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文档简介

、、该授课单元主要介绍的基本特性和粒子的结构与组成通过学习要求学生熟悉的特性粒子的形态结构与化学组成的培养与纯化方法,了解的发现和研究历史、的分类,与发酵工业。、、第四章与亚第一节概述一、的发现和研究历史二、的特性和定义三、的宿主范四、的分五、的培养与纯第二节的形态结构与化学组成一、的形态结构二、的化学组成第三节的增殖:定义是一类结构极其简单、具有特殊的繁殖方式以及细胞既具有细胞外的性颗粒形式又具有细胞内的繁殖性形式的独特生物类:有细胞结构;③一种只含有一种核酸;④细胞内寄生;⑤以核酸和蛋白质合成、然后装配的方式进行繁殖;⑥在离体条件下,以无生命的生物(1的形态结构结构完整的有性的单个称为毒粒(virion)particle(nucleocapsid的蛋白质壳体和核酸()构成的复合物。衣壳是由大量蛋白质亚基3(TMV(2)的化学组成:粒的基本成分是核酸(DNARNA),。有包膜还含有脂类和糖类等。核酸是的遗传物质组的核酸有ssDNA、dsDNA、ssRNA和dsRNA四种基本类型,其中根据组核酸是线状还是环状,是单一分子还是分段,以及单链核酸的极性分成不同的种类蛋,。特点:敏感宿主细胞后,核酸进入细胞,通过其与表达产生子代组和新的蛋白质,然后由这些新合成的组分装配成子代毒粒,并以一定方式释放到细胞外,这种特殊繁殖方式称(replication)(2)周期:一般分为5个连续的阶段:①吸附;②侵入与脱壳;③病毒大分子的合成;④装配;⑤释放。一步生长曲线(onestepgrowthcurve):定量描述烈性噬菌体增殖3释放出子代毒粒所需的最短时间。该阶段无粒子释放。②裂解期:宿主细胞迅速裂解,并大量释放侵染毒。③平稳期:指受染细胞已全部裂解,此时不再有粒子释放。从一步生长曲线中,可获得繁殖的2个特征性数据,即潜伏期和裂解量。裂解量指每个受染细胞所产生的子代颗粒的平均数目,其值等于平稳期受染细胞所释放的全部子代数目除以潜伏期受染细胞的数目,即等于稳定期效价与潜伏期效价之比。一步生长曲线的绘1:10中的噬菌体效价,然后以时间为横坐标,噬菌体的效价为纵坐标,绘粒,capsomers)56(protomer,即蛋白质在细菌菌苔上形成圆形局部透明区域,即噬菌斑(;动物将引起宿主细胞和组织微观或宏观的改变和异常,称为致细胞病变效应(cytopathiceffect,CPE,body,que本授课单元采用教师讲授与多教学相结合的授课方式。第四章第一节 1是一类结构极其简单、具有特殊的繁殖方式以及细胞内寄征,既具有细胞外的性颗粒形式,又具有细胞内的繁殖性形式的真:至少含核酸和蛋白质二种组分(主要介绍)类:只含具侵染性的RNA组分亚拟:只含不具侵染性的RNA组分朊:只含蛋白质组分2.特性(与细胞型微生物的区别,7点根据宿主种 噬菌体真菌 1

