高中生物选修一《生物技术实践》导学案(学生填空)

6.2胡萝卜素的提取导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗了解胡萝卜素的基础学问和提取原理；学会提取胡萝卜素的技术和纸层析的操作要求。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P77“课题背景”和“基础学问”两部分，探讨并回答下列问题：1．β－胡萝卜素在人体内可以被氧化成维生素A，因而胡萝卜素具有预防夜盲症等疾病。另外还可以用作食品、饮料、饲料的添加剂。2．胡萝卜素是橘黄色晶体，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有机溶剂。3．提取自然胡萝卜素的方法有：从植物（如胡萝卜）中提取；从养殖的岩藻（如海带、马尾藻、裙带菜等）中提取；利用微生物发酵（如产氢红杆菌、工程菌等）生产。【思索1】在蒸馏法、压榨法和萃取法中，由于胡萝卜素的水溶性和挥发性差，因而不能用蒸馏法提取；由于胡萝卜素的熔点高，因而不能用压榨法提取；由于胡萝卜素易溶于石油醚等有机溶剂，因而可用萃取法提取胡萝卜素。二、试验设计【活动2】阅读教材P78【资料一】和【资料二】，探讨并回答下列问题：1．有机溶剂包括水溶性有机溶剂（如乙醇、丙酮等）和水不溶性有机溶剂（如石油醚、乙酸乙酯、苯、乙醚等）。2．乙醇和丙酮不能（能、不能）用于胡萝卜素的萃取。缘由是萃取中乙醇和丙酮能与水混溶而影响萃取效果。3．在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这五种有机溶剂中，由于石油醚的沸点最高，在加热萃取时不易挥发，所以最相宜用作萃取剂。4．萃取效率的主要取决于萃取剂的性质和用量，其次还受到原料颗粒大小、紧密程度、含水量；温度、时间等条件的影响。【思索2】从影响萃取效率的因素来看，应当如何限制萃取的过程条件？用石油醚作为萃取剂，用量相对多一些；原料要粉粹、干燥；萃取温度高；萃取时间长。

【活动3】结合教材图6－6，阅读教材P78【资料三】，探讨并回答下列问题：1．填写萃取法提取胡萝卜素的试验流程：2．试验步骤：①原料加工：取500g簇新胡萝卜，清水清洗、沥干、粉碎、烘干。②原料装填：将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。③加热萃取：安装冷凝回流装置，沸水浴加热萃取30min。④过滤：待降温后，将萃取物进行过滤，除去固体物，得到萃取液。⑤浓缩：安装水蒸气蒸馏装置，加热萃取液，萃取剂挥发，得到胡萝卜素粗提物。【思索3】在烘干过程中要留意什么问题？温度不能太高、时间不能太长，以防止胡萝卜素分解。三、粗提物的纯度鉴定【活动4】结合教材图6－8、9，阅读教材P79“结果分析与评价”，探讨并回答下列问题：1．胡萝卜素粗提物的纸层析鉴定①制备滤纸条：取18×30cm滤纸条，于距底端2cm处划基线，取ABCD②点样：用最细注射器针头分别吸取标准样品和提取样品在AD和BC点样，吹干。③层析：将滤纸卷成筒状并固定，放到盛有1cm④视察：取出滤纸条，使石油醚充分挥发后视察层析带。2．纸层析过程中的留意事项：滤纸条预先干燥处理，目的是有利于层析液的扩散；点样时应当快速细致、样点圆而细小，目的是有利于形成规整的色素斑点；滤纸筒的竖直边缘不能接触，以防止层析液沿着缝隙快速扩散；由于石油醚易挥发，因而层析容器要密封。【思索4】“胡萝卜素的提取和鉴定试验”与“叶绿体中色素的提取和分别试验”相比较，相同点是都用到了萃取法和纸层析法；不同点是前者的萃取温度高、纸层析时与标准样品进行了对比试验。【活动4】观看视频：观看“胡萝卜素的提取”视频，体会并学会相关技术和方法。

