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无病毒苗木的鉴定及保存主讲人：孟凡丽01020304目录：脱毒效果的鉴定农艺性状鉴定无病毒苗木的繁殖无病毒苗木的保存1234指示植物法电子显微镜法抗血清鉴定法分子生物学检测法一、脱毒效果的鉴定

利用病毒在其他植物上产生特定症状作为鉴别病毒存在与否及种类的方法称指示植物法。一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测灵敏、准确、可靠、操作简便。根据不同病毒，选择合适的指示植物。一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测（1）优点：（2）对指示植物的要求：容易栽培。对要鉴别的病毒敏感，易接种，易感染，症状显著。一、脱毒效果的鉴定汁液涂抹法嫁接接种法1.指示植物检测(3)鉴定方法:一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测（1）汁液涂抹法香石竹汁液涂抹脱毒鉴定法操作示意图研钵中研磨，过滤。15432取被鉴定植物幼叶1－3g。滤液中加少量500－600目金刚砂。棉花球醮汁液涂抹叶面2－3次。指示植物15－25℃培养。一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测（1）汁液涂抹法一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测（2）嫁接接种法草莓指示植物小叶嫁接检测法示意图一、脱毒效果的鉴定1.指示植物检测（2）嫁接接种法将被鉴定植物的芽或幼叶嫁接在指示植物上，4～6周后根据指示植物症状来判断是否脱毒。抗原与抗体发生特异性反应（血清学反应），根据反应的症状可鉴别病毒存在与否和种类，这种方法称为血清学鉴定。一、脱毒效果的鉴定(1)概念：2.抗血清鉴定法一、脱毒效果的鉴定2.抗血清鉴定法(2)原理：病毒侵入动物体后，动物血清中会产生抗体，含抗体的血清称为抗血清，病毒即为抗原。专一性高，结果准确，快速简便，一般几小时甚至几分钟就可完成。①间接法：是用家兔球蛋白的山羊抗体与酶结合后制成羊抗兔酶标记抗体，检测各种病毒。一、脱毒效果的鉴定2.抗血清鉴定法（3）优点：（4）方法：②双抗体夹心法：是用酶特异性抗体检测抗原的方法。利用电镜直接观察、检查出有无病毒存在。还可得知有关病毒颗粒的大小、形状和结构。一、脱毒效果的鉴定(1)概念：3.电子显微镜法一、脱毒效果的鉴定3.电子显微镜法(2)优点：由于观察病毒特征是相当稳定的，故对病毒鉴定及研究一种未知的病原物是很重要的。通过检测病毒核酸来证实病毒的存在。一、脱毒效果的鉴定(1)概念：4.分子生物学检测法一、脱毒效果的鉴定(2)优点：

此法操作简便，灵敏度高，特异性强，检测速度快，可用于大量样品的检测。4.分子生物学检测法无病毒苗木经过脱毒和脱毒效果鉴定后，还需进行田间农艺性状鉴定，确证脱毒苗仍保持原品种的特征特性之后，才能作为原种进行推广。二、农艺性状鉴定三、无病毒苗木的繁殖主要采用无性繁殖方法，如嫁接、扦插、压条、匍匐茎繁殖和微型块茎(根)繁殖等方法繁育无病毒苗木。1.建立无病毒母本园2.完善繁育手续3.规范繁育技术三、无病毒苗木的繁殖在繁殖无病毒苗木时，对其繁殖技术有如下要求：02040301无病毒苗木应种植在300目的防虫网内。喷施农药防治虫害，保证无病毒苗木在

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