(4.6)-第五篇第二十章中成药类

第五篇中成药类

第二十章中成药的鉴定

第一节中成药鉴定概述中成药鉴定(Chinesepatentmedicinesauthentication)就是通过一定的检测手段和方法对其组成进行品种和质量把关，控制中成药的质量。一、古代的中成药鉴定：自古以来，流传着“丸散膏丹，神仙难辨”的说法。许多本草著作都不同程度地反映了中药制剂的质量标准。1、《五十二病方》其成书早于《黄帝内经》，该书中已记载了一些制剂的剂型。2、汉代《伤寒论》、《金匮要略》已较系统地记述了制剂的工艺和标准。3、宋代公元1107年颁布《太平惠民和剂局方》时，中药制剂已经有比较统一的制剂规范。此后，明清的重要著作都不同程度地反映了中药制剂的质量标准。二、近现代中成药鉴定：由于大多数中药的有效成分尚不十分清楚，致使中成药鉴别与质量标准研究工作发展缓慢，随着科学仪器的进步，多学科的协作，中成药鉴别和质量控制也逐渐发展和成熟起来。1、《中国药典》从1977年版开始收载显微鉴别法，对含有原药材粉末的中成药进行定性鉴别，少数品种增加了理化分析，对个别品种按制剂通则要求进行水分、灰分测定，醇溶性提取物的测定及重金属检查等的测定。2、《中国药典》1985年版对中成药鉴别采用了薄层色谱法。3、《中国药典》1990年版中薄层色谱法得到了广泛的应用，并开始应用薄层扫描法和分光光度法对中成药进行含量测定。二、近现代中成药鉴定：

4.《中国药典》1995年版应用薄层扫描法、光谱法进行含量测定的中成药数量增加到9种和18种，并开始应用高效液相色谱法(3种)进行含量测定。5.《中国药典》2000年版用高效液相色谱法进行含量测定的中成药数目达50种，薄层扫描法达30种，分光光度法达25种，并开始应用气相色谱法对4种中成药进行含量测定，使控制中成药质量水平进一步提高。6.《中国药典》2005年版新增中成药116种，并且在上一版药典的基础上增加了中药注射剂安全性检查法应用指导原则。7.《中国药典》2010年版新增中成药499种，大量采用高效液相色谱法进行含量测定，薄层色谱（TLC）鉴别技术，所有含生药粉的中成药都增加了专属性很强的粉末显微鉴别。

8.《中国药典》2015年版新增中成药437种，进一步扩大了对新技术、新方法的应用，以提高检测的灵敏度、专属性和稳定性。三、中成药鉴定（质量控制）的研究与探讨1、中成药原料的鉴定：中成药的原料（中药材）是保证中成药质量的基础，在进行中成药制剂加工前，应首先进行原料药材的鉴定，保证品种准确，质量合格。2、制剂工艺生产过程的质量监控：在中成药生产过程中，要加强中间环节、半成品的质量监控，如提取后进行含量测定，保证提取环节的合格等。3、中成药产品的质量监控：中成药生产完成后，应严格按照其质量标准（国标或厂标）进行质量检验和鉴定。其内容包括：（1）中成药外观鉴定：按照《药典》制剂通则项下之规定，对不同的制剂有不同的鉴定内容。主要有形状、颜色、重量（装量）差异、气味；溶解（崩解）时限等。（2）中成药显微鉴定：仅适用于以中药材粉碎后直接制剂的品种；对提取、过滤制剂的品种不适宜。（3）中成药理化鉴定：对已知中成药主要成分的可进行定性定量鉴定；对由于中成药成分复杂，目前的科学技术尚不能完全分析清楚的，现在多应用色谱技术（TLC、HPLC、GC）等进行理化鉴别；对其成分不详或现有方法不能较好鉴定的，可应用浸出物（醇、水、醚）含量测定方法进行鉴定。（4）中成药生物鉴定：仅限于某些动物药材来源的中成药。（5）中成药安全性鉴定：灰份、水分、重金属含量等第二节中成药的剂型

