2023年生物技术期末复习-蛋白质工程原理（生物技术）考试参考题库（含答案）

2023年生物技术期末复习-蛋白质工程原理（生物技术）考试参考题库（含答案）（图片大小可自由调整）卷I一.综合考核题库(共50题)1.试简要说明盒式突变的优缺点?（章节：第四章难度：4)2.今有甲、乙、丙三种蛋白质，等电点分别为8.0、4.5和10.0，当在pH8.0缓冲液中，它们在电场中的移动情况为：_____向负极移动（章节：第五章难度：3）3.位点特异性突变大体分为三类：一类是通过_____，第二类是盒式突变法，第三类是利用PCR反应，以双链DNA为模板进行的基因突变。（章节：第四章难度：3）4.蛋白质芯片所用的载体应具备的条件：（章节：第八章，难度：1）A、表面需有活性基团，能偶联蛋白分子B、容量合适C、应具备惰性和稳定性D、应具备良好的生物兼容性5.蛋白质分离纯化的一般原则有哪些？怎样运用以上原则？（章节：第五章难度：4)6.有机溶剂分级分离蛋白质的原理是什么？（章节：第五章难度：4)7.下列有关电泳时溶液的离子强度的描述中，错误的是（章节：第五章难度：3)A、溶液的离子强度对带电粒子的泳动有影响B、．离子强度越高、电泳速度越快C、离子强度太低，缓冲液的电流下降D、离子强度太低，扩散现象严重，使分辨力明显降低8.蛋白质可逆沉淀的方法有：_____、盐析法和有机溶剂沉淀法（章节：第五章难度：3）9.有关凝胶色谱法和电泳法的说法正确的是：（章节：第五章难度：2)A、它们都是分离蛋白质的重要方法B、它们的原理相同C、使用凝胶色谱法需要使用缓冲溶液而电泳不需要D、以上说法都正确10.蛋白质的电泳迁移率与下述因素中有关的是（章节：第五章，难度：3）A、所带的净电荷B、重量C、颗粒直径D、质/荷比E、形状的不同11.PVDF膜是制备蛋白质芯片最常用的膜载体（章节：第八章难度：2）12.下列哪一项因素不影响α-螺旋的形成？（章节：第一章难度：1)A、碱性氨基酸相邻排列B、酸性氨基酸相邻排列C、脯氨酸的存在D、丙氨酸的存在E、甘氨酸的存在13.蛋白质多肽链中的肽键是通过一个氨基酸残基的_______和另一氨基酸的_______连接而形成的。（章节：第一章难度：1）14.Pro与茚三酮反应生成_____色化合物（章节：第四章难度：3）15.维持蛋白质三、四级结构的化学建是_____、_____、_____、_____。（章节：第四章难度：5）16.酶的活性中心空间构象不是刚性的，在与底物接触时表现出一定的_____性和_____性。（章节：第十章难度：3）17.对于膜蛋白的提取，还要加入去污剂以除去膜脂，常用的去污剂有：_____,TritonX100,NP-40,Tween-20等（章节：第五章难度：4）18.双向电泳（章节：第五章难度：3）19.氨基酸处于等电点状态时，主要以两性形式存在，此时它的溶解度_______。（章节：第五章难度：2）20.分子病患者体内异常蛋白质是由于（章节：第一章难度：3)A、一级结构中某一氨基酸被另一氨基酸取代B、一级结构中相邻的两个氨基酸正常顺序被颠倒C、蛋白质的空间结构发生改变D、一级结构中某一氨基酸缺失E、以上都不是21.关于蛋白质三级结构的叙述，下列哪项是正确的？（章节：第四章，难度：4）A、亲水基团及可解离基团位于表面B、亲水基团位于内部C、疏水基团位于内部D、羧基多位于内部E、球状蛋白质分子表面的洞穴常常是疏水区22.蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定（章节：第四章难度：3)A、溶液pH值大于pIB、溶液pH值小于pIC、溶液pH值等于pID、溶液pH值等于7.4E、在水溶液中23.考马斯亮兰：灵敏度较低，检测限度约为每点10ng蛋白，但可以染色多种蛋白质，并能与蛋白量呈两个最高数量级的线性关系。（章节：第二章难度：1）24.大肠杆菌作为表达体系的不足有哪些？