新药药代动力学方法

新药药代动力学研究北京大学医学部基础医学院药理系楼雅卿新药药代动力学研究

药理学(Pharmacology)

药效学(Pharmacodynamics)(药理作用、作用机制和毒、副作用)药代动力学(Pharmacokinetics)(药物吸收、分布、代谢和排泄,ADME).新药药代动力学研究

非血管途径给药---吸收过程

|

血管给药----进入血液循环--分布和消除

|(代谢,排泄)

进入药物作用部位及其他组织|

临床药理效应或毒性反应

新药研究、开发及上市的药代动力学研究1.非临床(动物)的药代研究:*先导化合物药代研究.(筛选)*入选化合物的药代研究.2.临床药代动力学研究*I期临床药代动力学研究.(以正常受试者为试验对象)*II、III及IV临床药代动力学研究(包括特殊人群、病人为试验对象)新药药代动力学研究1.化学药物临床前药代动力学研究技术指导原则(试行).2.速释、缓释、控释制剂临床前药代动力学研究指导原则(试行).3.新生物制品临床前药代动力学技术指导原则(试行).4.化学药物临床药代动力学研究技术指导原则(试行).5.化学药物制剂人体生物利用度和生物等效性研究技术指导原则(试行).6.新生物制品临床药代动力学研究指导原则(试行).新药早期(先导化物)研究:

1.有效性：选择作用。2.安全性:*肝毒性。*三致试验。*Q-Tc不利影响-心脏毒性。3.药代研究:*吸收试验-Coca-2细胞通透性试验或整体动物试验。*P-糖蛋白转运-药物吸收、分布和排泄相关。*药物代谢:新药早期药代研究1.采用肝微粒体、肝细胞或肝灌流法研究药物代谢途径和药酶.2.P450酶系统及及亚型分析.3.整体动物试验.4.计算机模拟代谢物分析.

临床前（动物）药代动力学研究

目的：

探讨新药在动物体内的规律和特点。2为新药研制和开发前景提供信息。3为临床试验设计提供依据。进行临床前药代动力学的基本要求1.试验目的明确.2.分析方法可靠.3.试验设计合理.4.试验数据科学、全面、能满足新药评价要求.5.实事求是总结分析试验结果,作出客观的评价.建立分析方法。血药浓度经时变化:*单剂量给药试验。*多剂量给药试验等。药物吸收。蛋白结合率:求结合型/非结合型药物比值。组织分布。排泄试验:药物从尿、粪便和胆汁排泄。

研究内容:7.药物生物转化（代谢）:*代谢部位。

*代谢方式(途径)。

*药物代谢酶。*代谢产物。8.细胞色素P450酶(CYP)抑制和诱导作用。9.可能发生的药物相互作用。

研究内容:药品注册中临床前药代研究的技术要求:

常用的药物含量分析方法1.色谱法:1)高压液相色谱法(HPLC)HPLC-UVHPLC-FHPLC-ECDHPLC-MSn(LC-MSn)2)气相色谱法(GC)GC-FIDGC-NPDGC-ECDGC-MS

2.免疫法:放射免疫法(RIA)

酶免疫法(EMIT,ELISA等)萤光免疫法(FIA)

萤光偏振免疫法(FPIA)3.生物测定法:*微生物测定法*靶酶或靶细胞测定法4.放射性同位素示踪法:3H-,14C-,125I-,131I-5.稳定同位素示踪法:2H-,13C-,15N-,18O-等。

常用的药物含量分析方法

分析方法学研究的考察1.特异性:证明测定的物质为原形药物或其活性代谢,能排除内源性及其他外源性物质的干扰。

2.灵敏度:用最低检测浓度(LLOQ)表示。通常为标准曲线的最小浓度,要求能测出3-5个消除t1/2或Cmax的1/10或1/20的血药浓度。

3.标准曲线制备:至少包括5个药物浓度点,应能覆盖生物样品的浓度范围,不得外推。提供标准曲线性方程式和相关系数(r>0.99)。测定不同生物样品时应提供不同生物样品的药物标淮曲线。4.精确度:方法回收率表示。选择高、中、低三个浓度。回收率在80-120%范围内。

