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文档简介

临床微生物标本的采集与运送微生物检验的重要性在医学高度发展,新的抗菌药物不断涌现的今天,感染性疾病的发病率和病死率仍然居高不下。主要原因之一是当代的感染性疾病,在病原上发生了较大的变化,形成了现代感染性疾病在病原学上的新特点现代感染性疾病的新特点以条件致病菌为主:很多低致病、弱毒的细菌,在外环境、人体体表以及与外界相通的腔道中广泛存在的细菌,引起感染甚至造成严重后果的现象日益增多。病原菌的种类更为广泛:包括需氧菌、厌氧菌、苛氧菌、分枝杆菌和真菌等。细菌的耐药性不断增强:同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同,甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌,往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。现代感染性疾病的新特点出现一些新的感染性病原:有人统计,20世纪后期,全世界一共出现种31种新的传染病,其中病毒14种,细菌11种,寄生物6种,由于人们的认识不足,缺乏有效的预防、治疗办法,人群又无免疫力,这些新出现的病菌在不同的地区和范围内流行,来势猛,传播快,造成巨大的损失和社会恐慌。例如:疯牛病、埃博拉出血热、新型肝炎病毒、大肠杆菌O157、出血性肠炎、O139霍乱、艾滋病、莱姆病等。现代感染性疾病的新特点

我们应该追求:

“准确的病原学诊断”

“针对性病原学治疗”

正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学诊断的前提!

微生物让人类步步为营,检验误差发生率哪个阶段最高?60%以上实验误差发生在分析前

1997年,一位意大利著名检验专家就对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示,约有68.2%的检验误差发生在检验前期,而来自于检验中期和检验后期的误差率分别为13.3%和18.5%。

2007年,这位检验专家又进行了类似统计,结果显示,检验前期的误差发生率仍高达61.9%。摘自:分析前质量控制获得准确结果的重要环节基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的如何提高细菌阳性检出率?标本采集时机标本采集方法标本的质与量标本的运送与保存镜检筛选合格标本(退检制度)高质量、多种分离培养基培养环境常见不合格标本主要有以下问题:

标本采集时间错误容器错误标本量不足标本采集延误标本未及时正确运送以及暂存条件错误。。。。。。。

最有价值的细菌学检测项目血液培养脑脊液培养胆汁培养胸腹水培养关节液其他无菌体液或分泌液血培养标本采集与运送血培养是进行血流感诊断的最佳手段血培养概念:采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物实验室培养检测.检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在.如有细菌,则极有可能为致病的细菌.进一步进行鉴定/药敏试验.完整的血培养过程医师开出医嘱护理人员收集送检样本实验室检测、分离并鉴定导致血流感染的微生物三级报告:为临床医生提供抗菌药物敏感性试验结果目前血培养的问题:采血时机不合适采血套数不够采血量不足只做需氧培养,不同时做厌氧培养采血前或采血时正在使用抗生素治疗血流感染与血培养的规范实践“只有在发热时,才需要进行血培养。”————关于血培养指征想采就采?答案草:血培挡养的指年征当怀疑专血流感拘染或脓六毒症时挡,应常训规行血衬培养怀疑患坝者有血里流感染亩的症状围有:不明原堂因的发碧烧(>38℃)或体温厌过低(<36℃)白细胞增寨多(>10,0需00/u形l),粒降细胞减甜少(赠<1,00帜0ul)休克,寒训颤,僵直严重的衡局部感扁染(脑膜炎,暖心内膜炎军,肺炎,抗肾盂肾炎赶,腹部术尺后感染,…)心率异俘常加快低血压或谦高血压呼吸频跑率加快“何时采洋血进行血哥培养,无买特殊时间和要求。”———关于采血确时机?03060时间(分钟)体温血培养支采血时蜜机细菌浓工度答案福:采集第血培养配样本的旨最佳时危间尽可能郑在患者信寒战或环开始发菜热时采用血在患者舟接受抗敢生素治絮疗前采长血如患者名已经应削用抗菌准药物进剩行治疗威,应在负下一次德用药之蝴前采血妖培养“为减轻长患者痛苦确,只从一旷个穿刺部滴位采一份宪血液标本界即可。”———关于采弃血套数漆及部位?基本概念成人“吸一套”姜血培忌养应该垮包括需树氧瓶和节厌氧瓶浊各一个掩,也叫物“一份校”注意:枪一次穿倚刺采血仿,算“熄一套”畅,采集驰第二套热应从另渔一个穿殊刺点获慰得。儿童一委般只做仙需氧培巧养,但花仍需从叉多个部般位采集遍多次。滑特殊患轨者才考奔虑厌氧额培养。采血套数Wei瓜nst骄ein瞎et仁al桌.D节ete俯cti察on尸of披Blo盒ods拴tre艰am托Inf狮ect低ion疮si车nA晶dul始ts:东Ho旋wM鬼anyBlo笔odC嗓ult俩ure凑sA香re壶Nee饥ded新J即Cli宫nM卵icr喝obi育ol.按20严07;唯45精:35客46-泳354制8表皮葡萄胞球菌的临植床意义2-3套血培养步,有助于绪污染的判惑断。Tok崇ars止,J汇I.眨Cli逮nI盯nfe油ct动Dis睁20消04;槽39要:33葬3污染菌致病菌?采集1套无法铲判断是定病原菌织还是污先染菌。答案亏:关威于血培烟养套数线与采血骨部位每位患者昏每次采血犹最少2套,3套更好初发患占者,绝击不能只澡采1套标本多个穿刺席部位采血扒。因多部我位同时发生污染的搬几率较小紧,便于对渴结果进判氧断“两套舅血培养壤采集间昨隔无特帮殊要求叮。”———关于采血校间隔?答案:国关于标删本采集涝间隔时泛间对于非熄持续性湖菌血症公,同时汪或短时料间内采英集2-3套血培并养,因欣为体内剩巨噬细债胞吞噬富系统会映在15~30m这in内清除掉惰进入人体悠内的细菌辰。可疑急泰性心内沙膜炎患享者要立仅即取血疗作血培朝养,30分钟内欧完成3套血培养马的采集,键采集后立岸即进行抗旷菌药的经宽验治疗。糊如果24小时内玩报告阴垫性,则猴继续采希集2套血培养栏。可疑的特亚急性林心内膜惯炎患者庸每间隔30分钟至1h采集1套,连续破采集3套标本。抵如果24小时内报测告阴性,浴则继续采衔集2套血培哭养。“每瓶浮采集多检少血液饶无特殊严要求。敏”———关于采血果量?采血量(ml岸)与检出率饶的关系Over粗all血培养兰物每增累加一毫辆升,真饶性菌血肠症成年人微醒生物的检写出率增加3%但并非越化多越好,戚超过一定寻数量的采世血量会稀愉释培养瓶累内的肉汤底,使肉汤谦无法有效码中和血中辛的抑制物扔质(补体擦、抗体、街抗生素)所。所以血诱液与肉汤边的最佳比来例为1:4-1:10答案:槽关于采集烈血液量采血量是侦影响灵敏划度最关键衫因素成人一份抹标本2个培养山瓶(需忠氧+厌港氧),百每瓶8-10ml,共20m妨l;要求至越少采两份漫标本,即40m委l。儿童一贿般只需惩采集需曾氧瓶,孔在保证较采集血术量<1%总血旷量下,芹一般为1-3ml采血量炊不足时减应优先暴保证需蜘氧瓶,及因临床90%以上稳的感染虹为需氧错菌或兼怖性需氧刑菌感染先采生化助、凝血标命本,再采掩血培养标呀本。”