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文档简介

《遗传学》细菌的变异与突变体筛选一、细菌的变异类型非遗传性变异遗传性变异细菌变异基因未改变，性状暂时改变，如菌落形态改变基因改变，性状稳定遗传，如细菌S→R变异基因是否变化一、细菌的变异类型自然变异人工诱变细菌变异未经人工改变的外界条件下，自然发生的突变，发生几率低诱变因素的影响下而发生的突变，其突变率常高于自然突变是否诱变二、细菌变异的常见表现（一）菌落形态变异细菌的菌落可大致分为表面光滑、湿润，边缘整齐的光滑型（S型）和菌落表面粗糙，边缘不整齐的粗糙型（R型）。在一定条件下，光滑型菌落可变为粗糙型，称为S→R变异。S→R变异，经常伴随着S型抗原的丧失和病原菌毒力由强变弱等性状的改变。菌落二、细菌变异的常见表现（二）抗原变异由于细菌基因突变而引起其抗原结构发生改变的变异类型。当编码细菌的抗原结构包括菌体抗原、鞭毛抗原、荚膜抗原等的基因发生突变时，细菌形成相应抗原结构的能力丧失，引起细菌抗原性变异。如常见的细菌细胞壁缺陷变异（细菌L型等）、荚膜变异或鞭毛变异等。二、细菌变异的常见表现（三）抗性变异是对某种化学药物或致死物理因子抗性的变异。这种抗性具有遗传性。超级细菌二、细菌变异的常见表现（四）营养型变异营养缺陷型变异是细菌丧失合成一种或几种生长因子的能力，无法在基本培养基上正常生长繁殖的变异类型。如变异株丧失对某种糖类、维生素、氨基酸或其它生长因子的合成能力，在补充这些营养物质的培养基上才能生长。营养型变异菌株可作为杂交、转化、转导和原生质体融合等研究中的标记菌种。三、筛选方法（一）菌落筛选法根据菌落在选择培养基中不同进行筛选。如Lac-突变菌株在伊红美蓝培养基（EMB）上形成白色或粉红色菌落，Lac+菌落为金属光泽的紫色菌落。（二）营养缺陷型筛选方法营养缺陷型：需要在基本培养集中加入某种营养成分才能生长的微生物突变体。常用的筛选方法有影印法、夹层培养法等。1、影印法将待测的浓缩菌悬液涂在完全培养基平板上，待其长好后作为母平板。用一小块灭菌的丝绒固定在直径较平板略小的圆柱形木块上，作为接种工具。用它在母平板上轻轻印一下，再在基本培养基平板上印一下，经培养后，影印平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置对应，比较二个平板上菌落的生长状况，可从相应位置的母平板上选出待测的营养缺陷型菌株。2、夹层培养法先在培养皿中倒一层不含菌的基本培养基，待冷凝后，加一层含菌的基本培养基，冷凝后，再加一层不含菌的基本培养基，经培养出现菌落后，在培养皿底的相应位置做上标记，然后再加一层完全培养基，再经培养出现的菌落，多数是只能在完全培养基上生长的营养缺陷型。（三）抗性突变型筛选方法将细菌涂布在含有某种抗生素或噬菌体的培养基上

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