（章节：第四章难度：4)25.在蛋白质分子中，一个氨基酸的α碳原子上的_____与另一个氨基酸α碳原子上的_____脱去一分子水形成的键叫_____，它是蛋白质分子中的基本结构键。（章节：第一章难度：2）26.一个有效的表达载体的必需的构造有哪些？（章节：第四章难度：4)27.电泳分离蛋白质的原理，是在一定pH条件下，不同蛋白质_____和_____不同，因而在电场中移动的方向和速率不同，从而使蛋白质得到分离。（章节：第五章难度：3）28.大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为16%，如测得1g样品含氮量为10mg，则蛋白质含量为_____。（章节：第五章难度：3）29.常用的吸附剂有极性的和非极性的两种。羟基磷灰石、硅胶、氧化铝和人造沸石属前者，活性炭属后者。（章节：第五章难度：3）30.蛋白质中在280nm处吸光值最大的是下列哪种氨基酸？（章节：第四章难度：4)A、色氨酸B、组氨酸C、苏氨酸D、半胱氨酸31.位点特异性突变大体分为三类：一类是通过寡核苷酸引物突变，第二类是盒式突变法，第三类是利用_____反应，以双链DNA为模板进行的基因突变。（章节：第四章难度：1）32.简述等电聚焦电泳法的特点。（章节：第五章难度：4)33.试简要说明PCR方法诱变的优缺点?（章节：第四章难度：4)34.酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的_____、减少抗原性，增加_____。（章节：第十章难度：3）35.组成蛋白质的氨基酸只有20种，为什么蛋白质的种类却极其繁多（章节：第一章难度：4)36.什么是蛋白质芯片？（章节：第五章难度：4)37.酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。（章节：第十章难度：2）38.下列哪一项不是蛋白质的性质之一？（章节：第五章难度：2)A、、处于等电点时溶解度最小B、加入少量中性盐溶解度增加C、变性蛋白质溶解度增加D、有紫外吸收特性39.蛋白质工程流程是（章节：第五章难度：5)A、基因→表达→形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能B、对蛋白质进行分子设计→改造蛋白质分子→行使功能C、预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相应的脱氧核苷酸序列D、预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→合成相应的mRNA40.凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的是（章节：第五章难度：2)A、相对分子质量大的B、相对分子质量小的C、带电荷多的D、带电荷少的41.蛋白质的二级结构最基本的有两种类型，分别是_______、_______。（章节：第一章难度：1）42.在pH6.0时将一个丙、精、谷3种氨基酸的混合液进行纸上电泳，待在原点的是_____。（章节：第一章难度：3）43.蛋白质的复性（章节：第五章难度：3）44.将相对分子质量分别为a（90，000），b（45，000）c（110，000）的三种蛋白质混合溶液进行凝胶过滤层析，洗脱先后顺序为_____。（章节：第五章难度：2）45.[标签:内容]46.为什么要构建融合基因？（章节：第四章难度：4)47.当氨基酸的pH=pI时，氨基酸以两性离子形式存在，当pH>pI时，氨基酸以_____离子形式存在。（章节：第一章难度：3）48.多肽链中主链骨架的组成是（章节：第一章难度：5)A、－NCCNNCCNNCCN－B、DCHNOCHNOCHNODC、DCONHCONHCONHDD、DCNOHCNOHCNOHDE、DCNHOCCCNHOCCD49.