序B、Illumina测序C、Roche454D、双脱氧终止法48.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不出质粒，这种现象叫_________ 。49.多核苷酸激酶之所以能够用于DNA片段的标记，是因为它能够将单个的32P标记的单核苷酸加到每一DNA链的5’端。50.常用的固相杂交类型有A、Southern杂交B、Northern杂交C、组织原位杂交D、菌落原位杂交E、斑点杂交51.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的_________。52.对基因功能的研究，首先需要获取基因或基因片段，即______________。53.不是基因工程载体中的报告基因的是A、lacZB、GFPC、AmpD、ori54.应用药物敏感基因转染肿瘤细胞，以提高肿瘤患者细胞对药物的敏感性。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因激活B、基因失活C、免疫调节D、药物敏感疗法55.某限制性内切核酸酶按GGCCGCCC方式切割，产生的末端突出部分含A、3个核苷酸B、4个核苷酸C、5个核苷酸D、2个核苷酸56.启动子57.PCR引物常见的长度范围是30bp-45bp。58.人类基因组计划___________年启动的。59.BAC表示的是（）A、人工Y染色B、细菌人工染色体C、粘粒D、酵母人工染色体60.原核表达系统中通常使用的可调控的启动子有A、LacB、TrpC、TacD、RecE、Tra61.甲醇酵母表达系统有几个乙醇氧化酶基因A、2个B、3个C、4个D、1个62.基因克隆中低拷贝数的质粒载体是不起作用的。63.DNA聚合酶I_________的是用枯草杆菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子质量为76kDa的大片段。64.常规Sanger双脱氧链终止法标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP65.DNA连接酶根据来源不同，可以分为三类，即_________和T4DNA连接酶及热稳定的DNA连接酶。66.重组DNA技术领域常用的质粒DNA是A、细菌染色体DNA的一部分B、细菌染色体外的独立遗传单位C、病毒基因组DNA的一部分D、真核细胞染色体DNA的一部分67.Sanger双脱氧末端终止法和化学降解法的应用原理是一样的。68.限制性内切核酸酶的星号活性是指A、在非常规条件下，识别和切割序列发生变化的活性B、活性大大提高C、切割速度大大加快D、识别序列与原来的完全不同69.BergP的创造性的工作是在体外构建了重组DNA分子，所用的载体是一种具有复制能力的细胞质质粒。70.下列哪项是表达载体特有的而克隆载体没有的元件A、复制点B、筛选标记C、多克隆位点D、启动子71.下列哪种病不可以进行遗传病的基因治疗A、血友病BB、艾滋病C、囊性纤维化D、心血管疾病72.__________通常是指通过基因工程、抗体工程、细胞工程技术等制备生物药品用于疾病诊断、预防和治疗的行业。73.Southernblot检测的是RNA分子。74.考斯质粒（cosmid）是一种A、天然质粒载体B、由l-DNA的cos区与一质粒重组而成的载体C、能裂解受体细胞的烈性载体D、能在受体细胞内复制并包装的载体75.cDNA克隆与基因组克隆有何不同？76.下列哪一项不具有吸附DNA的功能A、经特殊处理的滤纸B、尼龙膜C、玻璃膜D、硝酸纤维素膜77.利用DNA自动测序时通常进行标记的是()A、ddNTPB、引物C、dATPD、dNTP78.在连续流加新鲜培养基的同时连续放出发酵液，这种培养方式是A、补料分批培养B、连续培养C、透析培养D、分批培养79.重组乙肝疫苗是由下列哪种表达系统高效表达A、酿酒酵母表达系统B、丝状真菌表达系统C、昆虫表达系统D、巴斯德毕赤酵母表达系统80.隐性质粒81.下列不是Southern印迹步骤的是（）A、DNA与载体的连接B、用凝胶电泳分离DNA片段C、DNA片段转移至硝酸纤维素膜上D、用限制酶消化DNA82.pBR322是一种改造型的质粒，含有两个抗性基因，其中四环素抗性基因来自A、ColElB、Ri质粒C、pSCl01D、pUCl883.PCR特异性与模板浓度成正比。84.将抗体、抗原或细胞因子的基因导入病人体内，改变病人免疫状态，从而达到预防和治疗疾病的目的。这是基因治疗策略中的哪一项A、基因增补B、基因激活C、基因失活D、免疫调节85.用化学降解法进行DNA测序时，必须具有几个反应系统A、2个B、3个C、4个D、1个卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:细胞水平上的表达2.