生物化学检验【课堂】糖化血红蛋白测定吴小波

职业教育医学检验技术专业教学资源库生物化学检验技术糖化血红蛋白测定BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2糖化血红蛋白(GHb)是由血清中糖类物质和血红蛋白结合形成的化合物。糖化血红蛋白模型图血红蛋白HbA(α2β2)模型图正常成人的血红蛋白有三种，分别为：HbA、HbA2、HbF。HbA是由2条α链和2条β链组成的，即α2β2。它是正常成人体内含量最多的血红蛋白，占比约为95%-97%；HbA2的分子结构是α2δ2，它在正常成人体内含量占比约为2%-3%；HbF的分子结构是α2γ2，它在正常成人体内含量最少，占比约为0.5%左右。血清中的糖类物质通过红细胞膜进入红细胞体内与血红蛋白β链上的N-末端缬氨酸残端，以非酶促、共价的方式结合在一起就形成了糖化血红蛋白。葡萄糖分子血红蛋白分子糖化血红蛋白这种结合是一种缓慢的、不可逆的反应，糖化血红蛋白一旦形成就不再解离，在血液中会相对稳定的存在。通过以上的概念我们发现，血清中的糖类物质结合血红蛋白的位点是β链上的N-末端，所以，我们不难理解，血清中的糖类物质只能与含有β链的HbA相结合，而HbA2和HbF没有β链，所以它们不能和糖类物质结合。我们将结合了糖类物质的HbA命名为HbA1，也称为糖化血红蛋白。

通过HbA与不同的糖类物质结合又可分类为HbA1a、HbA1b

、HbA1c，其中HbA1c是HbA与血清中的葡萄糖结合形成的糖化血红蛋白，是HbA1中含量最多的，占比达80%。因此，临床上常以HbA1c代表糖化血红蛋白的水平，也有人将糖化血红蛋白直接称为HbA1c。

GHb生成速率取决于一段时间内血糖的平均含量和红细胞的寿命，血糖浓度越高，血糖与红细胞接触时间越长，GHb的生成量也就越多。正常红细胞平均寿命约为120天，因此GHb的浓度可以反映测定前2-3个月内受试者血糖的平均水平，而与血糖的短期波动无关，是评价糖尿病患者血糖控制效果的良好指标。

GHb的测定方法可分为两大类：一类是将HbA1从HbA中分离出来并进行定量分析。常用的方法有离子交换层析微柱法、比色法、电泳法和亲和层析法等。离子交换层析微柱法在临床上较常用。它利用HbA1和HbA所带电荷不同，以及对交换树脂的附着力不同的原理将它们分离，然后用分光光度计在410nm处测定HbA1的浓度，最后计算HbA1占总血红蛋白的百分比。健康成人的正常参考区间为5.0%-8.0%。另一类是将HbA1c分离出来并进行定量分析。如高效液相色谱法、免疫法、等电聚焦法等。高效液相色谱法需要高精密的专业仪器，技术要求高，准确度高，是HbA1c测定的参考方法。全自动糖化血红蛋白仪（高效液相色谱法）免疫学方法测定HbA1c是利用抗原-抗体反应的原理，直接测定溶血后的HbA1c的浓度，再计算HbA1c占总血红蛋白的百分比。

由于存在两种计算方案，所以就形成了两个不同的健康成人正常参考区间：1、国际临床化学和实验室医学联盟（IFCC）计算方案：HbA1c（%）=HbA1c/Hb100%健康成人：HbA1c：2.8%-3.8%。2、糖尿病控制和并发症实验/美国糖化血红蛋白标准化方案

（DCCT/NGSP）计算方案：

HbA1c（%）=87.6HbA1c/Hb+2.27健康成人：HbA1c：4.8%-6.0%。糖化血红蛋白测定的临床意义：（1）糖化血红蛋白是糖尿病患者长期血糖控制的评价指标：能反映检测前2-3个月内的平均血糖水平，而与抽血时间、患者是否空腹、当前是否使用胰岛素等因素无关，是糖尿病监控达标的“金标准”。当血糖控制不佳时，GHb可达正常的2倍以上。目前我国糖尿病患者GHb控制标准，以HbA1c测定结果为例，评价如下：GHb4.0%~6.0%表明血糖控制正常；GHb6.0%~7.0%表明血糖控制比较理想；GHb7.0%~8.0%表明血糖控制一般；GHb8.0%~9.0%表明血糖控制较差，应注意饮食；GHb>9.0%表明血糖控制很差，应注意饮食结构，同时还需调整治疗方案。（2）对糖尿病性高血糖和应激性高血糖作出鉴别：前者GHb水平多增高，后者正常。（3）HbA1c水平低于参考区间，可能表明最近有低血糖发作、或者有Hb变异体存在或者是红胞寿命缩短，减少了红细胞暴露到葡萄糖中的时间。但较少出现此类情况，所以需谨慎解释此类患者的H