微生物的培养技术及应用

【课标要求】

第十单元 生物技术与工程第1课 微生物的培育技术及应用说明在发酵工程中灭菌是获得纯洁的微生物培育物的前提。说明无菌技术是在操作过程中,保持无菌物品与无菌区域不被微生物污染的技术。举例说明通过调整培育基的配方可有目的地培育某种微生物。概述平板划线法和稀释涂布平板法是试验室中进展微生物分别和纯化的常用方法。概述稀释涂布平板法和显微镜计数法是测定微生物数量的常用方法。【素养目标】把握培育基的成分及其作用,比较平板划线法和稀释涂布平板法的异同;把握无菌技术及微生物的纯培育。(科学思维)设计试验探究微生物培育的条件,利用选择培育基分别细菌,运用相关技术解决生产中有关微生物的计数。(科学探究)关注有害微生物的掌握及宣传安康生活等。(生命观念、社会责任)一、微生物的培育技术培育基的配制:概念按物理性质种类按用途成分 主要成分

人们依据微生物对养分物质的不同需求,配制出供其生长生殖的养分基质液体培育基固体培育基选择培育基鉴别培育基水、碳源、氮源和无机盐-1-特别的培育成分pH、特别养分物质以及特别的培育成分pH、特别养分物质以及O等2(1)概念:在培育微生物的操作中,全部防止杂菌污染的方法。(2)关键:防止杂菌污染。比较工程消毒灭菌作用强度较为温顺的物理、化学、生物 猛烈的理化因素因素作用程度杀死物体外表或内部的局部微 比较工程消毒灭菌作用强度较为温顺的物理、化学、生物 猛烈的理化因素因素作用程度杀死物体外表或内部的局部微 杀死物体内外全部的微生物生物芽孢和孢子 一般不能杀灭能杀灭适用对象操作空间、活体生物材料、操 接种用具培育器皿培育基常用方法作者的衣着和双手 等煮沸消毒法、巴氏消毒法、化 湿热灭菌法干热灭菌法灼学药物消毒法、紫外线消毒法 烧灭菌法(5)常见灭菌方法在操作中的留意事项:灭菌方法灭菌方法物品摆放法不能太挤,以留意事项取物 特别要求降至70℃以下后取灭菌物品不要与干热灭菌出:①防止烫伤;②防止箱内壁铁板接触,以防包装玻璃器皿炸裂 纸烤焦起火让温度自然下降,当压湿热灭菌或蒸汽流通法免影响热空气力表压力降为零时翻开排出后,才能密闭升温升压,肯定要将锅内冷空气彻底排气阀:防止锅内压力突然下降,灭菌容器内液体冲出容器,造成污染否则,可能导致锅内压力虽到达设定值而温度还达不到要求-2-灼烧灭菌接种环接种针等金属用具,直接在酒精灯火焰的充分燃烧层(即外法 焰)灼烧,并冷却后使用微生物的纯培育:概念:由单一个体生殖所获得的微生物群体称为纯培育物,获得纯培育物的过程就是纯培育。步骤:配制培育基、灭菌、接种、分别和培育等。(3)酵母菌的纯培育。①菌落的概念:由分散的微生物生殖而来的肉眼可见的、有肯定形态构造的子细胞群体。②接种方法:最常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。③步骤:制备培育基、接种和分别酵母菌、培育酵母菌。,有时还需要参加一些特别的物质。(√)消毒的原则是既杀死材料外表的微生物,又削减消毒剂对细胞的损害。(√)(×)分析:接种环经火焰灭菌后应先冷却,防止杀死菌种。平板划线法中每一次划线后都要将接种环灼烧。(√)需要将一个不接种的培育基放在一样的条件下培育,以检验培育基的灭菌是否合格。(√)二、微生物的选择培育和计数微生物筛选的原理:人为供给有利于目的菌生长的条件(包括养分、温度、pH等),同时抑制或阻挡其他微生物的生长,即依据不同微生物的特别养分要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备培育基。选择培育基:概念:在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻挡其他种类微生物生长的培育基,称为选择培育基。-3-:筛选土壤中分解尿素的细菌的选择培育基是以尿素为唯一氮源,按物理性质归类为固体培育基。筛选方法:稀释涂布平板法:将菌液进展一系列的梯度稀释后,将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培育基外表,进展培育。系列稀释操作。,1~2cm下::图示 操作0.1mL菌液,滴加到培育基外表将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进展涂布用涂布器将菌液均匀地涂布在培育基外表。涂布时可转动培育皿,使涂布均匀培育:待涂布的菌液被培育基吸取后,将平板倒置,30~37℃的恒温培育箱1~2d。微生物的数量测定:间接计数法(活菌计数法)。-4-①计数原理:培育基外表生长的一个单菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。所以统计结果一般用菌落数代表活菌数。②计数标准:30~300的平板进展计数。③计数方法:24h统计一次菌落数目,选取菌落数目稳定时的记录作为结果,这样可以防止因培育时间缺乏而导致遗漏菌落的数目。在同一稀释度下,至少应3个平板进展重复计数,然后求出平均值。④计算公式:⑤计数误差:当两个或多个细胞连在一起时,平板上观看到的只是一个菌落,所以计数结果一般比实际活菌数目少。显微镜直接计数法。①计数原理:利用特定的细菌计数板或血细胞计数板,,然后再计算肯定体积的样品中微生物的数量。②计算公式:每毫升原液所含细菌数=每小格内平均细菌数×400×104×稀释倍数。③优点:是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法。④缺点:统计的结果一般是死菌数和活菌数的总和。探究·实践:土壤中分解尿素的细菌的分别与计数筛选能分解尿素的细菌所利用的培育基中,尿素是唯一的氮源。(√)选择培育基可以鉴定某种微生物的种类。(×)分析:选择培育基可以选择某种微生物,鉴别培育基可以鉴定某种微生物的种类。在查找目的菌株时,要依据它对生存环境的要求,到相应环境中去查找。(√)-5-只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。(√)分析:脲酶是催化尿素分解的特异性水解酶,只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。拓展填写:微生物是难以用肉眼观看的微小生物的统称,包括细菌、真菌、病毒及一些原生生物等。探究延长:无菌技术除用来防止试验室的培育物被其他外来微生物污染外,还有什么作用?提示:无菌技术还能有效避开操作者自身被微生物感染。探究延长:平板划线时最终一次划线不能与第一次划线相连,缘由是什么?提示:最终一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞,假设与第一次划线相连,则增加了细菌的数目,得不到纯化的效果。试验变式:利用稀释涂布平板法纯化分解尿素的细菌时,经培育后觉察培育基上消灭多种菌落,可能的缘由有哪些?提示:消灭杂菌污染的可能缘由有:培育基制备过程中被杂菌污染;接种过程中,无菌操作不符合要求;系列稀释时,无菌操作不符合要求等。★考点1 微生物的根本培育技术培育基中成分的含义、作用和主要来源(比较、归纳):养分要素 含义 作用