蛋白质的变性（章节：第一章难度：3）50.结合酶在下列哪种情况下才有活性（章节：第十章难度：3)A、酶蛋白单独存在B、辅酶单独存在C、亚基单独存在D、全酶形式存在E、激活剂存在卷II一.综合考核题库(共50题)1.蛋白质的一级结构是指_____在蛋白质多肽链中的_____、_____（章节：第一章难度：5）2.膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。（章节：第十章难度：3）3.下列说法正确的是（章节：第五章，难度：5）A、在哺乳动物基因表达过程中，与正常细胞生理特征比较接近的肿瘤细胞，常被选择为基因转移的受体细胞。B、提高纯度、增加产量、保持活性是蛋白质分离纯化过程中应遵循的三大原则C、蛋白质的提取时，对不同的材料要选取合适的方法进行预处理和细胞破碎，例如：红细胞可以用溶胀的方法。D、蛋白质的分离提纯尽可能选在37℃的环境下进行4.玻片作为芯片载体有如下不足：（章节：第八章，难度：3）A、蛋白质的连接容量小B、有吸附非特异性蛋白质的性质C、来源方便、廉价D、具有不侵润性，使杂交体积减低到最小5.下列维生素中哪一个不是脂溶性维生素（章节：第十章难度：3)A、vitAB、vitDC、vitKD、vltEE、vitC6.单体酶（章节：第十章难度：3）7.对蛋白质沉淀、变性和凝固的关系的叙述，哪项是正确的（章节：第五章难度：3)A、变性的蛋白质一定要凝固B、变性的蛋白质一定要沉淀C、沉淀的蛋白质必然变性D、凝固的蛋白质一定变性E、沉淀的蛋白质一定凝固8.紫外吸收测定蛋白质含量的原理是什么？（章节：第五章难度：4)9.1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（25oC，PH及底物浓度为最适宜）每_____内,催化_____的底物转化为产物的酶量为一个国际单位，即1IU。（章节：第十章难度：3）10.酵母细胞作为表达系统的优点?（章节：第四章难度：4)11.若样品中含有核酸类杂质，应如何校正？（章节：第五章难度：4)12.在CaCL2和_____存在下，重组DNA便很容易的被细胞吸收（章节：第四章难度：3）13.蛋白质分离纯化与鉴定主要包含一下几个主要步骤：材料的选取、材料的预处理、蛋白质的提取、_____、蛋白质的鉴定（章节：第五章难度：3）14.蛋白质组学（章节：第二章难度：3）15.HbS与HbA的区别在于HbA的_____链的_____端的_____位的_____残基被_____残基所取代。（章节：第五章难度：5）16.在pH6.0时将一个丙、精、谷3种氨基酸的混合液进行纸上电泳，移向负极的是_____。（章节：第一章难度：3）17.羟基磷灰石是最常用的蛋白质非极性吸附层析介质，而带有苯基的琼脂糖凝胶则是常用的疏水层析介质（章节：第五章难度：2）18.按照分子形状分类，蛋白质分子形状的长短轴之比小于10的称为_____，蛋白质分子形状的长短之比大于10的称为_____。（章节：第四章难度：3）19.多酶复合体（章节：第十章难度：3）20.使酶原激活方式的正确表达是（章节：第十章难度：4)A、氢键断裂,改变酶分子的构象B、酶蛋白与辅助因子结合C、.酶蛋白进行化学修饰D、亚基解聚或聚合E、切除寡肽,分子构象变化21.盐析法分离蛋白质的原理是什么？（章节：第五章难度：4)22.关于蛋白质基本组成正确的是（章节：第一章，难度：2）A、由C、H、O、N等多种元素组成B、含氮量约为16%C、可水解成肽或氨基酸D、由α氨基酸组成E、组成蛋白质的氨基酸均为D型23.一级结构是蛋白质的_____结构，决定蛋白质的_____结构。（章节：第一章难度：3）24.在IEF的电泳中，具有pH梯度的介质其分布是从阳极到阴极，pH值逐渐减小。（章节：第五章难度：3）25.