5.精密度:用相对标准误差(RSD)表示。选择高、中、低三个浓度,求日内和日间精密度,应<10-20%。

6.样品稳定性。7.质控。

对分析方法学研究考察试验药品1.药品的正式名称.2.药品的纯度、批号和来源.3.保存条件.4.试验用药品的配制方法,应和药效学及毒理学试验一致.试验动物选择*两种动物:小鼠、大鼠或兔,beagle犬或猴等。*口服药物试验不选用家兔。*选用动物应与药效及毒理试验一致。*最好选用一种能多次采取血样,制成药-时曲线的动物.*试验动物数,每个时间点不少于5个数据,雌雄各半.*生物制品试验应选能产生相应活性动物或与人源蛋白同源性高的动物,如猴,相应转基因动物等。

血药浓度经时变化试验目的和内容

目的:探讨药物吸收,分布和消除的动力学规律和特点。

试验内容:*单剂量给药。*多剂量给药。*口服药物的绝对生物利用度。*进食对口服药物吸收的影响。*性别因素的影响。

剂量的确定和给药途径1.高、中、低三种剂量:*主要参考动物药效学和毒理试验剂量(ED50,TD50,LD50,慢毒剂量

),*选择其有效剂量范围内,高、中、低三个剂量,高剂量不能>最大耐受量(MTD)。

2.给药途径应与药效学、毒理学及以后临床给药途径一致。

1.采样点冠应能反危映药物爱吸收、饥平衡/分布和宗消除三究个时相睬的动力唱学规律疤。2.吸收相声至少2个采血评点.3.平衡相至页少3个点.4.消除相舱为4-6个点.应能反映圈3～5个皂消除半衰评期或1导/10或政1/20奴的Cmax。5.求得一甜条完整坝的药屿–时焰曲线。图1.大耳白家符兔单次静戏脉注射三收种剂量（10m嚷g·k堪g-1，20mg借·kg-挖1，30m闯g·k塞g-1）A199养8脂肪乳罚后平均蔑药-时曲线坡比较。药代参踪蝶数的估萍算*国内多根选用3P97软件或算其他公逐认的药玩代动力针学程序舟软件来扎估算药怨代动力牲学参数拜。*可采用房凯室模型或帽非房室模森型程序。*主要药疾代动力倡学参数用有：血管给课药:提供t1/2,Vd愿,CL和AUC等参数。血管外毒给药:除上述胶参数外,尚应提供MRT,Cmax,Tmax蛾,和F值。家兔静罗注三种架剂量A199伴8后的药代众动力学参徐数(n=5)参数10舟20易3丸0(mg)T1/2(h)矩0.池36±0削.06元2.6柴7±0.嘱58旋2.落36±2得.87V(c)便(L/k吊g)期4.4弦0±0.洲57领6岂.11±热1.36恐5.39骄±2.4衬0AUC(队ug·m摸l/h)市1.13焰±0.2隶44碑.46±造0.96脖6.14瘦±1.1欠9CL(m戴g·ml膝.h-1)11乒.0±2扒.56靠5业.17±微0.82桨5.58暂±2.7酿9提供资料1.各组(各个)的药-时数据和预曲线图及仗其平均值.2.各组(各个)的药代参验数及其平独均值.3.试验结果铲分析和讨帆论:*吸收的规晚律和特点.*血药浓氏度和剂冤量相关显性.*药物消镰除动力己学的特狗点.*药物体内组分布特点.多次给药辰试验药品在临漏床需长期看给药及呈亦蓄积倾向拳时,应进行多浙次给药试琴验.1.选用一坚种有效覆剂量.2.确定给糊药间隔肚时间和蹲给药次趁数.3.测定3次Cmin岂,求稳态药-时数据和用曲线.4.求算t1/2奔,AUC算ss,C既min,房诚Cav和DF值等.5.比较单黎、多次摸给药试买验结果:药代规律普的差别和害蓄积性.单剂量丈和多剂独量口服散加替沙映星的药啊代参数药代参患数尘单耽剂量淋多剂雾量(10于d)____江____顽____胳____供____拍____锤____纪____龟____弃____Cmax劳(mg.璃L-1)拍3.3挎9±0.56毛3袄.51±0.9锁3Cmin孩(mg.桐L-1)肥0.厦23±0.1赞0岸0苹.29±0.1猛6Tmax告(h)浸0.9±0.29笑1.共15±0.41AUC(胸mg.h进.L-1)连2端0.26±4.2吴4*架2会6.1蚂6±4.5枪3t1/2塌(h)学7.菠25±1.50堆7提.69±0.8紫1Vd(摄L)限1清02.辨27±32.1串2猫97.蝇24±19.壮23CL(椒L.h-1)内19蔑.14±4.2擦4*孕1竹6.7荣2±2.93____鲁____性____兄____圆____虏____撤____包____希____都____遍_血管外砍给药的蝴药物吸椅收试验1.体外Coca既-2细胞模型桨试验.2.在体肠道哪试验.3.整体生物残利用度试军验:*绝对生剪物利用萍度试验.*相对生物像利用度试疫验.药物的叫组织分湾布目的：叮探讨药升物在组阴织分布览规律,亲和力及禽与药效和歇毒性的相鬼关性。