〖课后学习〗1．尝试提取植物芳香油。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。6.1植物芳香油的提取导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗设计简易试验装置提取植物芳香油；了解提取植物芳香油的基本原理；学会玫瑰精油和橘皮精油的提取技术。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P72“基础学问”部分和栏旁资料，探讨并回答下列问题：1．（记忆）自然香料的主要来源是动物和植物，另外还有微生物中的真菌。2．（记忆）植物芳香油的特点是挥发性强，易溶于有机溶剂，成分困难，以萜类化合物及其衍生物为主。3．（记忆）植物芳香油的提取方法有蒸馏、压榨、萃取等，而详细采纳哪种提取方法要依据植物原料的特点来确定。4．（理解）水蒸气蒸馏法原理：水蒸气可将挥发性较强的芳香油携带出来形成油水混合物，冷却后水和油分层。方法：依据原料放置位置，水蒸气蒸馏法划分为水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏。不足：有些原料不相宜于水蒸气蒸馏，如柑橘、柠檬等易焦糊，有效成分简洁水解。5．（理解）萃取法：原理：芳香油易溶于有机溶剂，有机溶剂挥发后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。方法：原料浸泡在溶剂中→得到浸泡液→有机溶剂挥发→芳香油。不足：有机溶剂必需事先精制，除去其中的杂质，否则会影响芳香油的质量。二、试验设计【活动2】阅读教材P73“玫瑰精油的提取”和P75“提示（一）”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）玫瑰精油化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏。2．（学会）填写并分析下列试验流程图：①采集玫瑰花：采集盛花期（5月中上旬）的玫瑰花，清水清洗沥干。②装入蒸馏原料：称取50g玫瑰花放入蒸馏瓶，添加200mL蒸馏水。③安装蒸馏装置：依据从左向右、自下到上的次序安装水蒸气蒸馏装置。④加热蒸馏：限制蒸馏时间和速度（1～2滴/秒），获得乳白色乳浊液。特殊留意蒸馏时间不能过短，温度不能过高。⑤分别油层：向乳浊液加入NaCl，目的是促进油水分层，然后利用分液漏斗分别出下（上、下）层的玫瑰油。⑥除去水分：向玫瑰油中加入无水硫酸钠，除去其中的水分，24h后过滤得到玫瑰精油。【活动3】阅读教材P74“橘皮精油的提取”和P75“提示（二）”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）橘皮精油的主要成分是柠檬烯，其有效成分在用水蒸气蒸馏法提取时简洁发生部分水解，运用水中蒸馏法提取时原料简洁焦糊，所以一般采纳压榨法提取橘皮精油。2．（学会）填写并分析下列试验流程图：①橘皮预处理：将簇新橘皮用清水清洗、沥干。②石灰水浸泡：用7～8％石灰水浸泡橘皮24h，目的是防止压榨时滑脱，提高出油率，降低压榨液的黏稠度，过滤时不堵塞筛眼。③清水漂洗：浸泡好的橘皮用流水彻底漂洗干净、沥干。④粉碎压榨：将橘皮粉碎，加入小苏打和硫酸钠，目的是促进油和水的分别，然后用压榨机压榨，得到压榨液。⑤过滤压榨液：用布袋过滤，滤液再高速离心处理，分别出上（上、下）层的橘皮油。⑥静置处理：将橘皮油在5～10℃冰箱中静置5～7d，目的是使果蜡等杂质沉淀，用吸管吸出上层的澄清橘皮油。⑦再次过滤：将下层的橘皮油用滤纸过滤，目的是除去其中的水分和果蜡等杂质，将滤液与吸出的上层橘皮油合并，得到橘皮精油。【活动4】观看视频：观看“植物芳香油的提取”视频，体会并学会相关技术和方法。〖课后学习〗1．尝试提取植物芳香油。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。5.1DNA的粗提取与鉴定导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗知道DNA的粗提取与鉴定的原理；驾驭并能分析DNA粗提取的技术方法和要求；学会DNA分子的鉴定方法【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P54“基础学问”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）提取生物大分子的基本思路是利用它们的理化性质的不同进行分别。2．（记忆）DNA的溶解性特点：DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精而蛋白质溶于酒精。【思索1】据图5－1分析：DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点？在0.14mol/L时溶解度最小；要使DNA溶解，须要运用什么浓度？较高浓度，可使DNA溶解；要使DNA析出，又须要运用什么浓度？0.14mol/L可使DNA析出。【思索2】利用DNA不溶于酒精的原理，可以达到将DNA和蛋白质进一步分别目的。3．（记忆）DNA的耐受性特点：蛋白酶能分解蛋白质而不能分解DNA；在60～80℃时蛋白质变性沉淀而DNA分子不变性。洗涤剂能与蛋白质结合瓦解细胞膜而不破坏DNA分子。4．（记忆）DNA的鉴定原理当鉴定提取出的物质是否是DNA时，须要运用二苯胺（甲基绿）进行鉴定。在沸水浴条件下，该试剂与DNA反应，呈现（浅）蓝色。二、试验设计【活动2】阅读教材P55“试验设计”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）试验材料的选取：选取材料时应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。【思索3】你认为教材供应的材料中哺乳动物的血液不适合提取DNA。2．（记忆）裂开细胞，获得含DNA的滤液：鸡血：向鸡血细胞液中加入肯定量蒸馏水并玻棒搅拌，用纱布过滤后，收集滤液。洋葱：向研钵中加入肯定量洗涤剂和食盐，搅拌研磨，用纱布过滤后，收集滤液。【思索4】在以上试验中，蒸馏水的作用是使血细胞大量吸水而胀裂，洗涤剂的作用是瓦解细胞膜，食盐的作用是溶解DNA物质。3．（学会）去除滤液中的杂质：方案一：30mL滤液→加NaCl使DNA溶解→过滤得滤液→加蒸馏水使DNA析出→过滤得过滤物→放到2mol/LNaCl溶液中溶解→DNA－NaCl溶解液方案二：30mL滤液→加嫩肉粉（木瓜蛋白酶）→静置10分钟→得DNA滤液方案三：30mL滤液→60～67℃处理→过滤得DNA滤液【思索5】以上三个方案的原理分别是什么？方案一原理：DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二原理：蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三原理：DNA耐高温而蛋白质不耐高温。【思索6】方案一中：“加NaCl使DNA溶解→过滤得滤液”的目的是除去不溶（可溶、不溶）于NaCl溶液中的细胞杂质；“加蒸馏水使DNA析出→过滤得过滤物”的目的是除去可溶（可溶、不溶）于NaCl溶液中的细胞杂质。4．（记忆）DNA的析出：DNA滤液与等体积冷却酒精混合，静置一段时间后析出的白色丝状物就是DNA。5．（记忆）DNA的鉴定：取2支干净的试管，编号甲、乙，各加入等量的2mol/LNaCl溶液。甲中放入少量白色丝状物，使之溶解。在甲、乙试管中各加4mL二苯胺，混合匀称。沸水浴5min，视察颜色改变，甲试管呈现蓝色。三、操作提示【活动3】（记忆）阅读教材P56“操作提示”和P57“课题延长”，关注下列留意事项：1．在鸡血中加入柠檬酸钠防止凝固；鸡血静置或离心后除去血浆，以提高细胞悬液浓度。2．试验中运用塑料烧杯和尼龙布，以免DNA被吸附。3．玻棒沿同一方向缓慢搅拌（细胞裂开时快速搅拌），玻棒不要遇到烧杯壁。4．二苯胺试剂要现用现配。5．为提高DNA纯度，试验中通常运用的洗涤剂有CTAB、SDS等。【活动4】观看视频：观看“DNA的粗提取与鉴定”视频，体会并学会相关技术方法。〖课后学习〗1．尝试从植物组织中提取DNA分子。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗尝试PCR技术的基本操作，体验PCR技术的分子生物学试验方法；理解PCR技术的原理；探讨PCR技术的应用【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P58“PCR原理”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）PCR技术扩增DNA的过程与细胞内的DNA复制过程类似。【思索1】填写下表：（记忆）细胞内DNA复制条件分析条件参加的组分在DNA分子复制中的作用模板DNA的两条单链供应复制的模板原料四种脱氧核苷酸合成DNA子链的原料酶解旋酶打开DNA双螺旋RNA聚合酶合成RNA引物DNA聚合酶催化合成DNA子链；切除引物DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来能量ATP为解螺旋和合成子链供应能量引物RNA为DNA聚合酶供应合成的3’2．（理解）细胞内DNA的复制（1）DNA的结构：脱氧核苷酸分子通过3,5－磷酸二酯键连接形成核苷酸长链，两条脱氧核苷酸长链反向平行排列并螺旋化，形成DNA双螺旋结构。（2）DNA的复制：首先，在解旋酶的作用下，由ATP供能，DNA发生解旋形成两条DNA单链。其次，在DNA单链的3’端，在RNA聚合酶在作用下，合成RNA引物。再次，在DNA聚合酶的作用下，从引物的3’端起先合成DNA子链。最终，DNA聚合酶将引物切去，并合成空缺处DNA单链，再由3．（记忆）DNA分子复制的人工限制解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。复原螺旋：在50～60℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。复制条件：缓冲液，DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种引物。限制仪器：PCR仪（温度周期性自动调整仪）。【思索2】缓冲液相当细胞内的什么成分？核液。【活动2】阅读教材P59“PCR的反应过程”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）填写PCR反应流程：