主要来源无机碳源:NaHCO、CO3 构成生物体细胞的 等3 碳源 能供给所需碳 物质和一些代谢产元素的物质 物,有些是异养生物的能源物质

有机碳源:和蛋白胨等能供给所需氮 合成蛋白质核酸以无机氮源:NH铵盐硝3氮源 元素的物质 及含氮的代谢产物 酸盐等;3-6-生长因子生长因子(特别生长必不行少养分物质)的微量有机物水—酶和核酸的组成成分不仅是优良的溶剂,而且可维持生物大分子构造的稳定有机氮源:蛋白胨等组织提取液等等为微生物供给细胞内的组成成分;无机盐生理调整物质;某些外的各种重要培育基、大气等环境元素,包括某些酶的激活剂化能自养菌的能源;大量元素比较工程 平板划线法关键操作 接种环在固体平板培育基表比较工程 平板划线法关键操作 接种环在固体平板培育基表面连续划线稀释涂布平板法①一系列的梯度稀释②涂布平板法操作留意事项每次划线前后均需灼烧接种稀释度要足够高,为确保试验环成功可以增加稀释度的范围菌体猎取在具有显著菌落特征的区域从适宜稀释度的平板上的菌的菌落中挑取菌体落中挑取菌体优点可以依据菌落的特点获得某既可以获得单细胞菌落,又能缺点种微生物的单细胞菌落不能对微生物计数对微生物进展计数操作简单,需要涂布多个平板平板划线操作中几次灼烧接种环的目的:工程工程第一次划线前灼其次次及之后烧每次划线前灼烧划线完毕灼烧-7-避开接种环上可目的 能存在的微生物污染培育物【高考警示钟】