———关于各种血果液标本涨的采集畅顺序?血培养筹对无菌客操作的角要求比浅注射、词采集生爬化、凝睁血等其贡它标本怨要高。所以要为最先采罩集血培坟养标本宵。污染率撒的指标繁是<3%(100份标本里总只能有不捞到3个标本出阔现污染。歉)答案:采网各种血液由标本的先称后顺序“消毒的敏重点是足刚够量的消闻毒剂。”———关于皮判肤及培勒养瓶消蚕毒?皮肤消高毒程序勾:推荐使用输碘町、洗轨必泰或碘颗伏作为皮版肤消毒剂垄。碘町作皆用1mi倡n碘伏作耕用1.5-占2min洗必泰作染用时间与荷碘町一样唐(但不能霉用于少于2个月婴儿锻皮肤消毒享)培养瓶的氏消毒程序担:去掉培养庄瓶口的塑损料瓶盖。75%酒精消毒钳血培养瓶贫橡皮塞子60秒。自然待干。将标本注水入培养瓶馋内。5.颠倒混匀诵标本与肉而汤,以避祥免血液粮凝集。“培养衡瓶未使恢用时,贱需要冷豪藏或冷酒冻。”———关于培养瓶阴的储存寒温度?不需冷液藏,更丧不能冷朽冻。保谎存在15-25℃的室温惯即可,游温度过色低会导听致对温贤度敏感年的耐瑟雪氏菌等皆死亡。答案:关越于未用培未养瓶的储郑存温度“加入标侮本后的培毅养瓶夜班叨未能及时另送到检验沈科,可以梅冷藏或放斩入35℃的温箱。楚”———关于夜班血苏培养的欢送检?培养瓶概夜班未伶能及时搬送到检懂验科,存在室帝温即可富,不能民冷藏也选不能放律入35℃的温箱唐。过夜不霉会对检耻测造成蚂影响,层但仍需给尽快送塘检。冷铜藏可能望导致对揪温度敏赔感的耐店瑟氏菌柏等死亡气。温箱棍会导致俊细菌进脏入生长阔对数期俘,从而府错过检棋测的最本佳时期妨。答案:或关于夜跃班血培蠢养的送符检“患者静巨脉中插有煮导管,可禾直接从导编管采血。册”———关于采血部矿位?不可以,常规开血培养纵不宜从课静脉导甘管或静浩脉留置寇装置中相采集,擦检出污税染或定刃植菌的肥可能性锡较大。阔除非怀惠疑导管脚相关性泰血流感哨染,请温参照导尼管相关浴性血流运感染的麻采血方缝法。答案:帐关于从阔静脉留泪置装置帝直接采旷血血培养鸣标本的桃拒收瓶子上烤帖的标扁签错误鼻或未帖镜标签。血培养瓶丑打破的、很损坏的或幸渗漏。血液凝固拼。培养基的希选择推荐使用犹商品化的庙培养基使用添加础抗菌药物研吸附剂的拼血培养瓶歇有助于提谣高已接受循抗菌药物斗治疗患者秆血培养的具检出率,状增加细菌那的分离率回和分离速步度,但同尾时也会增榨加污染菌挪的检出率姓。上呼吸道够标本上呼吸鸡道感染泰:绝大部分步呼吸道感咏染局限于口咽、鼻柄咽和鼻腔部位;导致咽痛、拐鼻涕、魔常常会蹈发热。阶感染喉示部、中芝耳、鼻唉窦炎、腔结膜炎刷或角膜她炎。可能与确严重疾走病百日族咳、流正行性感绪冒、麻待疹和传小染性单庆核细胞孟增多症斑并存。不同的采盐样拭子豪对标本的校检测结果酬有影响吗??棉+木棍抑菌区域娱的产生由岭于棉中所背含的脂肪说酸以及从雄木棒中渗晋出的树脂平和甲醛。咽拭子缩慧运送培寒养基可以运送转需氧、厌掌氧、苛养席菌4℃或RT24或48小时建议用于要病原菌培养而不是涂僻片的标本乞送检。痰培养拉标本采集与眼运送病原体就种类繁随多而复涝杂使下呼琴吸道感武染病原纹诊断成齿为难题细菌(包市括放线菌熟与奴卡菌赴,厌氧菌愤与分枝杆吸菌)真菌(包形括肺孢子数菌)病毒支原体、素衣原体与坛立克次体原虫寄生虫咳痰途经刊口咽部唾液中口料咽部定植柔菌的浓度三可达108-109/ml。研究显狱示,国雕内常规翅痰标本暂中约半屯数存在占唾液严掀重污染社现象。不可避矩免地受用到污染我国痰细起菌培养现汁状标本送躺检率低苛养菌检窃出率极低结果重床复性差报告速撞度慢感染菌与幅污染菌不钥易区分药敏结伶果与治抖疗反应挣存在差进距下呼吸道点感染病原葱学诊断注娃意事项痰标本亦的正确轧采集(界包括导哲痰)痰标本负及时运诉送和处侧理的重嗓要性痰标本的满洗涤与匀浑化痰涂片旨:质量管评估和姨细菌、浮真菌初凳步报告接种平板浇:质量与哲质控,血有、巧克力参、麦康凯倒、沙保弱培养环贷境:CO2培养时间金:24h,48h菌落观灯察要点结果报告当:所有菌食种(群)荣,包括半戏定量临床意恳义判定其他病原长体的检测煮:结核、联真菌、厌幸氧菌、非像典型病原茄体下呼吸道甜感染病原伤学诊断注酬意事项咳痰标本类的采集标本采集多方法医师或矮护士直维视下采博集标本病人先漱充口,去除赵表面的菌共群教育病率人深咳王,收集缠从下呼份吸道咳购出的痰宣液临床上约扩半数咳痰参标本不合杏格!关于咳痰泡标本在抗生必素应用限前采集品痰标本;标本采集别后1~2h内必须宋立即进改行实验伯室处理咳痰标本予应用最早袖且广泛,绣但也是最含受争议的薪标本取标本前辛应摘去牙驻托,清洁质口腔如刷制牙和漱口深咳,耍采集标鼻本过程施中要有窝专业的筹医务人键员指导无痰可膊用3%~5%NaC涛l5跪ml雾吸约5mi故n导痰也可用耀物理疗舟法、体隆位引流踢、鼻导向管抽吸铲等法取磁痰5种筛选加标准判嫁断140诉01份痰标滤本合格崭率比较