2．（理解）PCR反应过程是：在升温至90℃以上时DNA解旋；在降温至50℃左右时引物与DNA单链结合；在升温至二、试验操作【活动3】阅读教材P62“试验操作”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）在PCR反应体系的配方中，含有的成分有缓冲液、DNA模板、四种脱氧核苷酸、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物、水。2．（了解）试验操作步骤：依据PCR反应体系配方配制反应液；将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管（0.5mL）中；将微量离心管放到PCR仪中；设置PCR仪的工作参数；DNA在PCR仪中大量扩增。3．（了解）水浴法：将微型离心管依次在95℃、55℃、72三、操作提示【活动4】阅读教材P62“操作提示”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）避开外源DNA污染，所用仪器、缓冲液、蒸馏水等运用前高压灭菌。2．（记忆）将缓冲液和酶分装成小份，－20℃3．（记忆）每添加一种反应成分，更换一个移液器枪头。4．（记忆）混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。四、结果分析与评价【活动4】阅读教材P63“结果分析与评价”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）反应液稀释：取2?LPCR反应液，添加98?L蒸馏水。2．（记忆）分光光度计调零：将100?L蒸馏水添加到比色杯中，在260nm处将分光光度计读数调整为零。3．（记忆）将100?L反应稀释液倒入比色杯中，测定在260nm处的光汲取值。4．（记忆）DNA含量计算：DNA含量（?g）＝50×光汲取值×稀释倍数。【活动4】观看视频：观看“多聚酶链式反应扩增DNA片段”视频，学会相关技术方法。

〖课后学习〗1．尝试从植物组织中提取DNA分子。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。5.3血红蛋白的提取与分别导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗理解凝胶色谱法、电泳法的基本原理，了解缓冲液的组成及其作用；驾驭血红蛋白的提取与分别的基本过程和方法。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P64第1自然段和“凝胶色谱法”部分，探讨并回答下列问题：1．（理解）提取和分别蛋白质的原理：利用蛋白质的各种理化特性（如形态、大小、电荷性质和电量、溶解度、吸附性和亲和力等）的差异，将不同的蛋白质分别开来。2．（记忆）凝胶色谱法是依据相对分子量的大小分别蛋白质的一种有效方法。3．（理解）凝胶大多数是由多糖化合物（如葡聚糖、琼脂糖等）构成的微小多孔球体。当相对分子量不同的蛋白质分子通过凝胶时，相对分子量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程较长，移动速度较慢；相反，相对分子量较大的蛋白质在凝胶颗粒外部移动，路程较短，移动速度较快。【活动2】阅读教材P65“缓冲溶液”部分，探讨并回答下列问题：1．（理解）在肯定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，而保持pH基本不变。2．（记忆）缓冲溶液通常由1～2种缓冲剂溶解于水配制而成。调整缓冲剂的运用比例可以制成在不同pH范围内运用的缓冲液。【思索1】维持人体血液pH稳态的缓冲对有H2CO3/NaHCO3、NaH2PO4/Na2HPO4。【活动3】阅读教材P65“电泳”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。2．（记忆）在肯定的pH下，很多生物大分子上可解离的基团就会带上正电或负电。3．（理解）在电泳过程中，确定带电分子迁移方向的是带电分子带电性质的差异，确定带电分子迁移快慢的是带电分子形态、大小、电量的不同。4．（记忆）常用的电泳方法有琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。为了消退样品分子原有净电量对迁移速率的影响，可以在凝胶中加入SDS，使样品分子的迁移速率完全取决于分子的大小。二、试验操作【活动4】阅读教材P66最终自然段和P67“样品处理”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）蛋白质的提取和分别的一般分为四步：样品处理、粗分别、纯化和纯度鉴定。2．（学会）红细胞的洗涤：洗涤的目的是除去血浆中的杂蛋白，以利于后续步骤的分别纯化。为防止血液凝固，应预先加入柠檬酸钠；所用洗涤液是五倍于红细胞液的生理盐水；洗涤中用玻璃棒缓慢搅拌，用离心机低速短时离心；洗涤干净的标准是上清液没有黄色。3．（学会）血红蛋白的释放：释放的目的是将血红蛋白从红细胞中释放出来。在红细胞液中加入等体积的蒸馏水和40％体积的甲苯，置于磁力搅拌器上充分搅拌。4．（学会）分别血红蛋白溶液：目的是从红细胞裂开混合液中分别出血红蛋白溶液。将红细胞裂开混合液进行高速离心处理后，离心管中从上到下依次是：无色透亮的甲苯层、白色固体的脂溶性沉淀层、红色透亮的血红蛋白溶液层和暗红色的裂开物沉淀层。用滤纸过滤以除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置后分别出血红蛋白溶液。5．（学会）透析：透析的目的是除去血红蛋白溶液中的无机盐离子和有机小分子物质。将血红蛋白溶液装入透析袋中，放入磷酸缓冲液中透析12h.。【活动4】阅读教材P67“凝胶色谱操作”部分，探讨并回答下列问题：1．（了解）凝胶色谱柱的制作。2．（学会）凝胶色谱柱的装填：试验所用凝胶是交联葡聚糖凝胶（G－75），其中G表示交联程度、膨胀程度和分别范围；75表示凝胶得水值，即每克凝胶膨胀时吸水7.5g将凝胶用蒸馏水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液，一次性缓慢倒入色谱柱内，使凝胶装填匀称并不能有气泡存在。然后用磷酸缓冲液充分洗涤平衡12h，使凝胶装填紧密。3．（记忆）样品的加入和洗脱：用吸管沿管壁将样品缓慢加入色谱柱内，不要破坏凝胶面。待红色的蛋白质接近色谱柱底部时，用试管连续收集，每试管收集5mL流出液。三、操作提示【活动4】阅读教材P69“操作提示”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）洗涤红细胞时，离心速度过高或离心时间过长，会使白细胞等一同沉淀。2．（记忆）为了加快凝胶膨胀，可以将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，不仅节约时间，还能除去凝胶中的微生物和空气。3．（记忆）凝胶色谱柱中不能存在气泡，缘由是气泡会扰乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序。【活动5】观看视频：观看“血红蛋白的提取与分别”视频，体会并学会相关技术和方法。〖课后学习〗基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。4.1果胶酶在果汁生产中的作用导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗简述果胶酶的作用；检测果胶酶的活性；探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P42“课题背景”和“果胶酶的作用”，探讨并回答下列问题：1．（理解）制作果汁主要解决的两个问题：一是果肉出汁率低、耗时长；二是果汁混浊黏度高、易沉淀。缘由是果肉中含有果胶成分，它是植物细胞壁和胞间层的主要成分之一。2．（理解）果胶酶的作用是：瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁更简洁；把果胶分解为可溶性的半乳糖醛酸，使浑浊的果汁变得澄清。3．（记忆）果胶酶是一类酶的总称，包括：多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶。【活动2】阅读教材P42“酶的活性与影响酶活性的因素”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）酶的活性是指酶催化肯定化学反应的实力。酶的活性凹凸可用肯定条件下的酶促反应速度（即单位时间、单位体积内反应物消耗量或产物生成量）来表示。2．（理解）影响酶活性的因素有温度、PH、激活剂和抑制剂等。【活动3】阅读教材P43“果胶酶的用量”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）食品工业生产中最常用的果胶酶是通过霉菌发酵产生。2．（理解）依据影响酶活性的因素，在实际生产中我们如何获得果胶酶的最高活性？确定果胶酶的最适温度、最适PH等条件。二、试验设计【活动4】阅读教材P43“资料一：探究温度和PH对酶的活性的影响”，尝试进行试验设计：1．（设计）试验目的：定量测定果胶酶的最适温度或最适pH。2．（理解）试验原理：果胶酶能分解果胶，增大果汁的产量，提高果汁的澄清度。3．（设计）变量设计与限制：试验自变量是温度（或pH），限制自变量的方法是利用恒温水浴锅（或滴加酸碱等）。你确定的温度梯度（或pH梯度）为10℃或5℃试验的因变量是酶的活性，检测因变量的方法是测定果汁的产出量或澄清度。4．（理解）果汁与果胶酶在混合之前，分装在不同试管中用同一恒温处理的目的是什么？保证果汁与果胶酶混合前后的温度相同，避开因混合导致温度改变而影响果胶酶活性。5．（理解）该试验中是否设置了比照？为什么？已经设置了比照。不同的温度设置之间可以相互比照。6．（简述）依据以上分析，设计出你的试验步骤。