通常选葡用大鼠们或小鼠孔。一种有参效剂量少。>13种折组织,恩根据药品行特点相应顽增加。(些肺,脾塑,肝,烈心,遮肾,脑送,肌,漠平滑肌营,脂肪锹,生殖介器,骨棍髓等)至少三个售采样时间炮点,反裤映其动力布学规律。组织分布5.除提供券试验数截据外,悬应分械析组织脱/血中鱼药物浓食度的比等值。6.特别注历意药物鲜浓度高扣、蓄积怒时间长予及在靶共器官的删组织分较布.7.采用同位俩素示踪法钳时,尽可能框提供给精药后不秒同时相蚁的整体判放射自腥显影图绕像.药物的血班浆蛋白结砖合率试验采用透析持法,超扮滤法等。高,中心,低三统种药物浓胸度,应截接近体内锹浓度。两种动物坐和人血浆谦。A199熔8的蛋白结阻合率浓度(ug/m售l)大鼠人6炭66.梢04±笛9.8源97.针54±弯1.7绿88燃75.影83±叼2.8板93.朴15±塑8.3置210醋77.9肝4±3.柿73伟97笋.93±赴1.94药物排暴泄试验目的：崇探讨插药物排颤泄途径,排泄总量,排泄高疮峰,排泄终饼点的规雄律和特券点。大鼠,烘一种遍有效剂喘量内容:闹粪便,游尿和胆汁宿排泄试验主要排返泄途径熊、排泄浩速率和竞排泄量(至药物排哥泄结束为蛮止)。注意原形挑药排泄累李积总量占叉剂量的百拣分比,毅物料平衡悉问题。是否存港在肝肠古循环,摇胃肠舍循环等盛现象。药物生烧物转化驰(代谢作)如原形药冬在体内生近成大量具僻有药理活示性代谢物,并其排狭泄总量<50凤%时,则应进行初初步药物碑代谢试验代谢部位陆。代谢途径缩慧和药物代旋谢酶。主要代庄谢物M1,启M2,陆M3….婶.等。如为前煎药,租要确定尼主要代患谢物的痒化学结索构,柜代谢物做合成,璃药理舍活性和PK试验。药酶诱辫导和抑肌制作用测定药焰物对肝款微粒中P45翼0总量的徐影响.肝微粒率体酶促帽动力学振试验(墙应用巳露知被CYP季1A2矮,2霞C9,樱2匹C19添,爆2D6和3A4等药酶催带化的药物验进行试验告)或药容酶抗体反趟应试验,研究:*药物收代谢酶鸟。*药酶诱锣导作用。*药物抑炕制作用。CYP典型底援物Km舰IC50Ki1A2非那西丁54芹1000薄51钉9.22A6双香豆蒙素0.3驼4滨100孤0裙25贯3.72C9甲苯磺甲丁脲120产53前2葵2宜90.22C19煮S-美芬妥乔英36.飘1腊1薄000促419饿.32D6异喹胍57.5优*裤5著3.3膏*丧39蓬.9*2E1氯唑沙铸宗30.4堆146请55.23A4红霉素55.李8*吹5涨6.5料*搂39引.1*药酶诱导鸣作用和抑翼制作用讨论和结套论除试验结判果小结外,应结合哪药效学攻和毒理怜进行分蓝析讨论.如:吸收规律,BA。消除动蚂力学规汤律。性别,进食及寒用药持缝续时间饶对药代靠的影响款。药物蛋左白结合慎率、组若织分布怠亲和力拦和药效,毒性的相愈关性。排泄和吸呆收的平衡,蓄积性炒。代谢特点,和药效,毒性相关爬性,相互作牌用等。新药、舱新制剂屈的生物妇利用度/生物等效皮性试验研禁究*生物利用母度(Bioa忽vail滚abil救ity,严BA)是以药旋物浓度日-时间驳曲线下构面积(AUC激)为基础得,反逼映药物啊在体内叙的吸收勒程度和劈燕速度.绝对生物锯利用度:F=A惜UCp历o/A猎UCi桃v×1退00%相对生物星利用度:F=AU轨C(试验制剂污)/AUC(参比制区剂)×击100暮%*生物等效牌性(Bioe腿quiv婶alan粮cy,B炎E)是指一种咐药物的不滥同制剂在腊相同的实肿验条件下先,其体吧内吸收程伴度和速度版无显著性泼差异.BA和BE的意义甘和应用确定新愚药的给帅药途径.确定新岁药的剂集型(包括处方躬的筛选).新剂型,特殊剂伐型的研愤究(缓、控释惰制剂,脂质体巧制剂等).仿制制剂搭的研制(制剂工规艺,药物粒径筋等).不同条愉件下,同一药躁物在体在内吸收耳程度和盛速度的晴比较,说明各旋种因素吐对药物森吸收和幻玉血药浓俘度的影贩响,以指导临忽床用药.如进食,食物,疾病,药物相互绳作用等.生物利用城度试验--临床前(动物)生物利用识度试(生物药康剂学)血药浓度稳检测方法坑同前。受试对象伶:动物悔-Beag玻le犬(>露6只)奇,大宗鼠等。3.药物制剂正:受试伍制剂-研嘱究的制剂琴。4.参比制剂猾-巳批准拨上市的主悔导药物剂在型。5.试验设库计:体通常采病用两制钢剂双周灿期交叉梨试验(斯二种制遍剂)或贼3×3丹拉丁方钟试验设侮计(三捞种制剂素)。剂量:一般应用辈有效剂量.不同剂型(制剂)和研皂究目的,试验内元容要求笛不同:*普通俩制剂:单剂量悬给药交漂叉试验好。*特殊剂久型,缓,控释制剂:单剂量或就多剂量给北药交叉试恢验。第1周期第2周期A组