玻片作为芯片载体有如下优点：（章节：第八章，难度：3）A、来源方便、廉价B、具有足够的稳定性和惰性C、具有不侵润性，使杂交体积减低到最小D、玻片的荧光信号本底低26.蛋白质在溶液中能形成稳定的胶体就要使溶液的PH值靠近蛋白质的等电点（章节：第五章难度：2）27.常用的中性盐主要有_____，优点是温度系数小而溶解度大。（章节：第五章难度：2）28.镰刀型红细胞性贫血是由于HbA的结构变化引起的，其变化的特点是（章节：第五章难度：3)A、HbA的α链的N-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代B、HbA的α链的C-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代C、HbA的β链的N-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代D、HbA的β链的C-末端第六位谷氨酸残基被缬氨酸所取代E、以上都不是29.下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是错误的？（章节：第五章难度：3)A、氨基酸的疏水侧链很少埋在分子的中心部位B、带电荷的氨基酸常在分子的外侧，面向水相C、蛋白质的一级结构在决定高级结构方面是重要因素之一D、蛋白质的空间结构主要靠次级键维持30.双向电泳，第一向根据蛋白质的_____不同。（章节：第五章难度：3）31.酶不能通过下列哪一方法加快反应速度（章节：第十章难度：4)A、底物分子与酶的催化基团接近与定向B、酶诱导底物分子发生变形,从而使敏感键易断裂C、酶分子中氨基酸侧链基团可作为参与化学反应的质子的供体或受体D、利用肽键的键能降低反应活化能E、酶与底物形成共价结合的中间络合物32.蛋白质盐析最常用的中性盐是_____（章节：第五章难度：2）33.抗体在生物医药方面有着广泛的应用，在疾病的诊断、疾病的治疗、器官移植等方面发挥着越来越重要的作用。（章节：第十一章难度：2）34.超滤法（章节：第五章难度：3）35.蛋白质的二级结构有_____、_____、_____和_____四种稳定构象异构体（章节：第四章难度：5）36.低温可以抑制蛋白酶的对蛋白质的降解作用（章节：第十章难度：3）37.氨基酸在等电点时具胶体性质有的特点是（章节：第五章难度：5)A、不带正电荷B、不带负电荷C、A和BD、溶解度最大E、电场中不泳动38.天然氨基酸中，_______不含不对称碳原子，故无旋光性（章节：第一章难度：2）39.双向电泳，第二向根据蛋白质的_____不同-SDS（章节：第五章难度：4）40.沉淀蛋白质的主要方法有哪些？各有何特点？（章节：第五章难度：4)41.蛋白质的一级结构是指（章节：第一章难度：2)A、蛋白质中氨基酸的种类和数目B、蛋白质中氨基酸的排列顺序C、蛋白质分子中多肽链的折叠和盘绕D、上述都是42.等电点沉淀法分离分离蛋白质的原理是什么？（章节：第五章难度：4)43.离子交换层析的原理是什么？（章节：第五章难度：4)44.蛋白质所形成的胶体溶液，在下列哪种条件下不稳定？（章节：第四章难度：1)A、pH>pIB、pHC、pH=pID、pH=7.4E、在水溶液中45.测定蛋白质相对分子质量的方法有沉降法、_____和SDS法。（章节：第五章难度：3）46.构成蛋白质的标准氨基酸有多少种？（章节：第一章难度：4)A、8种B、15种C、20种D、．25种E、30种47.下列关于蛋白质结构的叙述，哪一项是正确的？（章节：第五章难度：1)A、蛋白质分子净电荷为零时的pH是它的等电点B、大多数蛋白质在含有中性盐的溶液中会沉淀析出C、由于蛋白质在等电点时溶解度最大，所以沉淀蛋白质时应远离等电点D、以上各项均不正确48.下列关于血红蛋白提取和分离实验中样品处理步骤的描述，正确的是（章节：第五章难度：3)A、.