植物(ntes)动物(animal 标本和处理(含足够量的活,加入抗生素或离心、过滤除实验宿主(动物、植物、细菌噬菌体细菌培养物培养液 噬菌(噬菌斑 )定义算10h,对平板上噬菌斑进行计数。动 鸡各种动物细胞培养致细胞病变效应(显微表现的改变蚀斑或空斑(成包涵体(inclusionbody细胞内出现的特异性染域。不同所形成的包涵体料,有的嗜碱性;并且其大小、形态和数量亦有区别,所以包涵体在的实验诊断具有一定的意义。包涵体是粒子的体、结构蛋白与有关蛋白质等组分的体。多角体:昆虫细胞内形成的多角形包涵体,可作为杀虫剂2、纯标准:保持等 毒粒(virion):又称“粒子”(指结构完整的、有性的单个大小:nm形状:球形或拟球形(大多数动物杆状(植物和昆虫;复杂形状:蝌蚪状(大肠杆菌T偶数噬菌体弹状(狂犬、砖块状(痘、丝状(大肠杆菌f1、fd、M13噬菌体)等2.的结构和衣壳(capsid)的对称(1)毒粒的结(core:DNA(capsid非基本构造:包膜(envelope:脂蛋白或类脂糖蛋白virion有包膜的衣壳结 二十面体对称衣壳(腺复合对称衣壳(大肠杆菌T核酸基本组成一种的毒粒只含有一种核酸:DNA或是RNA;核酸类型ss四种基本类型dsDNAssRNAdsRNA正链RNA(plusstrandRNA若的ssRNA可以作为mRNA直接翻译,则规定为+RNA;负链RNA(minusstrandRNA 的ssRNA序列与其mRNA互补,则规定为-RNA2 结构蛋白(构成一个形态 有性 粒所必需的蛋质存在于中的酶类(T4噬菌体的溶菌酶,逆转录流 刺突中的唾液酸苷酶第三节的增殖(主要介绍T4噬菌体)一、一步生长曲线(onestepgrowthcurve)研究的经典实1:10②数分钟后,高倍稀释-细胞培养物,一定量的该噬菌体的抗(以除去未吸附的噬菌体,以建立同步;④以时间为横坐标,噬菌体的效价为纵坐标,绘制出定量描烈性噬菌体在宿主细胞中的不同阶段period:periodperiod:②裂解量:每个受染细胞所产生的子代颗粒的平均数目裂解量=全部释放的子代数目÷被的敏感细胞数(其值等于稳定期效价与潜伏期效价之比)二、的周期(replicativecircle)T4噬菌体,5吸附蛋白(viral potein,AP,能特异性地识别细胞受体并与之结合的表面的结构蛋白。能被吸附蛋白特异性地吸附并与之结合,介导侵入的宿 without的时序性主要表现为组转录的时间组织装配(4个独立的亚装配途径T4丝杆噬菌体(如M13或fd:以分泌方式:噬菌体,噬菌斑,噬菌体效价,毒粒(粒子,核衣壳,衣壳粒,负RNA,正链RNA,致细胞病变效应,包含试简述的特性(与细胞生物的区别试简述的结构、衣壳的对称机制和化学组成性的特点和发酵工业中噬菌体污染的检测及防治措施;熟悉的增殖过程、一步生长曲线的测定方法和意义;了解杀虫剂的应用和几类亚如类病毒、和朊的主要特性和致病性。第四章与亚第四节噬菌体二、噬菌体的周第五节真核细胞第六节亚第七节与实类,即烈性噬菌体和温和噬菌体。前者指宿主细胞后能在细胞内正常并引起宿主细胞迅速裂解的噬菌体,而温和噬菌体指宿主细胞后,噬菌体组长期存在于宿主细胞内(整合于宿主的组上或以质粒形成独立存在),并随宿主组的而同步,没有成熟噬菌体产生,不引起宿主温和噬菌体的3种存在形式:(1)游离态:指成熟后被释放并有侵染性的游离噬菌体粒子;(2)整合态:已整合到宿主组上的噬菌体核酸,称为前噬菌体(prophage);(3)营养态;指前噬菌体经外界理化因子诱导后, 组而处于积极、合成和装配的状态。溶 染对细胞的影即另一个同源噬菌体虽然可再次该溶源菌,但其核酸不能和表达。而溶源菌可同时被非同源噬菌体,表现出双重溶源性。免疫性是由原噬菌体溶源转变(lysogenicconversion)该新特性是由原噬菌体的所携带的,以与后面所讲的局限转导相区别(局限转导使得受体菌出现新表型的来源于供体菌,噬菌体只是媒介)。整合到宿主上形成溶源态,主要取决于CI蛋白与Cro蛋白的合成及它组的表达与的时序性:的时序性主要表现为T4绍其组的转录的三个阶段:①早期转录:利用大肠杆菌RNA聚合酶转录噬菌体的早期,早期编码的蛋白质为RNA聚合酶的修饰因子或更改蛋白对晚期的转录主要是粒子的结构蛋白和装配所需的各种酶。本授课单元采用教师讲授与多教学相结合的授课方式噬菌体在工应用部分内容,由于在工详细介绍,因此本课程采用方式。第四节一、烈性噬菌体(virulent定义:宿主细胞后能在细胞内正常并引起宿主细胞迅速裂解(temperate定义:宿主细胞后,噬菌体组长期存在于宿主细胞内(整合于宿主的组上或以质粒形成独立存在,并随宿主组的而同步(lysogeny3种:K12为宿主;线状dsDNA12噬菌体是进入裂解循环还是整合到宿主上形成溶源态,主要取决于CI蛋白与Cro蛋白的合成及它们的调控作用。(lysogenlysogenic(或在核组上整合有前噬菌体并能正常生长繁殖而不被裂解的表示:Ecoli免疫性(原噬菌体的同源噬菌体溶源转变(lysogenicconversion):原噬菌体引起的溶源菌除免疫性以第五节真核细胞 一、类定义:低相对分子质量的侵染性RNA、没有蛋白质外壳,亦不具编码的功能,在的细胞内利用宿主酶独立。定义:一类包裹在真粒子中的有缺陷的类(组缺陷,必须依赖辅助才能,但辅助的不需其参与,与辅助基RNA:必须依赖辅助进行的小分子ssRNA片段,它们被包装在辅助的壳体中。三、朊定义:一类不含核酸的侵染性蛋白质分子,通常称为PrP(prionPrusiner提出杂二聚物机制,“蛋白质构象病第七节与发酵工业 噬菌体的

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