7．（设计）设计试验结果记录表温度℃（或pH）

果汁量/ml

【活动5】阅读教材P44“资料二：探究果胶酶的用量”，探讨并回答下列问题：1．（理解）探究果胶酶的最适用量试验中应当限制怎样的温度和pH条件？依据“探究温度和pH对酶活性的影响”试验结果确定该试验的最适温度和最适pH。2．（设计）你认为此试验的自变量应当是果胶酶的用量_，那么怎样限制该自变量？配制不同浓度的果胶酶（或添加不同体积的一种浓度的果胶酶溶液）。3．（设计）试验因变量是果汁体积或澄清度。其他全部条件限制相同（相同，不同）。4．（简述）依据以上分析，设计出你的试验步骤。

5．（设计）设计试验结果记录表：果胶酶用量（U/mL）

果汁量/ml

三、操作提示、结果分析与评价【活动6】阅读教材P44“操作提示”和“结果分析与评价”，探讨并回答下列问题：1．（知道）制备果泥：用榨汁机榨制果泥。在榨制橙子汁时应怎样处理橙皮?不必去橙皮2．（记忆）在探究不同pH对果胶酶活性的影响时，可用0.1%的NaOH溶液和盐酸调整。3．（记忆）为了是果胶酶能充分地催化反应，如何操作?用玻璃棒时常搅拌。【活动7】观看视频：观看“果胶酶在果汁生产中的应用”视频，体会并学会相关技术方法。