红细胞的洗涤：加入蒸馏水，缓慢搅拌，低速短时间离心B、血红蛋白的释放：加入生理盐水和甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌C、分离血红蛋白：将搅拌好的混合液离心、过滤后，用分液漏斗分离D、透析：将血红蛋白溶液装入透析袋，然后置于pH为4.0的磷酸缓冲液中透析12h49.测得某一蛋白质样品的含氮量为0.40g，此样品约含蛋白质多少克（章节：第五章难度：3)A、2.00gB、2.50gC、6.40gD、3.00gE、6.25g50.由于大多数蛋白质的含氮量接近于16%，所以，可以根据生物样品中的含氮量来计算蛋白质的大概含量。（章节：第一章难度：2）卷III一.综合考核题库(共50题)1.常用的吸附剂有极性的和非极性的两种。羟基磷灰石、硅胶、氧化铝和人造沸石属_____者。（章节：第五章难度：4）2.蛋白质颗粒表面的_____和_____是蛋白质亲水胶体稳定的两个因素。（章节：第一章难度：3）3.请简要写出蛋白质分离纯化与鉴定主要步骤？（章节：第五章难度：4)4.一血清标本的含氮量为5g/L，则该标本的蛋白质浓度（章节：第五章难度：3)A、15g/LB、20g/LC、31/LD、45g/LE、55g/L5.盐溶（章节：第五章难度：3）6.以pBR322组建的、用于酵母基因工程的质粒有4种：整合质粒、复制质粒、附加体质粒、_____.（章节：第四章难度：3）7.同功酶是指（章节：第十章难度：4)A、辅酶相同的酶B、活性中心的必需基因相同的酶C、功能相同而酶分子结构不同的酶D、功能和性质相同的酶E、功能不同而酶分子结构相似的酶8.维持蛋白质二级结构稳定的主要作用力是（章节：第一章难度：2)A、盐键B、疏水键C、氢键D、二硫键9.蛋白质进入层析柱后，小分子流出的时间较_____，大分子流出的时间较_____，因此先流出的蛋白质分子是_____分子。（章节：第五章难度：2）10.蛋白质变性后表现为（章节：第五章难度：1)A、粘度下降B、溶解度增加C、不易被蛋白酶水解D、生物学活性丧失E、易被盐析出现沉淀11.维持蛋白质一级结构的化学建是_____和_____。（章节：第四章难度：3）12.以pBR322组建的、用于酵母基因工程的质粒有4种：整合质粒、_____、附加体质粒、稳定质粒（章节：第四章难度：2）13.从组织提取液沉淀活性蛋白而又不使之变性的方法是加入（章节：第五章难度：3)A、高浓度HClB、硫酸铵C、三氯醋酸D、氯化汞E、钨酸14.酵母双杂交系统是在真核模式生物酵母中进行的，研究活细胞内蛋白质相互作用（章节：第二章难度：2）15.PCR技术的出现为基因的突变，基因的剪接开辟了一条极其有效、极其快捷的道路（章节：第四章难度：2）16.在pH6.0时将一个丙、精、谷3种氨基酸的混合液进行纸上电泳，移向正极的是_____。（章节：第五章难度：1）17.球蛋白易溶于稀盐、稀酸/碱、水（章节：第五章难度：1）18.具有专一而又可逆的亲和力的生物分子是成对互配的。主要的有：_____、酶与竞争性抑制剂、酶和辅酶、抗原与抗体、DNA和RNA、激素和其受体、DNA与结合蛋白等。（章节：第五章难度：4）19.液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。（章节：第十章难度：2）20.维持蛋白质三级结构稳定的因素是（章节：第一章难度：4)A、肽键B、二硫键C、离子键D、氢键E、次级键21.酶法产生饴糖使用α－淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。（章节：第十章难度：3）22.酶的分离纯化方法中，根据目的酶与杂质分子大小差别有_____，超滤法和超离心法三种。（章节：第十章难度：3）23.蛋白质的四级结构（章节：第一章难度：3）24.下列关于两性电解质说法正确的是（章节：第五章，难度：1）A、是等电聚焦中形成pH梯度的关键物质。