剂型是指根据临床要求与药物性质，将原料药加工制成便于生产、运输、贮藏与应用的具有一定质量标准的制剂形式。一、固体剂型1、丸剂2、散剂3、颗粒剂蜜丸水蜜丸水丸糊丸蜡丸微丸浓缩丸内服散剂外用散剂硬胶囊剂软胶囊剂肠溶胶囊剂一、固体剂型5、片剂6、微囊剂7、栓剂8、滴丸剂9、膏药10、膜剂（薄膜剂）11、橡胶膏剂12、丹剂13、胶剂14、锭剂全粉末片半浸膏片浸膏片提纯片素片包衣片糖衣片薄膜衣片半薄膜衣片肠溶衣片肛门栓阴道栓黑膏药白膏药二、半固体剂型三、液体制剂四、气体制剂煎膏剂软膏剂合剂口服液酒剂糖浆剂注射剂溶剂型注射剂混悬型注射剂乳浊型注射剂注射用粉针剂气雾剂喷雾剂第三节中成药鉴定常用方法一、定性鉴别中成药的定性鉴别是利用其各单味药的形态、组织粉末特征及所含有的化学成分的结构特性、主要化学反应、光谱特性、色谱特性及某些物理化学常数来鉴别各组成药材的有无及真伪情况。中药复方制剂一般药味较多，逐一鉴别尚有困难，应注意鉴别对象的选择，君药、臣药为主要对象，其次是剧毒药及贵重药。常用的方法主要有显微鉴别法、一般化学反应法、升华法、荧光法、光谱法、色谱法、以及X射线衍射法等。二、含量测定中成药含量测定的原则：对有效成分明确的中成药要进行有效成分的含量测定。2.中成药中某些药材，有效成分大致明确，如生物碱、黄酮、挥发油等，要测定这些成分的总含量。3.对有效成分已知但尚无理想的测定方法的中成药，可以通过对代表性或指标性成分的测定来间接地反映有效成分的含量。如板蓝根颗粒剂以总氮量来控制有效成分氨基酸、靛玉红、吲哚苷的含量。4.对有效成分不明确的中成药，可采用选择一个或几个认为可能的有效成分或主要成分进行浸出物含量测定；测定药物的浸出物量，如水浸出物量、醇浸出物量、乙醚浸出物量等；二、含量测定中成药含量测定的原则：5.选择在加工炮制时或制备、贮藏过程中易损失、破坏的成分进行含量或限度测定，如在含有冰片的制剂中必定要测其含量。6.中成药中若含有剧毒药或药理作用毒性较大的动物药时，要测定其毒性成分的含量。如川乌、马钱子、斑蝥等。7.含人参、麝香、牛黄等贵重药材的中成药应测定贵重药材的含量，以确定贵重药材的投料量。用于中成药含量测定的方法主要有可见－紫外分光光度法、薄层色谱法、高效液相色谱法、气相色谱法、荧光分光光度法、原子吸收分光光度法、库仑滴定法等。三、检查中成药的检查主要包括以下三个方面：一般杂质的检查所谓一般杂质是指在自然界中广泛存在，在多种药材的采集、收购、加工以及中成药的生产、贮存过程中容易引入的杂质，如酸、碱、水分、氯化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、灰分、微生物及残留农药等。它们的检查方法均在药典附录中加以规定。2.特殊杂质的检查特殊杂质是指某些中成药中单独存在的杂质，因其特殊组成而在中成药的制备或贮存时可能产生，其他中成药并非都能产生此种杂质。一般包括对掺假、毒性成分的限量及贮存过程中因理化性质改变而产生的异物的检查等。3.剂型的规定检查在药典的制剂通则中，各种剂型都规定有相应的检查项目。比如丸剂要求测定水分、重量差异、装量差异、溶散时限等，片剂、胶囊剂都要测定崩解时限，注射剂要检查澄明度和不溶性微粒。第四节中成药显微鉴定流程：分析处方工艺取样装片镜检观察分析结果未知显微特征药材单味药材显微鉴定鉴定结论第四节中成药显微鉴定以中药材原粉入药的中成药制剂，如丸、散、膏、丹、片、锭、胶囊等剂型，都可以应用显微鉴别法进行定性分析。一、材料处理