〖课后学习〗1．尝试利用果胶酶制作果汁。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。4.2探究加酶洗衣粉的洗涤效果导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗说出加酶洗衣粉的洗涤原理；探讨温度对加酶洗衣粉的洗涤的影响；探讨不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的区分【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P46“课题背景”及“基础学问”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉，常用的酶制剂有四类：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶。其中应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。2．（理解）碱性蛋白酶为什么具有很强的去污实力？酶具有高效性，能快速将血渍、奶渍中大分子蛋白质分解成可溶性小分子肽和氨基酸。3．（记忆）影响酶活性的因素有温度、酸碱度和表面活性剂。【开拓视野1】表面活性剂表面活性剂是指具有固定的亲水亲油基团，在溶液的表面能定向排列，并能使表面张力显著下降的物质。无论何种表面活性剂，其分子结构均由疏水基（亲油基）和亲水基（疏油基）两部分构成。形成了既亲水、又亲油，便又不是整体亲水或亲油的特性。表面活性剂包括阴离子表面活性剂（硬脂酸、十二烷基苯磺酸钠）、阳离子表面活性剂（季铵化物）、两性离子表面活性剂（卵磷脂、氨基酸型、甜菜碱型）、非离子表面活性剂（脂肪酸甘油酯、脂肪酸山梨坦、聚山梨酯）。4．（记忆）酶能干脆添加到洗衣粉中吗？为什么？科学家是如何解决这一难题的？不能，因为洗衣粉中的表面活性物质会降低酶的活性。将基因工程生产出的酶用特殊水溶性物质包袱起来，与洗衣粉的其它成分隔离开来。【思索】（记忆）为什么说加酶洗衣粉能削减对环境的污染？加酶洗衣粉可以降低表面活性剂和三聚磷酸钠的用量，使洗涤剂朝低磷、无磷的方向发展。【开拓视野2】一般洗衣粉一般洗衣粉的化学成分有表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白粉等成分，有的洗衣粉中还含有增白剂、香精和色素，以及填充剂等。二、试验设计【活动2】阅读教材P47“如何有效地限制变量”，探究加酶洗衣粉的洗涤效果：1．（分析）A同学的试验方案是否存在问题吗？请说明理由。有问题。未说明限制相同的相宜温度；玻棒搅拌强度难于限制相同；未确定布料颜色等。2．（分析）你是否同意B同学观点？请说明理由。不同意。B同学忽视了试验中变量的限制问题。3．（创新）试验应限制的单一变量是一般洗衣粉和加酶洗衣粉的区分，其他条件如洗衣粉用量、水温、水质、水量、布料的大小和颜色、洗涤方式、洗涤时间等应相同且相宜。【活动3】阅读教材P47“考虑实际生活中的详细状况”，探究温度对加酶洗衣粉效果的影响：1．（设计）自变量的设置与限制：10℃、20℃、30℃、40℃、2．（设计）无关变量设置与限制：洗涤方式采纳全自动（半自动、全自动）比较好，并且运用的洗衣机和洗涤模式应相同；试验材料以布料（衣物、布料）比较可行，做比照试验时可以限制布料的大小、颜色以及污物量（可用滴管限制）等使其相同，以便于比对。3．（记忆）你认为一个完整的试验方案应包括哪些基本内容？课题名称、试验目的、试验原理、试验材料、试验步骤、试验结果、试验结论等。【活动4】探究不同种类的加酶洗衣粉对同一污物和不同污物洗涤效果的比较1．（记忆）在活动2中，酶的有无是自变量，而其他因素在试验中应保持不变；（记忆）在活动3中，温度是自变量，而其他因素在试验中应保持不变。（分析）在该试验中，酶的种类和污渍种类是自变量，而其他因素在试验中应保持不变。2．（分析）有位同学准备用丝绸做试验材料，探讨加酶洗衣粉的洗涤效果，你认为他这样做合适吗？为什么？不适合。因为丝绸面料属于蛋白质成分，加酶洗衣粉会分解破坏丝绸。【开阔视野3】运用洗衣粉的留意事项已溶解在水里的洗衣粉，可通过皮肤汲取进入人体内，长期积累易损害肝脏功能，甚至致癌。洗衣粉是烷基苯磺酸钠、硫酸钠、甲苯碘酸钠、三聚磷酸钠以及羧甲基纤维合成的碱性化学洗涤剂。常接触洗衣粉(水)，易使皮肤角化、皴裂；用洗衣粉洗头会使头发变黄、发脆；进入人体造血系统后会影响肝脏功能。加酶洗衣粉加入了碱性蛋白酶，以水解衣物上的蛋白质，起到去污除垢的作用。这种碱性蛋白酶同样可分解皮肤表面蛋白质，而使人患过敏性皮炎、湿疹等。用洗衣粉洗过的衣被，需经清水彻底漂洗干净；婴儿尿布、内衣、内裤、以及成人内衣不要用洗衣粉洗（但是可运用肥皂、或自然皂粉）；洗涤炊具、碗筷也不宜运用洗衣粉。长期接触洗衣粉的人员应有必要的防护，尽量不要干脆接触洗衣粉。【活动5】观看视频：观看“探究加酶洗衣粉的洗涤效果”视频，体会并学会相关技术方法。

〖课后学习〗1．每个学习小组设计并撰写一个完整的探究温度对加酶洗衣粉洗涤效果影响的试验方案。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。4.3酵母细胞的固定化导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗说出固定化酶和固定化细胞的作用和原理；尝试制备固定化酵母细胞，并利用固定化酵母细胞进行酒精发酵【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、课题背景【活动1】阅读教材P49“课题背景”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）在应用酶的生产中，人们遇到的实际问题有：酶受环境条件影响而简洁失活；酶分子很难回收利用而提高生产成本；酶分子混合在产物中而影响产品质量。2．（记忆）固定化酶（细胞）的原理：将酶（细胞）固定在不溶于水的载体上。使酶（细胞）既能与反应物接触，又能与产物分别，还可以被反复利用。【开拓视野】固定化酶和固定化细胞的技术发展发展阶段优点问题酶催化效率高，低能耗低污染，应用广泛对环境敏感易失活，很难回收，影响质量。固定化酶既能与底物反应，又能分别回收利用很多产物是由多种酶催化形成的，应用受限固定化细胞成本低，操作更简洁细胞具有肯定寿命，形成其他产物二、基础学问【活动2】阅读教材P49“固定化酶的应用实例”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）高果糖浆的生产原理是：

2．（理解）在生产高果糖浆过程中，将葡萄糖异构酶固定在颗粒状载体上，并装入到反应柱中。从反应柱上端注入葡萄糖溶液，从下端流出果糖溶液。【活动3】阅读教材P50“固定化技术的方法”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）将酶和细胞固定化方法有包埋法、化学结合法和物理吸附法。2．（理解）酶和细胞的固定方法和特点比较固定对象酶细胞相宜方法化学结合法、物理吸附法包埋法特点一次只能固定一种酶；酶分子体积小，包埋法易丢失一次可以固定一系列酶；细胞体积大，难以化学结合和吸附3．（理解）对固定酶的作用影响较小的固定方法是物理吸附法。【思索1】若将谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的发酵过程变为连续的酶反应，应当固定细胞；若将蛋白质变成氨基酸，应当固定酶（酶、细胞）。4．（记忆）固定细胞时应当选用不溶于水的多孔性载体材料，如明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素和聚丙烯酰胺等。三、试验操作【活动4】阅读教材P49“制备固定化酵母细胞”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）活化酵母细胞：1g干酵母＋10mL蒸馏水→50mL烧杯→搅拌匀称→放置1h使之活化（即：将处于休眠状态的微生物重新复原正常生活状态的过程）。2．（记忆）配制CaCl2溶液：0.83gCaCl2＋150mL蒸馏水→200mL烧杯→溶解备用。3．（记忆）配制海藻酸钠溶液：0.7g海藻酸＋10mL水→50mL烧杯→酒精灯微火（或间断）加热，并不断搅拌使之溶化→蒸馏水定容到10mL。4．（记忆）海藻酸钠溶液与酵母细胞的混合：将海藻酸钠溶液冷却至室温，加入活化酵母细胞液，搅拌后吸入到注射器中。5．（记忆）固定酵母细胞：将注射器中的混合液滴加到CaCl2溶液中，形成凝胶珠状颗粒。【活动5】阅读教材P50“固定化酵母细胞的发酵”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）将固定的酵母细胞凝胶珠用蒸馏水冲洗2～3次。2．（记忆）150mL10％葡萄糖＋固定化酵母细胞→200mL锥形瓶→密封→25℃【思索2】发酵过程中锥形瓶为什么要密封？酵母菌的酒精发酵须要缺氧条件。【思索3】在利用固定化酶或固定化细胞进行生产的过程中，须要无菌操作码？须要。3．依据以上设计，绘出酵母细胞的固定化及其酒精发酵的流程图：