testreferenceB组

referencetest其间清洗期约1-2周药代参瞒数估算单剂量试语验主要药想代参数:磁用房室庙模型或非亚房室模型领求药代参忧数,但侄其中a)A君UCo-t以梯形法激计算。b)闭AUCo-∞按下式计简算:AUCo-∞=AU夸Co-t+Ct/λz2.t为最后亭一次采蜂血时间怖;Ct为末次梦的药物璃浓度,λz为药-蒜时曲线剂末端部寒份求得仙的消除宪速率常孩数.3.Cmax和Tmax以实测值萌表示。4.生物利用骨度:F%=罪AUCT/AUCR×10穷0%多剂量生早物利用度佛试验主要虑药代参数*三次谷浓品度(Cmin)、Tmax、t1/2、A戴UCs柜s和F值.*C腿av=命AU费Css甜/τ女(用药间刻隔时间链)*D灾F=Cmax-Cmin/Cav街×100绣%生物等诞效性评删价1.主要对Cmax,Tmax及AUC三个参数哲进行统计葡学处理,纸评价生决物等效性梳.2.Cmax和AUC对数转换,以校正求其对称纸性.3.用多因笨素方差碑分析(AN转OVA鲁)进行显著雄性检验.4.用双单侧t检验和害计算90%可信区对间.5.试验制剂Cmax的90累%可信篇限在7扯0-1兵43%维范围内.AUC的90%趣可信限在勉80-1钞25%范纹围内.Tmax经非参数甘法检验.生物等效狭性分析和狂评价1.与研究的跃目的相关:*仿制演药:则糊两制剂告应生