(1)散剂、胶囊剂用刀尖或牙签挑取少量粉末，根据要求装片观察。

(2)片剂刮取全切面或用乳钵研碎取样装片。

(3)水丸用乳钵研成粉末后取少量样品直接透化装片。

(4)蜜丸将药丸切开，从切面中央挑取少量装片，或按四分法刮取不同部位装片。必要时还可配合用水溶解蜜丸，过滤干燥后装片或将蜜丸切碎，加水搅拌洗涤后，置离心管中离心分离沉淀，如此反复处理除去蜂蜜后透化装片。二、制片方法一般采用斯氏液或蒸馏水装片观察淀粉粒；用水合氯醛液加热透化后观察细胞组织特征；用70%乙醇装片或水合氯醛装片不加热观察菊糖。观察时依据所查疑似药的具体情况进行必要的显微化学反应。三、中成药显微鉴别要点(1)了解剂型制法，熟悉组方药材首先要尽可能地了解该药的剂型和制法，分析可能检出的药物有多少。例如牛黄解毒丸中的8味药都是原粉入药，均可检出。故应视具体情况做具体分析，不可一概而论。中成药常含有多种稀释剂、崩解剂、黏合剂、包衣剂、着色剂等辅料，因此也会对显微鉴别产生一定的影响，但只要熟悉它们的显微特征，即可排除干扰。如中成药中常用的蜂蜜均含有花粉粒，应排除其对花类中药的干扰。对于组成药物的显微特征，可分出熟悉的、基本熟悉的和不熟悉的3类，只有熟悉之后，方可灵活应用。对于不熟悉的特征，必须先对照原药材粉末进行研究，寻找、确定主要鉴别特征以便鉴定。(2)排除交叉干扰，明确专属性特征在对各组成药物粉末分析比较时，应分析处方，选取各药在中成药中的专属性特征，作为鉴别依据。因此，单一药材粉末的主要特征在成药中有时不一定能作为鉴别依据，而某些较次要的特征有时则可起到鉴别作用。选取各组成药物显微特征时要考虑到两点：一是所选特征在该处方中的专属性；二是该特征尽可能在处方外的中成药中也要有专属性。一般地说，每味组成药选取1个能代表该药的专属特征即可，如果该特征与其它组成药有类似组织、细胞，内含物或赋形剂有交叉，则应选取其他特征。如果改换其他特征亦较难时，可考虑增加1～2个辅助性特征，但要本着少而精的原则，避免繁乱。(3)熟练正规操作，确保结果准确显微鉴别受主观因素影响较大，要求操作者不仅要有扎实的中药鉴定学理论基础，还要有娴熟的显微观察技能及摄影技术。实验时，每个样品应制备5枚标准片，先重点观察后，再纵向扫描观察30行，每次观察幅宽约0.5mm(有的显微镜可通过自动移动装置控制)。一般可在400倍下照相记录。含细胞后含物较多者，制片静置一周后应复查制片的稳定性。各种显微特征的测定，一般应取20个测量平均值，力求客观。中成药的显微鉴别，分为已知组成样品和未知组成样品两类，以上所述仅为已知处方的样品。至于未知组成样品的鉴别，难度相应增大，但只要掌握大量的单味粉末显微特征，积累丰富的鉴别经验，同样可以逐步解决。鉴别时，为方便观察，还应考虑多种手段的应用。如冰片等粉末显微特征不易确定的组成药材，可用微量升华的方法来解决等。二妙丸ErmiaoWan二妙丸ErmiaoWan【处方】苍术（炒）500g黄柏（炒）500g【制法】以上二味，粉碎成细粉，过筛，混匀，用水泛丸，干燥，即得。【性状鉴别】本品为黄棕色的水丸；气微香，味苦涩。【显微鉴别】取本品，置显微镜下观察：草酸钙针晶细小，长10μm-32μm，不规则地充塞于薄壁细胞中。（苍术）纤维束鲜黄色，周围细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维，含晶细胞壁木化增厚。（黄柏）【功能主治】燥湿清热。用于湿热下注，足膝红肿热痛，下肢丹毒，白带，阴囊湿痒。【用法用量】口服，一次6-9g，一日2次。【理化鉴别】