杀死上次划线完毕后杀死接种环上残留接种环上残留的菌种,的菌种,避开微生物使下次划线的菌种均污染环境和感染操来自上次划线的末端作者培育物、纯培育物、纯培育辨析(多项选择)(2023·南京模拟)化工厂污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A,争论人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素等配制的培育基,成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)试验的主要步骤如下图①。以下表达错误的选项是( )培育基中参加化合物A作为唯一碳源,目的是筛选目的菌试验培育过程中进展振荡培育,可使目的菌和培育液充分接触C.为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应马上快速挑取菌落D.将固体培育基得到的目的菌重复屡次上述试验的目的是获得大量菌种②【题眼破译】提升信息转化力量信息 转化信息(对接问题)流程图筛选到能高效降解化合物A的细菌流程-8-信息①培育基中参加化合物A作为唯一碳源,目的是筛选目的菌信息②将固体培育基得到的目的菌重复屡次上述试验的目的是对“纯化”【解析】选C、D。本试验的目的是“筛选到能高效降解化合物A的细菌”,因此培育基中参加化合物A作为唯一碳源,目的是筛选目的菌,A正确;试验培育过程中进展振荡培育,可使目的菌和培育液充分接触,B正确;为了防止污染,接种环经火焰灭菌后需要在火焰旁冷却后再挑取菌落,否则会导致高温使菌种死亡,C错误;在以化合物A为唯一碳源的培育基中只有能降解化合物A的微生物才能生长生殖,不能利用化合物A的微生物因缺乏碳源,无法生长生殖,将固体培育基得到的目的菌重复屡次上述试验的目的是对菌种“纯化”,D错误。1.(2023·南通模拟)在某病原菌均匀分布的平板上,铺设含有不同种抗生素的纸片后进展培育,在纸片四周会消灭透亮区域抑菌圈,可测定该病原菌对各种抗生素的敏感性。相关表达正确的选项是( )A.图中的接种方法可能为平板划线法或者稀释涂布平板法B.未消灭抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异C.形成的抑菌圈较小的缘由可能是微生物对药物较敏感D.不同抗生素在平板上的集中速度不同可能会对试验结果造成肯定影响【解析】选D。图示承受的接种方法是稀释涂布平板法,A错误;未消灭抑菌圈可能是病原菌对该抗生素不敏感,B错误;形成的抑菌圈较小的缘由可能是微生物对药物敏感程度较低,C错误;在平板上集中速度慢的抗生素,形成的透亮圈可能会比实际结果偏小,因此,不同抗生素在平板上的集中速度不同会对试验结果造成影响,D正确。2.(多项选择)随着原油泄漏危害的扩大,原油泄漏的治理也渐渐受到重视,治理原油泄漏可以承受微生物方法,该方法是通过一种嗜油菌“吃掉”环境中的烷烃、芳香烃等有害的致癌物质。土壤中有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源,在培育-9-基中形成分解圈。为筛选出能高效降解原油的菌株并投入除污,某科学兴趣小组的同学设计了相关试验,以下有关试验的表达,正确的选项是( )A.应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用B.配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培育基C.将土壤稀释液灭菌后接种到选择培育基上D.在选择培育基上能形成分解圈的即为所需菌种【解析】选A、B、D,首先是取材,应配制来源于被原油污染土壤的土壤稀释液备用,A正确;其次配制以多环芳烃为唯一碳源的选择培育基,B正确;然后进展接种,在无菌环境下,将土壤稀释液接种到选择培育基上,在适宜的条件下进展培育,假设将土壤稀释液进展灭菌,就不能筛选出能高效降解原油的菌株,C错误;在选择培育基上形成的菌落,假设该菌落四周有分解圈,即为所需菌种,D正确。【加固训练·拔高】(2023·全国Ⅰ卷)一种有机物X(CH两种元素)不易降解,会造成环境污染。某小组用三种培育基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。Ⅰ号培育基:在牛肉膏蛋白胨培育基中参加X(5g/L)。Ⅱ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(15g/L)。Ⅲ号培育基:氯化钠(5g/L),硝酸铵(3g/L),其他无机盐(适量),X(45g/L)。答复以下问题。在Ⅰ号培育基中,为微生物供给氮源的是 。Ⅱ、Ⅲ号培育基中为微生物供给碳源的有机物是 。假设将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培育基中,培育一段时间后,不能降解X的细菌比例会 ,其缘由是 。Ⅱ号培育基参加琼脂后可以制成固体培育基,假设要以该固体培育基培育目标菌并对菌落进展计数,接种时,应承受的方法是 。假设从Ⅲ号培育基中得到了能高效降解X的细菌,且该菌能将X代谢为丙酮酸,则在有氧条件下,丙酮酸可为该菌的生长供给 和 。【解析】此题考察微生物的培育与应用的相关学问。-10-氮源是微生物生长需要的一类养分物质,是含氮化合物,可为微生物的生长供给氮元素,,,因此在Ⅰ号培育基中,可为微生物供给氮源的是牛肉膏、蛋白胨。碳源也是微生物生长所需要的一类养分物质,可为微生物的生长供给碳元素,而有机物均含碳元素,ⅡⅢX,因此,ⅡⅢ号培育基为微生物的生长供给碳源的均为有机物X。由于Ⅱ号培育基含有的碳源只有有机物X,所以假设将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培育基中,培育一段时间后,不能降解X的细菌由于无法获得碳源而无法增殖导致比例下降。微生物的接种方法很多,最常用的有平板划线法与稀释涂布平板法,由于稀释涂布平板法中,稀释度足够高的菌液经涂布培育后,在培育基外表形成的一个菌落是由菌液中的一个活菌生殖而来,所以常用来进展微生物的计数。丙酮酸参与有氧呼吸的其次阶段,能被分解产生能量,且丙酮酸可作为很多物质合成的中间产物,所以它可为微生物的生长供给能量和合成其他物质的原料。答案:(1)牛肉膏蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖,而能降解X的细菌能够增殖 (3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料★考点2 微生物的选择培育和计数微生物的筛选方法(科学思维):方法 特点 举例利用养分缺陷型通过掌握培育基的养分选择培育基进展成分,使养分缺陷型微