B、并不是单一的物质C、是由一系列具有不同等电点的脂肪族多氨基多羧基化合物所组成的混合物D、相对分子质量在300-1000之间。E、商品化的两性电解质常为略黄色的水溶液。25.蛋白质的分离纯化及鉴定有多种方法，主要取决于蛋白质的哪些特性？（章节：第五章难度：4)26.标准氨基酸中，含羟基的氨基酸是：_____、_____、_____。（章节：第一章难度：2）27.寡聚酶（章节：第十章难度：3）28.稳定蛋白质的次级键包括_____、_____、_____等。（章节：第一章难度：3）29.用来在蛋白质免疫印迹试验中封闭的是：_____或标准牛血清白蛋白（章节：第五章难度：1）30.载体表面需有活性基团，能偶联蛋白分子。（章节：第八章难度：2）31.聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质，除一般电泳电荷效应外，欲使分辩力提高还应有的作用是（章节：第五章难度：3)A、浓缩作用B、扩散作用C、重力作用D、分子筛作用E、电渗作用32.下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是（章节：第五章难度：4)A、透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性B、采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来C、离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离D、蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动33.以下哪项不是酶的特点（章节：第十章难度：3)A、酶都是由细胞制造的蛋白质B、易受PH,温度的影响C、只加速反应速度,不改变反应的平衡点D、催化效率高E、具有一定的特异性34.在电泳过程中，蛋白质因为电荷、大小和形状的不同收到多种物理效应：分子筛效应、_____、浓缩效应（章节：第五章难度：3）35.常用的蛋白表达系统有_____、_____和_____。（章节：第四章难度：5）36.哺乳动物细胞表达体系的优点?（章节：第四章难度：4)37.聚丙烯酰胺凝胶电泳的一般步骤：电泳槽的准备灌制_____灌制_____样品的准备点样电泳染色与割胶样品回收与浓缩（章节：第五章难度：3）38._____是免疫印迹中应用最广的滤膜（章节：第五章难度：2）39.下列说法正确的是（章节：第五章，难度：3）A、蛋白质的分离提纯尽可能选用较低的温度，一般是0℃4℃。B、一般蛋白质在其生理温度时都比较稳定C、低温可以抑制蛋白酶的对蛋白质的降解作用D、低温可以抑制大多数细菌的繁殖，从而减少对蛋白质的破坏作用E、以上都不对40.蛋白质免疫印迹试验中，二抗上的显色标记一般为同位素或酶，常用的为_____或碱性磷酸酯酶。（章节：第五章难度：1）41.通常只有_____蛋白质才能正常结晶，因此蛋白质结晶是判断蛋白质活性的一个指标（章节：第五章难度：3）42.蛋白质的二级结构包括（章节：第一章，难度：2）A、α螺旋B、β片层C、β转角D、双螺旋E、以上都是43.常用的中性盐主要有硫酸铵，优点是温度系数大而溶解度大。（章节：第五章难度：5）44.蛋白质分离、纯化的一般步骤是什么？提纯过程中要注意哪些问题？（章节：第五章难度：4)45.对于膜蛋白的提取，还要加入_____以除去膜脂，常用的有：SDS,TritonX100,NP-40,Tween-20等（章节：第五章难度：3）46.酶原（章节：第十章难度：3）47.在电泳过程中，蛋白质因为电荷、大小和形状的不同收到多种物理效应：_____、电荷效应、浓缩效应（章节：第五章难度：2）48.