(1)取本品粉末2g，置具塞试管中，加乙醚10ml，振摇10分钟，分取上清液2ml置具塞试管中，加高锰酸钾试液2滴，振摇1分钟，红色即消失。

(2)取本品0.1g，研碎，加甲醇提取，滤过，作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.1g，盐酸小檗碱对照品，制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，硅胶Ｇ薄层板上，以苯－醋酸乙酯－甲醇－异丙醇－浓氨试液(12:6:3:3:1)为展开剂，置氨蒸气预饱和的展开缸内，展开，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点。

[检查]应符合丸剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。

[含量测定]取本品适量，研细，取约1g，置索氏提取，作为供试品溶液。另取盐酸小檗碱对照品适量，加甲醇制成对照品溶液。照薄层色谱法试验，点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以苯－醋酸乙酯－甲醇－异丙醇－浓氨试液(12:6:3:3:1)为展开剂，置用氨蒸气与展开剂同时预饱和15分钟的双槽展开缸内，展开，取出，晾干，照薄层色谱薄层扫描法，进行荧光扫描，激发波长λ=365nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算，即得。本品按干燥品计算，每1g含黄柏以盐酸小檗碱(C20H17NO4•HCl)计，不得少于3.0mg。

六味地黄丸LiuweiDihuangWan【处方】熟地黄160g山茱萸（制）80g牡丹皮60g山药80g茯苓60g泽泻60g【制法】以上六味药，粉碎成细粉，过筛，混匀。每100g粉末加炼蜜35～50g与适量的水，泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加炼蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸，即得。【性状鉴别】本品为棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味甜而酸。【显微鉴别】取本品，置显微镜下观察：1、淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24µm～40µm，脐点短缝状或人字状。（山药）2、不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化；菌丝无色，直径4µm～6µm。（茯苓）3、薄壁组织灰棕色至深棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物。（地黄）4、草酸钙簇晶存在于无色薄壁细胞中，有时数个排列成行。（丹皮）5、果皮表皮细胞橙黄色，表面观类多角形，垂周壁连珠状增厚。（山萸肉）6、薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群；内皮层细胞垂周壁波状弯曲，较厚，木化，有稀疏细孔沟。（泽泻）【理化鉴别】TLC:

取本品水蜜丸6g，研碎，或取小蜜丸或大蜜丸9g，切碎，加硅藻土4g，研匀。加乙醚40ml，低温回流1小时，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加丙酮1ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹皮酚对照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取上述两种溶液各10μl,分别点于同一硅胶Ｇ薄层板上，以环己烷－醋酸乙酯(3:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以盐酸酸性5％三氯化铁乙醇溶液，加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝褐色斑点。【检查】应符合丸剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。

【含量测定】1.牡丹皮取水蜜丸、小蜜丸5g，精密称定，或取重量差异项下的大蜜丸2g，精密称定。用水蒸气蒸镏，收集馏出液约450ml，置500ml量瓶中，加水稀释至刻度。照分光光度法（附录ⅤA），在274nm波长处测定吸收度，按丹皮酚(C9H10O3)的吸收系数（Ｅ1%1cm）为862计