正确答案:除去小分子的无机离子3.正确答案:C4.正确答案:A,B,C,D,E5.正确答案:B6.正确答案:在一定的诱导剂作用下，才能启动基因的转录与表达。7.正确答案:正确8.正确答案:A,B,C9.正确答案:A10.正确答案:具有质粒的性质；含有cos位点；能承载较大的外源DNA片段。11.正确答案:A,B,C,D,E12.正确答案:体外法13.正确答案:中盐14.正确答案:杂种优势15.正确答案:B16.正确答案:D17.正确答案:为外源基因提供在受体细胞中的复制和整合能力；为外源基因提供进入受体细胞的转移能力；为外源基因提供在受体细胞中的扩增和表达能力，外源基因的扩增依赖于载体分子在受体细胞中高拷贝自主复制的能力。18.正确答案:30min19.正确答案:A20.正确答案:错误21.正确答案:mRNA检测22.正确答案:D23.正确答案:正确24.正确答案:指细菌的修饰酶对于DNA碱基结构改变的作用，经修饰酶作用后的DNA可免遭其自身所具有的限制酶的分解。25.正确答案:末端脱氧核苷酸转移酶；T4多核苷酸激酶；碱性磷酸酶；核酸外切酶；单链DNA内切酶；甲基化酶。26.正确答案:正确27.正确答案:C28.正确答案:引物29.正确答案:50%30.正确答案:错误31.正确答案:C32.正确答案:错误33.正确答案:B34.正确答案:C35.正确答案:正确36.正确答案:D37.正确答案:外切核酸酶的活性38.正确答案:定点突变39.正确答案:B40.正确答案:插入型载体41.正确答案:D42.正确答案:B43.正确答案:正确44.正确答案:A,B,C,D,E45.正确答案:错误46.正确答案:D47.正确答案:D48.正确答案:质粒消除49.正确答案:错误50.正确答案:A,B,C,D,E51.正确答案:限制性酶切图谱52.正确答案:目的基因53.正确答案:D54.正确答案:D55.正确答案:A56.正确答案:是一段提供RNA聚合酶是被和结合的DNA序列，位于基因的上游，长度因生物种类而异。57.正确答案:错误58.正确答案:199059.正确答案:B60.正确答案:A,B,C,D,E61.正确答案:A62.正确答案:错误63.正确答案:Klenow片段64.正确答案:B65.正确答案:大肠杆菌的DNA连接酶66.正确答案:B67.正确答案:错误68.正确答案:A69.正确答案:错误70.正确答案:D71.正确答案:B72.正确答案:生物制药73.正确答案:错误74.正确答案:D75.正确答案:基因组克隆包含所有不在cDNA中出现的内含子。76.正确答案:C77.正确答案:A78.正确答案:B79.正确答案:D80.正确答案:指宿主细胞含有某种质粒，但无异样性状表现，目前的检测手段还未能检测出因含该基因而导致性状、宿主代谢物等的改变。81.正确答案:A82.正确答案:C83.正确答案:错误84.正确答案:D85.正确答案:C卷III一.综合考核题库(共85题)1.基因工程是_________年代发展起来的遗传学的一个分支学科。2.原核启动子在转录起始点上游35bp处，有一段长10bp的区域称为A、-10区B、-15区C、-35区D、-45区3.通过蛋白质工程改建目的基因，不属于定点突变技术的是A、寡聚核苷酸介导的定点突变B、PCR介导的定点突变C、盒式突变D、DNA改组4.目前已知持续合成能力最强的酶是A、大肠杆菌聚合酶IB、Klenow片段C、T4DNA聚合酶D、T7DNA聚合酶5.构建重组子时中不需要A、基因载体B、DNA连接酶C、核酶D、限制酶6.具平末端的DNA片段的连接可以采用________________、同聚物加尾法、衔接物连接法。7.限制性核酸内切酶切割DNA后产生A、5’磷酸基和3’羟基基团的末端B、3’磷酸基和5’羟基基团的末端C、5’磷酸基和3’磷酸基团的末端D、5’羟基和3’羟基基团的末端8.下面关于多克隆位点MultipleCloneSite（MCS)的描述错误的一项是A、仅位于质粒载体中B、具有多种酶的识别序列C、不同酶的识别序列可以有重叠D、一般是人工合成后添加到载体中9.转基因植物技术在农业领域主要有哪些应用？就其中一方面应用进行举例说明。10.限制酶主要是从_________中分离纯化出来的。11.Cre-loxP系统四个loxP位点分别位于两条DNA链或染色体上，Cre重组酶诱导两条DNA链发生交换或染色体易位12.何谓溶原性方式？13.T4DNA连接酶和E．coli连接酶作用时都需要ATP和NAD+作为辅助因子。14.PCR反应中DNA模板量一般为A、100-10000拷贝B、100-100000拷贝C、1000-10000拷贝D、10-100拷贝15.