下列有关酶的论述,哪一项是错误的（章节：第十章难度：3)A、酶有高度的特异性B、酶有高度的催化效能C、酶能催化热力学上不可能进行的反应D、酶具有代谢更新的性质E、酶由活细胞产生,在试管内仍有催化效能49.聚丙烯酰胺凝胶具有的优点有（章节：第五章，难度：4）A、机械强度好、弹性大B、透明、化学稳定性高C、有电渗作用、设备简单D、样品量多E、分辨率高50.蛋白质的三级结构（章节：第一章难度：3）卷I参考答案一.综合考核题库1.正确答案:优点：简单、突变效率高。缺点：合成多条引物的成本较高2.正确答案:丙3.正确答案:寡核苷酸引物突变4.正确答案:A,B,C,D5.正确答案:原则有三：提高纯度、增加蛋白质产量、保持蛋白质活性。运用时要根据蛋白质分离纯化的最终目的，灵活运用上述三个原则。6.正确答案:用与水互溶的乙醇、丙酮等夺取水膜，降低介电常数，增加蛋白质之间的相互作用，使蛋白质颗粒凝集而沉淀。不同蛋白质所需溶剂浓度不同，可进行分级沉淀，但易引起变性，与有机溶剂浓度、作用时间和沉淀温度有关。7.正确答案:B8.正确答案:等电点沉淀法9.正确答案:B10.正确答案:A,C,D,E11.正确答案:正确12.正确答案:D13.正确答案:氨基羧基14.正确答案:黄15.正确答案:疏水作用离子键氢键范德华力16.正确答案:柔运动17.正确答案:SDS18.正确答案:是等电聚焦电泳和SDS的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。19.正确答案:最小20.正确答案:A21.正确答案:A,C,E22.正确答案:C23.正确答案:正确24.正确答案:1、不能进行典型真核细胞所具有的复杂的翻译后修饰。2、广泛二硫键的形成以及外源蛋白组装成多亚基复合体的能力也受到限制。3、外源基因产物在大肠杆菌细胞内已形成不溶性的包涵体。4、当真核基因在大肠杆菌中表达时，作为起始氨基酸，甲硫氨酸依然保留在蛋白质的N末端。5、由于真核mRNA的结构特性以及密码子的使用频率与大肠杆菌本身的差异，当用真核mRNA的序列直接在大肠杆菌细胞中表达时，有时不能得到足够的产物。25.正确答案:羧基氨基肽键26.正确答案:启动子，核糖体结合位点，转录终止序列，复制起始点，筛选基因27.正确答案:带电荷量分子大小28.正确答案:0.062529.正确答案:正确30.正确答案:A31.正确答案:PCR32.正确答案:特点：①使用两性载体电解质，在电极之间形成稳定的、连续的、线性的pH梯度。②由于“聚焦效应”，即使很小的样品也能获得清晰的、鲜明的区带界面③电泳速度快。④分辨率高。⑤加入样品的位置可任意选择。⑥可用于测定蛋白质类物质的等电点。⑦适用于中、大分子量（如蛋白质、肽类、同工酶等）生物组分的分离分析。33.正确答案:优点：操作简单，突变成功功率达100%。缺点：后续工作复杂，要与载体相连；TaqDNA聚合酶保真性低，要分析序列34.正确答案:活力稳定性35.正确答案:组成蛋白质的氨基酸虽然只有20种，但由于氨基酸在蛋白质多肽链中的种类、数目、比例、排列顺序及组合方式的不同，所以可构成种类繁多，结构各异的蛋白质。36.正确答案:蛋白质芯片,又称蛋白质阵列或蛋白质微阵列，是指以蛋白质分子作为配基,将其有序地固定在固相载体的表面形成微阵列；用标记了荧光的蛋白质或其他它分子与之作用，洗去未结合的成分，经荧光扫描等检测方式测定芯片上各点的荧光强度，来分析蛋白之间或蛋白与其它分子之间的相互作用关系。37.正确答案:错误38.正确答案:C39.正确答案:C40.正确答案:A41.正确答案:α-螺旋β-折叠42.正确答案:丙氨酸43.正确答案:在一定条件下，变性的蛋白质分子回复其原有的天然构象并回复生物活性的现象44.正确答案:c，a，b46.正确答案:外源蛋白通常易被宿主的蛋白水解酶降解。通过与特异蛋白质或特异的结构域形成融合蛋白，利于快速回收、纯化；融合蛋白可以体外切割去除融合部分，可以获得天然蛋白；通过与特定的蛋白质形成融合蛋白，可以避免外源蛋白在细胞内形成包涵体；基因融合是对基因进行改造的手段，广泛用于蛋白质结构功能的研究47.