【活动5】观看视频：观看“酵母细胞的固定化”视频，体会并学会相关技术方法。

〖课后学习〗1．上网搜集有关固定化酶和固定化细胞在生产中应用的实例。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。3.1菊花的组织培育导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗说明植物组织培育的基本原理；学习植物组织培育的基本技术。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】联系“细胞的分化”，阅读教材P32“课题背景”部分，探讨并回答下列问题：1．（温习）具有某种生物全套遗传信息的活细胞都具有发育成完整个体的实力，即全能性。但这在生物体内并未表现出来，缘由是通过基因的选择性表达而使细胞处于分化状态。2．（记忆）当植物细胞脱离原来所处的植物体的器官或组织而处于离体状态时，在肯定的养分物质、激素和其他外界条件的作用下，细胞就可能表现出全能性，发育成完整植株。【活动2】阅读教材P32“植物组织培育的基本过程”，探讨并完成以下问题：1．（温习）细胞分化是在个体发育中细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差异过程。2．（记忆）愈伤组织是离体植物组织通过细胞分裂形成的、细胞排列疏松而无规则的、高度液泡化呈无定形态态的薄壁细胞。3．（记忆）植物组织包括脱分化和再分化两个基本阶段，该过程可简洁表示为：

【活动3】阅读教材P33“影响植物组织培育的因素”，探讨并完成以下问题：1．（记忆）材料：植物的种类、材料的年龄和保存时间的长短等都会影响试验结果。菊花组织培育一般选择未开化植物的茎上部新萌生的侧枝作材料。2．（记忆）养分：组织培育一般常用的培育基是MS培育基，其中含有甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等有机物。3．（记忆）激素：在培育基中须要添加植物激素有生长素和细胞分裂素等。4．（记忆）激素运用的先后依次及其用量比例对细胞分裂和分化的影响。

5．（记忆）环境条件：pH、温度、光等环境条件。二、试验操作【活动4】阅读教材P34“制备MS固体培育基”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）配制各种母液：大量元素配制成10倍浓缩液，微量元素配制成100倍浓缩液，微量有机物配制成1mg/mL的母液。2．（记忆）配制培育基：按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液，配制MS培育基。在菊花组织培育中，可以不添加植物激素，缘由是菊花茎段组织培育比较简洁。3．（记忆）灭菌：实行的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。【思索】与肉汤培育基相比，MS培育基有何特点？肉汤培育基以有机养分为主，MS培育基则需供应大量无机养分。【活动5】阅读教材P34“外植体消毒”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）填写下列流程图：

2．（记忆）在此消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受实力。【活动6】阅读教材P34“接种、培育、移栽和栽培”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）前期准备：用70％的酒精消毒工作台，点燃酒精灯。全部工作都必需在酒精灯旁进行，器械运用前后都要用火焰灼烧灭菌。2．（理解）接种操作：插入外植体时形态学上端朝上，每个锥形瓶接种7～8个外植体。3．（记忆）培育过程：应当放在无菌箱中进行，并定期进行消毒，保持相宜的温度和光照。4．（记忆）移栽：打开封口膜，在培育间生长几日；然后用流水清洗根部培育基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍宝岩等环境中生活一段时间，进行壮苗。最终进行露天栽培。三、结果分析与评价【活动7】阅读教材P35“结果分析与评价”和P34“课题延长”，探讨并回答下列问题：1．（理解）外植体在培育过程中可能会被污染，你认为造成污染的缘由有哪些？培育基灭菌不彻底；外植体消毒不彻底；接种中被杂菌污染；锥形瓶密封性差等。2．（记忆）一般说来，简洁进行无性繁殖的植物，也简洁进行组织培育。【活动８】观看视频：观看“菊花的组织培育”视频，体会并学会相关技术和方法。〖课后学习〗基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。3.2月季的花药培育导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗相识花药发育经验；知道花药培育途径和影响因素；学会材料的选择和消毒。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动1】阅读教材P37“课题背景”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）生殖细胞和体细胞一样，在离体条件下，也具有全能性。2．（理解）填写下列月季育种流程图：

【活动2】阅读教材P37“被子植物的花粉发育”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）被子植物的花粉是在花药中由花粉母细胞经过减数分裂形成的。2．（理解）结合教材内容填下列示意图：

3．（记忆）被子植物的花粉的发育要经验四分体时期，单核期和双核期等阶段。在正常状况下，一个小孢子母细胞可以产生8个精子；在一枚花药中可以产生很多个花粉。【活动3】阅读教材P38“产生花粉植株的两条途径”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）产生花粉植株（单倍体植株）的途径：花粉通过胚状体阶段发育为植株，二是通过愈伤组织阶段发育为植株。这两条途径取决于培育基中激素的种类及其浓度的配比。2．（理解）填写培育花粉植株的途径图解：