合格不合格不能归类

标本数率%标本数率%标本数率%标准1474033.9925366.1*80.1标准2358325.611097.9*930966.5标准3483234.5916965.5--标准4911565.1488634.9--标准5637845.6762354.4--注:标党准2:卫生部拥医政局《全国临叔床检验姥操作规饼程》咳痰标飘本不合魔格,退贩检吗?如果低倍箱视野下鳞虽状上皮细技胞大于25个,白细篮胞小于10个,应版不做或置仅在特捆殊要求劲时做培壳养。如做培养贼,报告中猫注明“镜侄检结果表之明标本口乎咽分泌物们污染明显矮”。几种下呼城吸道直接服采集的标惜本经气管穿驴刺吸引(tra出nst性rac康hea烤la猴spi伶rat谊ion鸽,TT产A)经胸壁释针刺吸节引(tra男nst词hor隶aci逗cn姓eed团le姥asp低ira座tio番n,车TNA)经支气管梳镜采样支气管遍肺泡灌监洗(bron替choa伴lveo钻lar屋lava陈ge,劫BAL)经支气携管镜直卡接吸引防污染样激本毛刷(pro恒tec掏tiv晨es伞pec倘ime剧nb呜rus喝h,须PSB)开胸肺马活检(ope坛n-l蛮ung兰bi练ops询y,OLB)经人工气鹊道吸引分恳泌物(endo锋trac柿heal史asp勾irat默es,ETA)痰培养严的送检棕次数对于普等通细菌券性肺炎荒,痰标本悦送检每贼天1次,连续2~3天。不建议24h内多次冠采集,祸除非痰劲液外观须性状出态现改变亭;怀疑分犬枝杆菌只感染者雷,应连遵续收集3天清晨桨痰液送窗检;怀疑军纲团菌或枪深部真授菌感染冒,痰标层本理想唐的送检喊次数尚涨无定论森。痰培养睁的运送伙和保存尽快(<2h)送至实壤验室。如不能慨及时送油达,应秩将标本区暂存于4℃,但放秧置时间违不可超丸过24h。厌氧培养楼标本的最埋佳运送时剧间取决于钓标本量。被口咽叮部菌群逆污染的世标本如低咳痰等赠不可用裕于厌氧观菌培养拣。痰培养的臭拒收光学显微妥镜细胞学浸检查发现链口咽分泌桂物污染明赢显。没有标签糟或贴错标掉签。运送容贵器选择奸不当或醉有渗漏白。标本采待集不符窝合要求烘。同一天同议一试验重才复送检2次。延时送鱼至实验液室的标赠本。尿培养珠标本采集与运执送你知道吗凤?尿液通常搁是无菌的姥或一过性裤有少量微隔生物,但堵是尿道内槽或尿道周狭围皮肤的强菌群会污特染尿液标描本,从而想可能导致着错误的培画养结果。诊断症状程明显的病席人(如尿言急、尿频础、尿痛)型,一份标父本就已足浇够,治疗48-虏72小时后再奴采集第二浮份标本。萌对于症状骡不明显的庆病人,需复采集2-3份标本锯。怀疑熄肾结核轿时,应僻连续3天采集菊晨尿。多次收族集或24小时尿不垮能用作培夕养。申请单上填必须注明博病人症状枣是否明显漫,这对于械定量培养沙分析非常馅重要,尤扁其只有少协量尿液标拦本。室温都村有利于蛛病原菌离和污染政菌会生联长繁殖赖,因此容若30mi脉n内不能奴及时培贝养尿液含则必须序冷藏,亭但也不佣能超过24小时。尿培养标回本清洁中段无尿导尿导管川尿经耻骨上众皮肤穿刺爹采集膀胱佣内尿液送检标本段以晨起第他一次尿液徒为佳不能立即猎送检者,鸟可暂存4℃冰箱,坦但保存厚不超过8h清洁中刃段尿液尽量取早椅晨第一次毛尿液弃去开始趴流出的尿乔液,以冲衬刷尿道口吧的细菌,蔽取能代表村膀胱部位松病原菌的朴中段尿详细告量知病人削以下操牙作步骤女性病睬

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