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下列描述中不大恰当的是A、这一系统中的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶B、这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对DNA进行修饰C、不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统D、由作用于同一DNA序列的两种酶构成16.关于重组体的叙述，下列哪项不正确：A、重组体可直接表达外源基因B、重组体只能在宿主细胞或体外表达系统中表达外源基因C、重组体是由目的基因和载体通过连接酶连接而成的D、重组体中含有外源基因17.用_________表达乳铁蛋白可谓是乳腺生物反应器的典型代表。18.S1核酸酶的功能是A、切割双链的DNAB、切割单链的RNAC、切割发夹环D、以上有两项是正确的E、以上有三项是正确的19.受体细胞的_________是接受外源DNA的生理状态_。20.双脱氧末端终止法测定DNA序列是基于()A、DNA的连接反应B、DNA的降解反应C、聚合单体2‘和5’位的脱氧D、DNA的聚合反应21.在LacI标记基因插入外源基因，经IPTG诱导，在X-gal培养基中显_________色，为阳性克隆。22.在序列5'-CGAACATATGGAGT-3'含有一个6bp的Ⅱ类限制性内切核酸酶的识别序列，该位点的序列可能是什么？23.使外源基因在人体表达从而克服某一缺陷或疾病的技术称为A、基因治疗B、基因工程C、基因药物D、免疫治疗24.试述理想质粒载体的构建原理？25.根据外源DNA片段的来源不同，可将基因文库分为：基因组DNA文库和cDNA文库。26.标记灵敏度高效果好的探针是A、32PB、地高辛C、生物素D、荧光素27.下面几种序列中你认为哪一个(哪些)最有可能是Ⅱ类酶的识别序列：GAATCG，AAATTT，GATATC，ACGGCA？为什么？28.现在科研人员又开发了红色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、_________等新型的荧光蛋白。29.包涵体型蛋白具有生物活性。30.控制细菌合成抗生素的基因、控制放线菌主要性状的基因、控制病毒抗原特异性的基因依次在①核区大型环状DNA②质粒上③细胞染色体上④衣壳内核酸上A、①③④B、①②④C、②①④D、②①③31.________________是一种耐热的依赖DNA的DNA聚合酶。32.试述基因敲除技术的原理？33.关于多克隆位点，下列叙述正确的是A、是外源基因的插入部位B、由许多酶切位点组成C、是宿主细胞上的一段特殊序列D、是人工合成的一段DNA序列E、含有药物抗性基因34.DNA片段之间的连接方式有哪些？35.Ti质粒中能插入到植物基因组DNA区段是A、复制远点区B、毒素蛋白区C、T-DNA区D、冠婴碱代谢区36.常用的连接外源性DNA和载体DNA的酶是：A、DNA聚合酶B、T4DNA连接酶C、T4RNA连接酶D、RNA聚合酶37.染色质免疫沉淀技术是研究生命体组织或细胞内蛋白质与DNA相互作用的一种技术方法38.基因操作的两大关键技术是A、工具酶与载体B、转化细胞和供体细胞C、基因克隆和基因重组D、克隆载体和表达载体39.采用原核细胞表达系统的优点之一是可以与下面什么过程直接相连A、发酵工程B、转基因动物C、转基因植物D、基因治疗40._________---阿尔茨海默病神经系统疾病模型。41.外源DNA离开染色体是不能复制的，将外源DNA与____________连接，构建成重组DNA分子，外源DNA则可被复制。42.写出筛选基因文库获得目的基因的常用方法？43.对松弛型质粒描述正确的是A、在寄主细胞中拷贝数较多B、可用氯霉素扩增C、一般没有选择标记D、上述A、B

两项正确44.基因工程最知名的也是饱受争议的应用之一是_____________。45.PCR反应中Taq酶常常没有错配碱基纠错功能，因为它没有A、5’－3’聚合酶活性B、5’－3’外切酶活性C、3’－5’外切酶活性D、3’－5’聚合酶活性46.下面关于松弛型质粒(relaxedplasmid)性质的描述不正确的是A、质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数B、可以在氯霉素作用下进行扩增C、通常具有较少的拷贝数D、同严紧型质粒整合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

