3.2-体外受精和早期胚胎发育

3.2体外受精和早期胚胎培养学习目标简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤简述哺乳动物胚胎的早期培养方法认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义学习重点（1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义（2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤学习难点（1）卵母细胞的采集和培养（2）精子的采集和获能一、试管动物技术概念通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，并通过培养发育为早期胚胎后，再经过移植产生后代的技术精子卵子受精卵早期胚胎子宫移植个体过程:人工操作体外受精1982年世界首例试管牛犊问世实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是

和

的培养。体外受精早期胚胎主要包括

、

和

等几个主要步骤。概念：采取雌性动物的

和雄性动物的

，使其在

受精。二、体外受精卵母细胞精子体外卵母细胞的采集精子的获取受精a.如何使雌性动物排出更多的卵子？b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子？d.采集的卵子是否马上可以受精？阅读P69、70思考以下问题：1.卵母细胞的采集和培养采用的主要方法是给供体注射

，使其排出更多的卵子，之后从

中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。促性腺激素输卵管a.如何使雌性动物排出更多的卵子？超数排卵处理b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子？对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。1.卵母细胞的采集和培养大家畜或大型动物，如牛，卵细胞的采集：从屠宰场已屠宰母畜的

中采集卵母细胞，也可以借助

、

或

等工具，直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。卵巢超声波(B超)探测仪内窥镜腹腔镜1.卵母细胞的采集和培养c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子？d.采集的卵子是否马上可以受精？经超数排卵处理获得卵子可直接与获能的精子在体外受精；但从已屠宰母畜的卵巢或活体采卵采集的卵母细胞，都要在体外经

后，才能与

精子结合完成受精。人工培养成熟获能MⅡ中期2、精子细胞的采集和获能（2）体外精子获能的方法：培养法:化学诱导法:如：啮齿动物、家兔和猪等如：牛、羊等家畜放入人工配制的获能液中放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中b.体外受精需要哪些前处理？卵巢卵母细胞新鲜或解冻的精液卵母细胞培养精子离心处理MⅠ期卵母细胞MⅡ期卵母细胞精子获能处理获能精子体外受精受精卵培养3、受精获能的精子和培养成熟的卵子，一般情况下在或中完成受精过程。

获能溶液专用的受精溶液为什么要经过离心处理？精液包含精子和精清（精浆）两部分，经离心处理后，可以除去精清以利于精子获能精子和卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分：有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培养“两盐”、“两酸”、“两素”、血清和水糖、氨基酸、无机盐、微量元素、促生长因子、血清、血浆等三、胚胎的早期培养发育培养液成分较一般动物细胞培养液复杂动物细胞培养液：动物胚胎培养液成分：有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存三、胚胎的早期培养不同动物胚胎移植时间不同牛、羊：小鼠、家兔：试管婴儿：桑椹胚或囊胚阶段注：胚胎发育的主要场所是母体（在体内发育）可在更早的阶段移植8~16个细胞阶段采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图（早期胚胎培养）早期胚胎胚胎移植C代孕母体D新个体（与B遗传物质相同）克隆动物的培育过程A雌性动物卵母细胞去核细胞质取核B动物体细胞核移植显微注射重组细胞有性生殖

核移植遵循

体外受精试管动物克隆动物发育起点生殖方式产生过程遗传物质遗传规律比较试管动物和克隆动物来自双亲受精卵重组细胞无性生殖主要来自核供体不遵循二者都要经过早期胚胎培养和胚胎移植胚胎移植采集卵母细胞体外培养采集精子体外获能体外受精早期胚胎培养受体牛小结（时期：）

1）超数排卵（试剂）

2）活体取卵（仪器）

3）从屠宰的卵巢取卵培养法化学法获能液或专用受精溶液（培养条件、目的阶段）成熟的卵子获能的精子MII中期

1）假阴道法

2）手握法

3）电刺激法1、下列动物可用培养法进行精子体外获能处理的是（）A、牛B、羊C、驴D、家兔D巩固练习2、不同动物胚胎移植的时间不同，但一般不会在下列哪个时期移植（）

A、卵裂期B、桑椹胚期

C、囊胚期D、原肠胚期D3、下列关于试管动物技术的叙述正确的是：A、应用该技术繁育后代的过程属于无性繁殖类型B、应用该技术繁育后代的过程属于有性繁殖类型C、试管动物技术是利用体细胞繁育后代的技术D、试管动物技术培育动物过程全部在体外进行B5、动物试管技术是指通过人工操作使精子和卵子在_______条件下成熟和________，并通过培养发育为_______后，再经_______产生后代的技术。体外受精胚胎移植6、哺乳动物的体外受精主要包___