3．（理解）胚状体的结构及其发育过程与种子胚相像，所以把胚状体到丛芽的过程称为分化，而把从愈伤组织到从芽的过程称为再分化。【活动4】阅读教材P38“影响花药培育的因素”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）影响花粉植株的主要因素：材料的选择和培育基的组成等。2．（记忆）材料的选择：从花药来看，应当选择初花期的花药；从花粉来看，应当选择单核期的花粉；从花蕾来看，应当选择完全未开放的花蕾。3．（了解）影响花粉诱导胜利率的因素还有哪些？植物种类、亲本生长条件、材料的低温处理、接种密度、培育基组成、培育条件等。【思索】花瓣松动会给材料消毒带来困难，缘由是外界微生物简洁侵入到花药中。二、试验操作【活动5】阅读教材P39“材料的选择”和“材料的消毒”，探讨并回答下列问题：1．（记忆）选择花药时一般通过镜检确定花粉发育时期，对花粉细胞核进行染色最常用的染色剂有醋酸洋红溶液和焙花青－铬钒溶液，它们分别可以将细胞核染成红色和蓝黑色。2．（记忆）在运用焙花青－铬钒溶液时，须要首先将花药用卡诺氏固定液处理20min。该试剂的配制方法是将无水酒精和冰醋酸按体积比为3：1的比例混合匀称。3．（记忆）填写下列流程图：【活动6】阅读教材P40“接种和培育”，回答下列问题：1．（记忆）剥取花药：要在无菌条件下剥取花药，一留意不要损伤花药，缘由是受伤部位简洁产生愈伤组织；二要彻底除去花丝，缘由是花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成。2．（记忆）接种花药：剥取的花药接种到MS培育基上，每个培育瓶接种7～10个花药。3．（记忆）培育花药：幼苗形成之前不须要（须要、不须要）光照。培育20－30d后，花药开裂，长出愈伤组织或释放出胚状体。前者还要转移到分化培育基上进行分化培育成再生植株；后者要尽快分开并转移到新的培育基上。4．（理解）通过愈伤组织形成的植株，常常会出现染色体倍性的改变，缘由是有些植株是由花粉细胞发育形成的，有些植株是由花粉壁细胞发育形成的，因而须要鉴定和筛选。【活动7】观看视频：观看“月季的花药培育”视频，体会并学会相关技术和方法。