缺乏氮源的培育基可筛选自生固氮微生物的选择培育利用某种化学物质进展的选择培育

生物不能正常生长在培育基中参加某种化学物质,抑制某些微生物,同时选择所需的微生物

参加青霉素的培育基可抑制细菌,分别出真菌-11-利用培育条件进展的选择培育

将培育基放在高温环境转变微生物的培育条件中培育,可分别出耐高温的微生物微生物的鉴别方法(科学探究):菌落特征鉴别法依据微生物在固体培育基外表形成的菌落的外形、大小、隆起程度和颜色等特征进展鉴别指示剂鉴别法如培育基中参加酚红指示剂,培育某种微生物后,培育基变红说明该种微生物能够分解尿素如利用刚果红染色法,依据培育基中消灭以纤维素染色鉴别法 分解菌为中心的透亮圈来筛选分解纤维素的微生物设置比照和重复试验(科学思维):目的

对 照排解非测试因素对试验结果的影响空白比照:确定培育基制作是否合格或被杂菌污染;

重 复排解偶然因素对试验结果的影响同一稀释度涂布至少3方法 用完全培育基与选择培育基比照,说明选择培育基具有选择作用”

个平板(1)微生物纯培育中倒平板时,培育皿盖不能完全翻开,以免杂菌污染培育基。(2)锥形瓶的瓶口必需通过酒精灯火焰,以防止瓶口的微生物污染培育基。【拓展延长】自养型与异养型微生物培育基的区分2自养型微生物所需的主要养分物质是无机盐,CO,氮源2也可由含氮无机盐供给。,即碳源必需由含碳有机物供给,氮源也主要是由含氮有机物供给的,局部异养型微生物也可以利用无机氮源。-12-(多项选择)某公司在冠疫情期间推出一款型免洗洗手凝胶,争论人员检测了凝胶洗手前后手部细菌的含量(如下图)()图示接种方法为平板划线法①前后细菌含量形成比照,无需空白比照C.该培育基类型为通用固体培育基D.不需用显微镜观看菌落的外形②,可以确定菌种类型【题眼破译】提升信息转化力量信息 转化信息(对接问题)信息①平板划线无法得知稀释倍数,不能用于活菌计数

