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文档简介
整套解剖器械、纱布、70%酒精、接种环、酒精灯、营养琼脂平板培养基等实验器材取病鱼鳃丝一小块,置于滴有无菌水的载玻片的边缘约10分钟,再用接种环沾水,在营养琼脂培养基平板上划线,尽量不重复划线,使其产生单个分散的菌落。在25℃恒温培养2天。从鳃部分离病原菌以新鲜病鱼的肝脏组织取样为例,先将病鱼肝脏表面用70%酒精棉球擦拭或用经火焰上灼烧后的解剖刀烫烧,以杀死表面的杂菌,随即在烧灼部位刺一小洞,用灭菌的接种环(待冷却2~3s)伸向烧灼部小洞中,用手指将接种环轻轻旋转两次,借以达到取足材料的目的,然后在营养琼脂培养基上划线分离。接种后的平板,放入28度恒温培养箱中培养24小时。从内脏器官组织分离病原菌观察并记录分离培养后的平板上出现的菌落特征用无菌接种环挑取分离平板上的单个菌落,接种到普通营养琼脂培养基斜面试管上,在28度恒温培养箱培养24小时,获得该菌的纯培养物,进行保种,并开展后续的一系列鉴定试验及细菌致病性实验转接斜面培养基保种
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