47.试述影响连接反应的因素？48.________主要是根据蛋白质的氨基酸序列设计一组混合引物来合成相应的基因。49.何谓基因工程？50.pGEM质粒与pUC质粒的区别主要在于A、抗药性基因的不同B、复制起点不同C、MCS不同D、前者有启动子51.在利用LacZ失活的显色反应筛选法中，IPTG的作用是A、诱导宿主的ω肽的合成B、作为酶的作用底物C、作为显色反应的指示剂D、诱导宿主的α肽的合成52.为什么大肠杆菌表达系统是目前使用最为广泛的原核表达系统？53.关于cDNA的最正确的说法是A、同mRNA互补的单链DNAB、同mRNA互补的双链DNAC、以mRNA为模板合成的双链DNAD、以上都正确

54.限制性核酸内切酶一般在多少度下保存A、10℃B、-20℃C、20℃D、0℃55.获得DNA重组体后，还需进一步鉴定，可采用的方法有A、DNA序列测定B、PCR鉴定C、酶切鉴定D、表达产物的鉴定E、进行定点突变56.大肠杆菌DNA连接酶在体内的主要作用是在DNA复制、修复中封闭缺口，A、将双链DNA分子中的5’磷酸基团同3’羟基基团末端重新形成磷酸二酯键B、作用时不消耗能量C、需要Mn2+等二价辅助离子D、也可以连接RNA分子57.欲将一真核生物的结构基因克隆后转移到原核生物(如E．coli)中进行表达，克隆时应注意哪些问题？58._________成为国际国内人体健康战略的重中之重。59.下列哪一项不是质粒作载体使用时必须具备的条件A、分子量小B、高拷贝数C、增强子D、MCS60.基因重组的步骤包括A、用PCR技术扩赠出大量的重组DNA分子B、用连接酶将外源DNA和载体连接C、通过转化将重组DNA导入宿主细胞D、用载体上的相应抗性筛选含有重组DNA的克隆E、将重组DNA导入人体，用于疾病治疗61.请写出Southern杂交的操作过程。62.AIDS是由哪种病毒引起的全身性传染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV63.克隆羊多莉是通过哪一个技术制备的A、显微注射法B、逆转录病毒感染法C、胚胎干细胞法D、体细胞核移植法64.基因工程中所用的质粒载体大多是改造过的，真正的天然质粒载体很少，在下列载体中只有哪种被视为用作基因工程载体的天然质粒载体。A、pBR322B、pSC101C、pUB110D、pUC1865.用EcoRI和HindⅢ分别切割同一来源的染色体DNA，并进行克隆，在前者的克隆中筛选到A基因，但在后者的克隆中未筛选到A基因，请说明原因。66.基因组文库一般保存在多少温度下A、4℃B、-10℃C、-60℃D、-80℃67.用Sanger双脱氧法进行DNA测序时，凝胶上读出的序列是A、模板链的互补链B、mRNA的C、cDNA的D、模板链的68.基因治疗通常采用哪种载体比较合适A、逆转录病毒B、Ti质粒C、噬菌体D、质粒pBR32269.根据Northern印迹的结果可以说明_________。70.就克隆一个基因(DNA片段)来说，最简单的质粒载体也必需包括三个部分：复制区；________；克隆位点。71.下列具有生物活性的外源蛋白是A、包涵体型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、复合蛋白72.完成DNA分子重组的主要酶是A、限制性核酸内切酶和DNA连接酶B、大肠杆菌聚合酶和DNA连接酶C、核酸外切酶和核酸内切酶D、碱性磷酸酶和T4多核苷酸激酶73._________是指以精子为载体，通过动物受精过程将外源基因导入胚胎，产生转基因动物。74.用来鉴定DNA的技术是：A、Northern杂交B、Western杂交C、亲和层析D、Southern杂交75.目的基因进入受体细胞内维持稳定和表达的过程称为_________。76.两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称之为质粒的_________。77.原位杂交是指A、菌落杂交B、液相杂交C、直接对染色体或组织杂交D、转膜杂交78.1982年在美国诞生了世界上第一种基因工程药物A、重组人胰岛素B、人生长激素C、凝血因子D、干扰素79.目的蛋白与担体蛋白GST的分离是用哪一种酶进行水解的？A、肠激酶酶解B、溴化氢裂解C、凝乳酶酶解D、凝血酶酶解80.同尾酶即识别位点不同但切出的DNA片段具有相同的末端序列。81.对外源基因进行百万倍的扩增可采用________技术82.用下列方法进行重组体的筛选可以说明外源基因进行了表达。A、Southern印迹杂交B、Northern印迹杂交C、Western印迹D、原位菌落杂交83.黏粒(cosmid)质粒中，COS位点的功能是A、限制酶切位点B、参与包装进入病毒外壳C、选择标记D、复制起点84.下列哪一项不是逆转录病毒的特点A、基因组很小B、表达时间短C、可感染分裂细胞D、可整合到宿主染色体上85.何谓cDNA文库？卷II