由于不同种类的菌种形成的菌落形态特征不同,且菌落肉眼可见【解析】选C、D。平板划线无法得知稀释倍数,不能用于活菌计数,故统计洗手前后手部细菌的数量,选择的接种方法是稀释涂布平板法,A错误;除图中操作外,还需要设置一组未接种的空白培育基进展培育,验证培育基是否被杂菌污染,B错误;该培育基类型为通用固体培育基,C正确;由于不同种类的菌种形成的菌落形态特征不同,且菌落肉眼可见,故初步推断培育基上菌种的类型,可用肉眼观看菌落的形态特征,D正确。【深度思考】某同学在纯化土壤中的细菌时,觉察培育基上的菌落连成了一片,最可能的缘由是什么?应当怎样操作才可避开此种现象?提示:最可能的缘由是菌液浓度过高或划线时在下一次划线前未将接种环灼烧灭菌实行的措施是增大稀释倍数或每次划线前先将接种环灼烧灭菌。1.(2023·泰州模拟)现有两种固体培育基,其配制时所加的成分如表所示,用这两种培育基分别去分别土壤中的两种微生物,它们适于分别的是( )-13-含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%0.6%2%含量0.02%0.02%0.02%0.01%0.5%--成分KHSOMgSO成分KHSOMgSO·47HO4NaClNaSO·CaCO2242HO23葡萄糖纯淀粉甲培养基甲培育基适于分别异养型自生固氮菌,乙培育基适于分别自养型自生固氮菌C.甲培育基适于分别自养型自生固氮菌,乙培育基适于分别异养型自生固氮菌D.甲培育基适于分别异养型共生细菌,乙培育基适于分别异养型共生固氮菌【解析】选B。固氮菌中能独立生存的是自生固氮菌,甲培育基中含有葡萄糖和淀粉,可以作为碳源,由此推出该培育基适于分别异养型的自生固氮菌;乙培育基中不含有机碳源,所以可用来分别培育自养型的自生固氮菌,B正确。2.将马铃薯去皮切块,加水煮沸肯定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中参加肯定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培育基。答复以下问题:M培育基假设用于真菌的筛选,则培育基中应参加链霉素以抑制 生长,参加了链霉素的培育基属于 培育基。M培育基中的马铃薯浸出液为微生物生长供给了多种养分物质,养分物质类型除氮源外还有 出两点即可)氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有 (答出两点即可)。假设在M培育基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培育,平板上长出菌落后可通过参加显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。参加的显色剂是 ,该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 。甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其缘由是 。-14-【解析】(1)链霉素是抗生素,可抑制细菌生长,故参加链霉素的M培育基可作为选择培育基,筛选出真菌。(2)培育基中的养分成分一般包括碳源、氮源、水和无机盐等。细胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白质、核酸等,故参加的氮源可参与以上物质的合成。(3)能产生淀粉酶的微生物可将淀粉水解,淀粉遇碘液变蓝,向加有淀粉的培育基中参加碘液后培育基呈现蓝色,产淀粉酶的菌落四周的淀粉被水解,形成透亮圈,(4)统计菌落数时,30~300的平板进展计数,3个平板中的菌落数在正常范围内且差距不大,比较准确;3个平板中,1个平板的计数2个相差悬殊,结果的重复性差。答案:(1)细菌 选择 (2)碳源、无机盐 蛋白质、核酸碘液 淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落四周淀粉被水解,形成透亮圈乙同学的结果中,12个相差悬殊,结果的重复性差角度一从科学探究角度,考察微生物的选择培育1.(2023·山东等级考)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并,,乙菌菌落四周不变色,以下说法错误的选项是()甲菌属于解脂菌试验中所用培育基以脂肪为唯一碳源可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进展比照D.该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的力量突破口:脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色;甲菌菌落四周呈现深蓝色,乙菌菌落四周没有消灭深蓝色。【解析】选B。依据题干信息“甲菌菌落四周呈现深蓝色”,说明甲可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸,脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色,因此甲菌属于解脂菌,A正确;乙菌落四周没有消灭深蓝色,说明乙菌落不能产生脂肪酶,-15-但乙菌落也可以在培育基上生存,说明该培育基不是以脂肪为唯一碳源,B错误;可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进展比照,更加直观,C正确;可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的力量,观看指标为菌落四周深蓝色圈的大小,D正确。【学问纵横】(1)选择培育基:依据某种微生物的特别养分要求或其对某,使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选率。