Eppendorf蛋白质核酸自动分析仪操作说明与注意事项

Eppendorf蛋白质核酸自动分析仪操作说明与注意事项Eppendorf蛋白质核酸自动分析仪操作说明与注意事项操作说明：准备：开始测定前只需开启仪器背后的电源开关即可开始测定。一、核酸浓度测定（包括dsDNA、ssDNA、RNA、Oligo）1.例如待测定样品为dsDNA（eg：PCR产物），按下键“7/dsDNA”（若待测样品为ssDNA，eg：反转录合成的第一链cDNA产物，则相应按下键“8/ssDNA若待测样品为RNA，则按下键“9/RNA”；若待测样品为Oligo（寡聚核苷酸），eg：PCR引物，则相应按下键“6/Oligo”。）2.若测定样品需要稀释后测定，则需先设定样品的稀释度：（1）按下键“Dilution”；（2）输入样品体积和稀释液体积，按Enter键确认。将空白对照置入样品孔。注意：空白对照是空白液，并非所有情况都是水。（例如用Tris溶液溶解DNA制品，则要用Tris液做空白对照。）3.按下键“Blank”；4.仪器记录空白对照，设置为0.000A；(先不取出对照，按下Sample，看是否调零成功，若成功则可开始测样品)5.将第一个样品置入样品孔；6.按下“Sample”；7.仪器显示第一个样品的相关参数（记下样品浓度，OD260，OD280，OD260/OD280）8.直接放入第二个样品；9.按下“Sample”；10.仪器显示第二个样品的吸光度值和浓度值，以及其他相关参考比值；11.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果的方法如下：（1）按下键“./Function”（2）选择“DISPLAY-RESULT”,按Enter键，查看每个样品的测定值记录（本机可存储100个样品的测定值）。二、OD600细菌生长密度测定1.按下键“5/OD600”；2.将空白对照置入样品孔；3.按下键“Blank”；4.仪器记录空白对照，设置为0.000A；5.将第一个样品置入样品孔；6.按下“Sample”；7.仪器显示第一个样品的吸光度值和浓度值；8.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果。三、蛋白质浓度的直接测定（280nm测定）1.按下键“4/Protein”；2.将空白对照置入样品孔；3.按下键“Blank”；4.仪器记录空白对照，设置为0.000A；5.将第一个样品置入样品孔；6.按下“Sample”；7.仪器显示第一个样品的吸光度值和浓度值，以及其他相关参考比值；8.依次测定，每个样品的测定值将自动存储在机器中，可查看测定结果。四、蛋白质浓度显色法的间接测定（Bradford，Lowry，BCA）1.按下键“1/Bradbord”or“2/Lowry”or“BCA”选择蛋白质显色反应的方法；注：Bradford键按两次，每次显示不同的测定范围。2.设置标准曲线的标准样品数量、测定次数和浓度范围。按下键“Parameter”用上下键进行选择和参数调整。3.将空白对照置入样品孔；4.按下键“Blank”；5.仪器记录空白对照，设置为0.000A；6.将第一个标准品或样品（如需沿用已存储的标准曲线，可直接测样品）置入样品孔；7.按下“Sample”或“Standard”；8.依次测定标准品或样品，每个样品的测定值将自动存储在机器中，查看测定结果。五、注意事项：1为了尽量减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1－1.5A。在此范围内颗粒的干扰相对较小，结果稳定。样品的浓度不能过低或者过高。2混合要充分，否则吸光值太低，甚至出现负值；3混合液中不能有气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；4必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，