病理组织的固定

病理检验技术

常规组织病理技术病理组织的固定病理组织的固定概念：将病理活体组织浸泡在适宜的化学试剂,而这种化学试剂能使组织或细胞内的蛋白质凝固、沉淀成不溶性,并使组织和细胞尽可能保持原有的形态结构和所含的各种物质成分,称为组织固定。组织来源：尸体解剖组织和实验动物组织一、组织固定的目的

破坏细胞内的溶酶体酶：组织固定首先是立即杀死细胞并将溶酶体酶及膜结构固定,防止细胞自溶。杀死外来细菌：细菌生长繁殖,致组织腐败。尽可能保持细胞活体时的原状凝固、沉淀细胞内原有产物：尽可能保持细胞内蛋白质、糖、脂类、各种无机盐和色素等组成的不溶性或不被丢失,以利于在染色后显示出来。病理组织的固定一、组织固定的目的

使组织保持一定的硬度和弹性：在以后的脱水、透明、浸蜡等过程中不发生较大的扭曲和变形。有利于区别各种细胞的折光率：固定使不同细胞或细胞内各种物质产生不同的折光率,在染色后有利于识别各型细胞的结构。对组织的分析性染色起媒染作用：如用含铬盐或苦味酸的固定液固定组织可使结蹄组织染色特别鲜艳等。保存组织细胞内的抗原性：细胞内的抗原性能完好保存,有利于作免疫组化染色时的抗原抗体结合反应。病理组织的固定二、组织固定机制组织固定：利用某些化学试剂(如甲醛)的化学特性，使组织细胞内的蛋白质发生分子间的交联，从而使蛋白质转变成不溶性凝胶，这种凝胶使细胞器等良好保存。蛋白质：由肽链组成，肽链中含有很多肽键(-CONH-)，甲醛(H-CHO)作用于蛋白质，与蛋白质分子间进行交联，形成的亚甲基桥(-CH2-)把许多蛋白质分子串连起来，使蛋白质变性，破坏蛋白质的立体结构，改变蛋白质的生物活性，从而达到固定的目的。病理组织的固定三、固定注意事项

1.组织要新鲜，离体后立即投入固定液。2.固定的容器要足够大，并应采用广口、平底、有盖的容器，利于取出和保持组织原形。3.固定液的量要足，其体积约为标本体积的10～20倍。4.大标本如肝、脾、肾、胰腺、心脏、脑、淋巴结、子宫和肿瘤等，应在不妨碍病理检查情况下切开固定，必要时选取小块组织另瓶固定。5.固定时应先把固定液倾入容器，然后放入标本，并把容器轻摇两下，避免标本与容器底部粘贴影响固定。病理组织的固定三、固定注意事项

6.空腔组织如胃、膀胱、胆囊等要切开固定，易漂浮组织标本如肺其上端应用含固定液的纱布或药棉覆盖。7.小块黏膜和穿刺组织，如胃肠道和呼吸道腔镜取材黏膜，肝、肾、乳腺、淋巴结和前列腺穿刺组织，取材后先放在滤纸上，然后再放入固定液，以防组织收缩而丢失或弯曲断裂。8.固定标本瓶或胶袋必须贴有该例患者姓名、性别和年龄等资料的标签。9.固定时间应视组织标本大小、厚度、当时室温和选用固定液种类而定。如用10%甲醛液固定小标本时间为数小时至一晚，大标本时间是1～2天。病理组织的固定四、组织固定良好的判断

用甲醛液固定组织，根据组织大小厚薄、致密或疏松,固定时间可由数小时至3天。如肾穿或肝穿组织，固定1～2小时已足够；若是阑尾等稍大标本，约需固定数小时；全子宫摘除等大标本需固定1～2天；更大的组织，应切取小块固定。任何组织固定时间必须充分，这是制片的关键。判断组织固定是否良好，可取已固定完毕的组织标本用刀从正中切开，如固定良好，其切面呈灰自色，质感较硬而具有弹性；若固定不好，切面可见血色，含液体较多，组织仍保留柔软状态。病理组织的固定五、固定后水洗

目的：洗去过多的固定液和尽可能消除组织与固定液作用所生成的分解产物，避免污染组织，延长脱水液使用期。流水冲洗时间：与所用的固定液、固定时间和组织大小有关。用甲醛液固定的组织，原则上都应流水冲洗。如为尸解成教学制片材料，固定后都应流水冲洗数小时至一晚，但外检组织标本，由于时间关系或赶在自动脱水机脱水，可不经流水冲洗而勤换低浓度乙醇脱水液；若用含重铬酸钾的

Zenker固定液，必须经流水冲洗12～24小时，不能直接投入乙醇内脱水；用

Bouin固定液固定的组织，可用流水作短时冲洗，但也可直接转入低浓度乙醇，经乙醇脱水