(2)鉴别培育基:依据微生物产生的某种代谢产物与培育基中特定试剂或化学药品反响,产生明显的特征变化而设计。角度二 从科学思维角度,考察微生物的培育与变异2.(2023·山东等级考)野生型大肠杆菌可以在根本培育基上生长,发生基因突变产生的氨基酸依靠型菌株需要在根本培育基上补充相应氨基酸才能生长。将甲硫氨酸依靠型菌株M和苏氨酸依靠型菌株N单独接种在根本培育基上时,均不会产某同学试验过程中觉察,将M、N菌株混合培育一段时间,充分稀释后再涂布到根本培育基上,培育后消灭很多由单个细菌形成的菌落,将这些菌落分别接种到根本培育基上,培育后均有菌落消灭。该同学对这些菌落消灭缘由的分,不合理的是( )A.操作过程中消灭杂菌污染B.M、N菌株互为对方供给所缺失的氨基酸C.混合培育过程中,菌株获得了对方的遗传物质D.混合培育过程中,菌株中已突变的基因再次发生突变突破口:微生物培育的过程中,可能会有杂菌污染,也可能消灭可遗传变异,且基因突变是不定向的,突变后的基因可以再次发生突变。【解析】选B。此题主要考察生物的变异和微生物培育。依据题意可知,培育后有菌落消灭,可能缘由是操作过程中有杂菌污染,A项正确;M和N混合培育一段时间后,再涂布到根本培育基上,培育后消灭了很多由单个细菌形成的菌落,说明M和N混合培育过程中不再对相应的氨基酸依靠,这种变化是可以遗传的,因此MN菌株互为对方供给缺失的氨基酸,B项错误;由于两者不再对氨基酸产生依靠是可以遗传的,因此可能混合培育过程中发生了转化,菌株获得了对-16-方的遗传物质,C项正确;基因突变是不定向的,在混合培育过程中,菌株中已发生突变的基因可能再次发生突变,D项正确。角度三 微生物的纯化培育3.(2023·江苏高考)为纯化菌种,在鉴别培育基上划线接种纤维素降解细菌,培育结果如下图。以下表达正确的选项是( )倒平板后需间歇晃动,以保证外表平坦图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多,应从Ⅲ区挑取单菌落C.该试验结果因单菌落太多,不能到达菌种纯化的目的D.菌落四周的纤维素被降解后,可被刚果红染成红色突破口:平板划线法连续划线的目的是获得单菌落,倒平板后不需要晃动。B,A错误;Ⅰ区、Ⅱ区没有消灭单菌落,说明细菌数量太多,故应从Ⅲ区挑取单菌落,B正确;消灭单菌落即到达了菌种纯化的目的,C错误;刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反响,D错误。角度四 培育基的分类与微生物的培育4.(2023·山东等级考)含硫蛋白质在某些微生物的作用下产生硫化氢导致生活污水发臭。硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀。为探究发臭水体中甲、乙菌是否产生硫化氢及两种菌的运动力量,用穿刺接种的方法,分别将两种菌接种在含有硫酸亚铁铵的培育基上进展培育,如下图。假设两种菌生殖速度相,以下说法错误的选项是( )-17-乙菌的运动力量比甲菌强为不影响菌的运动需选用液体培育基该试验不能比较出两种菌产生硫化氢的量穿刺接种等接种技术的核心是防止杂菌的污染突破口:含硫蛋白质在某些微生物作用下产生硫化氢,硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀;穿刺接种的核心是防止杂菌污染。,依据题干中的信息“硫化氢可以与硫酸亚铁铵结合形成黑色沉淀”,所以可依据形成黑色沉淀的多少,比较两种菌产生硫化氢的力量。【解析】选B。从图中可以看出,甲菌在试管中分布范围小于乙菌,说明乙菌的运动力量比甲菌强,A正确;为不影响菌的运动需选用半固体培育基,B错误;该试验可以依据形成黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化氢的力量,但不能测定产生硫化氢的量,C正确;微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染,D正确。角度五 培育基的分类与微生物的筛选5.(2023·湖南选择考改编)大熊猫是我国特有的珍稀野生动物,每只成年大熊猫每12~38kg8%27%的半纤维素,争论人员可从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。答复以下问题:纤维素酶是一种复合酶,其化学本质是 。为筛选纤维素分解菌,将大熊猫颖粪便样品稀释液接种至以 为唯一碳源的固体培育基上进展培育,该培育基从功能上分类属于 培育基。配制的培育基必需进展灭菌处理,目的是 检测固体培育基灭菌效果的常用方法是 。要写出测定大熊猫颖粪便中纤维素分解菌活菌数的试验思路: 。-18-为高效降解农业秸秆废弃物,争论人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌,在37℃条件下进展玉米秸秆降解试验,结果如表所示,在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株 ,理由是: 。菌株秸秆总重/g秸秆残重/g秸秆失重/%纤维素降解率/gA2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.32突破口:筛选纤维素分解菌应选用选择培育基,测定活菌数常用稀释涂布平板法。【解析】(1)纤维素酶是一种复合酶,其化学本质是蛋白质。选择培育基的原理是允许特定微生物的生长,,应将大熊猫颖粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培育基上进展培育。灭菌能杀死培育基中的全部微生物(包括芽孢、孢子),因此配制的培育基必需经过灭菌处理才可以获得纯洁培育物。为检测灭菌效果可对培育基进展空白培育