〖课后学习〗1．上网搜集有关植物组织培育的资料，并进行解读。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。2.1.1微生物的试验室培育导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗相识培育基的成分、类型和应用；相识无菌操作技术的基本要领【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问：【活动１】阅读教材“课题背景”和“培育基”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）培育基的种类包括固体培育基和液体培育基等。2．（记忆）琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培育基中用作为凝固剂。【开拓视野1】培育基的类型（记忆）及其应用分类标准培育基类型配制特点主要应用物理性质固体培育基加入琼脂较多菌种分别、鉴定、计数半固体培育基加入琼脂较少菌种保存液体培育基不加入琼脂工业生产的连续培育化学组成合成培育基由已知化学成安排制而成，培育基成分明确菌种分类、鉴定自然培育基由自然成安排制而成，培育基成分不明确用于工业生产降低成本目的用途鉴别培育基添加某种指示剂或化学药剂菌种的鉴别选择培育基添加（或缺少）某种化学成分菌种的分别3．（了解）阅读教材“附录3”培育基名称应用培育基名称应用牛肉膏蛋白胨培育基培育细菌查氏培育基培育霉菌养分琼脂培育基培育细菌MY培育基霉菌和酵母菌传代保藏麦芽汁琼脂培育基培育酵母菌尹红美蓝培育基检测水中大肠杆菌含量马铃薯琼脂培育基培育真菌MS培育基用于植物组织培育4．（记忆）培育基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类养分成分。此外，培育基还要满意微生物生长的pH、特殊养分物质和氧气等要求。【开拓视野2】（记忆）有机养分成分及其作用碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等含碳有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并供应能量。氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。生长因子：某些微生物正常生长代谢中必需从培育基中汲取的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。其中，含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。【思索1】牛肉膏和蛋白胨主要为微生物供应糖、维生素和有机氮等养分物质。【思索2】培育乳酸杆菌时须要添加维生素；培育霉菌时须要将培育基pH调整为酸性；培育细菌时须要将pH调整为中性或微碱性。【活动２】阅读教材“无菌技术”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）获得纯净培育物的关键是防止外来杂菌的入侵。2．（记忆）无菌技术包括：对试验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将培育器皿、接种用具和培育基等器具进行灭菌；为避开四周微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰旁边旁进行；避开已灭菌处理的材料用具与四周物品相接触。3．（理解）比较消毒和灭菌（填表）比较项理化因素的作用强度歼灭微生物的数量芽孢和孢子能否被歼灭消毒较为温柔部分生活状态的微生物不能灭菌剧烈全部微生物能【思索3】无菌技术除了防止培育物被污染外，还具有的目的是防止感染试验操作者。【活动３】阅读教材“试验室常用的消毒和灭菌方法”，探讨并回答下列问题：1．（了解）消毒方法：生活常常用到的是煮沸消毒法；对一些不耐高温的液体则用巴氏消毒法；对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液，然后运用紫外线进行物理消毒；试验者的双手运用酒精进行消毒；饮水水源用氯气进行消毒；肌肉注射时所用的皮肤消毒剂有酒精、碘酒；皮肤擦伤后所用的消毒剂有结晶紫、红汞、H2O2等。2．（记忆）灭菌方法：接种环、接种针、试管口等用灼烧灭菌法；玻璃器皿、金属用具等用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；培育基、无菌水等用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。表面灭菌和空气灭菌等运用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。3．（记忆）对接种环灭菌时要是用酒精灯的充分燃烧层火焰灼烧可能深化试管的部位。4．（记忆）利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能太挤，目的是避开阻碍热空气流通。5．（驾驭）高压蒸汽灭菌法：物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并解除锅内的冷空气，目的是有利于锅内温度上升；随后关闭排气阀接着加热，气压升至100kPa，温度为121℃，并维持15～30min；切断热源使温度自然降温，气压务必降至零时打开锅盖，其目的是防止容器中的液体暴沸【活动４】观看视频：观看有关灭菌操作的视频，理解并学会相应的技术和方法。〖课后学习〗1．尝试利用高压蒸汽灭菌锅进行灭菌。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。2.1.2微生物的试验室培育导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗学会培育基的配制；进行大肠杆菌的纯化培育。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。二、试验操作：【开拓视野1】（记忆）培育基的配制原则①目的要明确：依据培育的微生物种类、培育的目的等确定培育基的类型和配制量。②养分要协调：培育基中各种养分物质的浓度和比例要相宜。例如：碳氮比4:1时，谷氨酸棒状杆菌大量繁殖而产生谷氨酸少；碳氮比为3:1时，菌体繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。③pH要相宜：细菌培育基pH中性或偏碱性，霉菌培育基呈酸性。【活动４】（记忆）阅读教材“制备牛肉膏蛋白胨固体培育基”部分，探讨并回答下列问题1．计算：依据配方比例，计算100mL培育基各成分用量。2．称量：精确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时要快速，目的是防止汲取空气中水分。3．溶化：加水加热熔化牛肉膏→加入蛋白胨和氯化钠接着加热→加入琼脂→用蒸馏水定容到100mL。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯裂开。4．调pH：用1mol/L的NaOH溶液调整pH至偏碱性。5．灭菌：将配制好的培育基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌。所用培育皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。6．倒平板：待培育基冷却至50℃在酒精灯火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；使锥形瓶的瓶口快速通过火焰，目的是歼灭瓶口的杂菌，防止杂菌感染培育基；左手将培育皿打开一条缝隙，右手将培育基倒入培育皿后，立即盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，目的是防止培育基冷却过程中形成的水滴落到培育基表面。【思索1】若在皿盖和皿底之间粘有培育基，则该平板能否培育微生物？为什么？不能。空气中的杂菌会在这些粘附的培育基繁殖，并污染培育皿内的培育基。【活动５】阅读教材“纯化大肠杆菌”部分，探讨并回答下列问题：1．（记忆）微生物接种的最常用方法是平板划线法和稀释涂布法，另外还有固体斜面接种等。2．（记忆）平板划线法：通过接种环在琼脂固体培育基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培育基表面。其操作步骤是：将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红；在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞；将菌种试管口通过火焰达到歼灭试管口杂菌的目的；将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种；将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞；将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培育基；灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端起先向其次区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。留意不要将第五区的划线与第一区划线相连；将平板倒置放在培育箱中培育。【思索2】划线前都要灼烧接种环的目的是歼灭接种环上杂菌和残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是防止高温杀死菌种；最终灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。【思索3】每次划线后都从上次划线末端起先，目的是逐步使细菌分散开来。【活动６】阅读教材“系列稀释操作”和“涂布平板操作”两部分，探讨并回答下列问题：1．（学会）稀释涂布平板法：将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培育基上进行培育。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。2．（学会）系列稀释操作：取盛有9mL水的无菌试管6支，编号。用灼烧冷却的移液管吸取1mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次，使之混匀。从101倍液中吸取1mL菌液注入到编号为102试管内吹打匀称，获得102倍液。依此类推。3．（学会）涂布平板操作：将接种工具涂布器浸泡在盛有体积分数为70％酒精的烧杯中。将滴管灼烧冷却后，吸取不超过0.1mL菌液滴加到培育基表面。将粘有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后冷却8～10s。用涂布器将菌液涂布匀称。将接种培育基和一个未接种培育基放到37℃培育箱中培育12h和24h三、结果分析与评价：【活动７】阅读教材“结果分析与评价”和“课题延长”，探讨并回答下列问题。1．（记忆）培育未接种培育基的作用是比照，若有菌落形成，说明培育基灭菌不彻底。2．（了解）在肉汤培育基上，大肠杆菌菌落呈白色色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐。3．（了解）培育12h和24h后的菌落大小不同，菌落分布位置相同（相同、不同）。4．（记忆）常用菌种利用临时保藏法保存，用固体斜面培育基培育后保存在4℃冰箱中。长期保存菌种的方法是甘油管藏法，将菌种与无菌甘油【活动８】观看视频：观看“倒平板”、“系列稀释操作”和“涂布平板操作”等视频，理解并学会相应的技术和方法。〖课后学习〗1．尝试模拟“系列稀释操作”和“涂布平板操作”技术。2．基础训练册：将基础学问整理到作业本上；完成该节训练题。2.2尿素分解菌的分别与计数导学案山东省平度市第一中学刘贵溪〖学习要求〗探讨培育基对微生物的选择作用；测定微生物数量的操作过程。【预习指导】在课前时间通过阅读教材、同学沟通和探讨，完成下列问题，并初步巩固。一、基础学问【活动１】阅读教材P21“课题背景”及“筛选菌株”两部分内容，探讨并完成下列问题：1．（记忆）尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）干脆汲取利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为氨和CO2，这是因为细菌能合成脲酶。2．（理解）科学家能从热泉中筛选出耐热菌的缘由是什么？通过自然选择，热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物而保留了耐热菌。3．（理解）试验室中筛选微生物的原理是什么？通过人工选择，人为供应有利于目的菌株生长的条件同时抑制或阻挡其他微生物生长。【活动２】阅读P22旁栏左上“培育基”配方小资料，完成下列问题：1．（分析）该培育基中的碳源是葡萄糖，氮源是尿素，琼脂的作用是凝固剂。2．（记忆）该培育基的选择机制是只有以尿素为氮源的微生物才能在该培育基上生长。3．（记忆）选择培育基是指允许特定微生物生长而同时抑制或阻挡其他微生物生长的培育基。（记忆）选择培育基的选择性条件（限制性条件）包括养分、温度、pH等。【活动３】阅读教材P22“统计菌落数目”部分，探讨并完成下列问题：1．（记忆）在统计菌落数目时常用稀释涂布平板法。除此还有显微镜干脆计数法等。【开拓视野1】显微镜干脆计数将待测样品与等量的已知红细胞含量的血液混匀后，涂布在载玻片上，经固定染色后，在显微镜下随机选取若干个视野进行计数，得出细菌与红细胞的比例，再依据红细胞的含量计算出单位体积内的细菌数目。也可以用血球计数板干脆统计细菌含量。2．（记忆）当稀释度足够高时，培育基上的一个标准菌落来源于样品稀释液中一个活菌。为了保证结果精确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。3．（理解）每克样品细菌数＝（平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数。4．（理解）教材资料中其次位同学的结果接近真实值。缘由是是第一位同学没有设置重复试验组；其次位同学其中1个平板的计数结果与另2个相差太远，说明操作有误。5．（记忆）菌落数往往比活菌数低，缘由是当2个或多个细菌连在一起时只形成一个菌落。【活动４】阅读教材P22“设置比照”与P23右上栏旁资料两部分，探讨并完成下列问题：1．（记忆）设置比照的目的是解除非测试因素对试验结果的影响，提高试验结果的可信度。2．（记忆）比照试验是指除被测试条件外，其他条件都相同的试验。满意该条件的称为比照组，未满意该条件的称为试验组。3．（设计）请帮助A同学设计比照试验。其他同学用A同学的土样进行试验或A同学以不接种的培育基作为空白比照。二、试验设计【活动５】阅读教材P23“试验设计”和阅读资料1、2、3，探讨并完成下列问题：1．（图文转换）依据