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文档简介
水处理微生物革兰氏染色徐晨伟助教知识点主要内容革兰氏染色的原理革兰氏染色操作步骤革兰氏染色
细菌的染色原理细菌细胞微小而透明，通过染色增加其背景反差，易于观察其形态和结构。细菌在通常培养情况下总是带负电荷，故用带正电的碱性染料染色。革兰氏染色A简单染色法：即用一种染液染色菌体，一般菌体被染上染料颜色。此法常用来观察细菌的形态、大小和排列方式。B复合染色法：即用两种染料染色，以区别细菌的革兰氏染色反应或抗酸性反应，或将菌体和某一结构染成不同颜色。常用的染色法革兰氏染色
C.Gram（革兰）于1884年发明的一种鉴别不同类型细菌的染色方法根据此染色法，细菌可分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。革兰氏染色革兰氏染色
革兰氏染色步骤1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染2、用碘溶液进行媒染，其作用是提高染料和细胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细胞呈无色。4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对涂片进行复染。例如蕃红，它使原来无色的革兰氏阴性细菌最后呈现红色，而革兰氏阳
性细菌继续保持深紫色革兰氏染色革兰氏染色阳性菌阴性菌菌体颜色变化革兰氏染色（1）与等电点有关：
革兰氏阳性菌pH2～3，阴性菌pH4～5，加碘液媒染，等电点降低，阳性菌降低的更低，与结晶紫结合得更牢固；阴性菌结合力弱，易被乙醇脱色。革兰氏染色机制：革兰氏染色（2）与细胞壁有关：革兰氏染色机制：肽聚糖磷壁酸多糖孔蛋白质脂质磷壁酸
外膜
肽聚糖革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌革兰氏染色特征强度厚度肽聚糖层数肽聚糖含量磷壁酸脂多糖脂肪蛋白质G–疏松薄，5～10nm少，1～3层少（10～20％）－＋含量较高含量较高G+坚韧厚，20～80nm多，多达50层高（50～90％）＋－一般无无革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁构造的比较革兰氏染色（2）与细胞壁有关：一般认为在革兰染色的过程中，细菌细胞内形成了一种不溶性的深紫色的结晶紫-碘的复合物，这种复合物可被乙醇从G-菌中浸出，但不易从G+菌中浸出。这是由于G+菌细胞壁较厚，肽聚糖含量较高，网格结构紧密，含脂量又低，当用乙醇脱色时，肽聚糖网孔由于缩水会明显收缩，从而使结晶紫-碘复合物不易被洗脱而保留在细胞内，故菌体呈深紫色。而G-细胞壁薄，肽聚糖含量低，且网格结构疏松，故遇乙醇后，其网孔不易收缩，加上G-菌的脂类含量高，当用乙醇脱色时，脂类物质
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