正确答案:负48.正确答案:E49.正确答案:蛋白质分子的天然构象遭到破坏导致生物活性丧失的现象50.正确答案:D卷II参考答案一.综合考核题库1.正确答案:氨基酸组成排列顺序2.正确答案:正确3.正确答案:A,B,C4.正确答案:A,B5.正确答案:E6.正确答案:一般由一条肽链组成。但有的由多条肽链组成，肽链间通过二硫健相连形成一个共价整体。7.正确答案:D8.正确答案:由于蛋白质中存在着含有共轭双键的酪氨酸苯丙氨酸和色氨酸，因此蛋白质具有吸收紫外光的性质，最大吸收峰在2第八章0nm波长处。在此波长范围内，蛋白质溶液的光密度OD2第八章0nm与其浓度呈正比关系，可作定量测定。9.正确答案:1分钟1μmol10.正确答案:1、作为单细胞生物，酵母在操作和生产上具有细菌表达系统的特点，能够像细菌一样在廉价的培养基上生长，能方便的操作外源基因；2、具有真核细胞对翻译蛋白的加工和修饰过程。3、可将异源基因与N-末端前导肽融合。4、可采用高表达基因的强启动子，并可以诱导调控5、可移去起始甲硫氨酸，避免了作为药物使用可能引起的免疫反应问题。6.可使表的产物定向。11.正确答案:当样品中含有核酸类杂质，可以根据核酸在260nm波长处有最强的紫外光吸收，而蛋白质在2第八章0nm处有最大的紫外光吸收的性质，通过计算可以适当校正核酸对于测定蛋白质浓度的干扰作用。但是，因为不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，虽然经过校正，测定结果还存在着一定的误差12.正确答案:聚乙二醇13.正确答案:蛋白质的分离纯化14.正确答案:是研究特定时间或特定条件下这些蛋白质表达情况的科学，其内容包括蛋白质的定性鉴定、定量检测、细胞内定位、相互作用研究等。其目的在于归类细胞中的蛋白质的整体分布，鉴定并分析感兴趣的个别蛋白，最终阐明它们的关系与功能。15.正确答案:βN第六谷氨酸缬氨酸16.正确答案:精氨酸17.正确答案:错误18.正确答案:球状蛋白纤维状蛋白19.正确答案:由几种酶靠非共价键彼此嵌合而成，其中每一个酶催化一个反应，所有反应依次进行，构成一个代谢途径或代谢途径的一部分。20.正确答案:E21.正确答案:高浓度的盐破坏水膜、中和电荷,使蛋白质聚集沉淀,不同蛋白质盐析的盐浓度不同,故用不同盐浓度分级沉淀蛋白质,分离的蛋白质不变性。22.正确答案:A,B,C,D23.正确答案:基本高级24.正确答案:错误25.正确答案:A,B,C,D26.正确答案:错误27.正确答案:硫酸铵28.正确答案:C29.正确答案:A30.正确答案:等电点31.正确答案:D32.正确答案:硫酸铵33.正确答案:正确34.正确答案:应用正压或离心力使蛋白质溶液透过有一定截留分子量的超滤膜，达到浓缩蛋白质溶液的目的，称为超滤法。35.正确答案:α－螺旋β－折叠β－转角无规卷曲36.正确答案:正确37.正确答案:E38.正确答案:甘氨酸39.正确答案:分子量大小40.正确答案:沉淀蛋白质的主要方法有：盐析、有机溶剂沉淀、重金属盐沉淀、生物碱试剂沉淀。盐析特点：利用中性盐破坏蛋白质的胶体稳定性（电荷和水化膜）而使其从溶液中析出。蛋白质不变性。不同蛋白质盐析时所需盐的浓度不同，故可用逐渐加大盐浓度的办法使溶液中混合的蛋白质先后分离不发生变性（分段盐析）。有机溶剂沉淀的特点：与水亲和性强，破坏蛋白质表面的水化膜，但不能中和电荷，因此需在等电点附近沉淀蛋白质，且在低温下进行以防止蛋白质变性。重金属盐沉淀的特点：调节溶液pH大于蛋白质的等电点，蛋白质带负电，与重金属结合而沉淀，一般使蛋白质变性。生物碱试剂沉淀特点：调节溶液pH小于蛋白质的等电点，蛋白质带正电，与某些酸的酸根结合而沉淀，一般使蛋白质变性。41.正确答案:B42.正确答案:原理：蛋白质在等