微生物病毒专题知识讲座

微生物病毒专题知识讲座微生物病毒专题知识讲座第1页1.病毒概念2.病毒大小和形态3.病毒化学组成4.病毒粒子不一样结构回顾病毒粒子微生物病毒专题知识讲座第2页5.病毒群体形态微生物病毒专题知识讲座第3页5.1包含（涵）体

Cowdry-typeinclusionNegribodies一些病毒感染宿主细胞后，在宿主细胞中出现显微镜可见小体狂犬病毒在神经细胞中引发嗜酸性包涵体在细胞质疱疹病毒在细胞核微生物病毒专题知识讲座第4页5.2噬菌斑噬菌斑(plaque)：噬菌体侵染细菌细胞，造成寄主细胞裂解死亡，因而在琼脂培养基表面形成肉眼可见透明小圆斑(“负菌落”)微生物病毒专题知识讲座第5页噬菌斑应用作为噬菌体判定指标用于纯种分离计数——噬菌体效价测定

效价表示每毫升试样中所含有侵染性噬菌体数量，即噬菌斑形成单位(plaque-formingunit,pfu)微生物病毒专题知识讲座第6页5.3空斑和病斑以单层动物细胞受动物病毒侵染产生透明斑为空斑肿瘤病毒感染单层动物细胞，产生细胞剧增，称为病斑微生物病毒专题知识讲座第7页5.4枯斑由植物病毒在植物叶片上形成局部坏死斑，称为枯斑微生物病毒专题知识讲座第8页6.病毒繁殖方式无生长过程，只有基础成份组合核酸复制+蛋白质合成——装配为病毒粒子微生物病毒专题知识讲座第9页6.1噬菌体繁殖吸附——侵入——增殖——装配——释放烈性噬菌体：20-60min完成，引发宿主细胞裂解（E.coliT4噬菌体）温和噬菌体：长时间完成，普通不引发宿主细胞裂解噬菌体（l噬菌体）微生物病毒专题知识讲座第10页T4噬菌体裂解性周期(增殖性周期)吸附侵入增殖装配释放微生物病毒专题知识讲座第11页(1)噬菌体繁殖——吸附尾丝与宿主特异结合，宿主表面有多个吸附位点不一样噬菌体吸附位点不一样，如脂多糖、脂蛋白、磷酸壁、鞭毛等吸附能够受外界条件影响，如阳离子、辅助因子、pH、温度等微生物病毒专题知识讲座第12页每一个敏感细胞所能吸附对应噬菌体数量称为感染复数（m.o.i)m.o.i普通可到达250-360个超大m.o.i可引发自外裂解微生物病毒专题知识讲座第13页T4噬菌体从吸附到侵入只需15s吸附引发构象改变，将核酸注入宿主细胞内假如两种以上侵入，只有一个得以增殖蛋白质外壳留在细胞外尾丝吸附刺突固着尾鞘收缩尾管穿入DNA注入(2)噬菌体繁殖——侵入微生物病毒专题知识讲座第14页噬菌体遗传物质是DNA微生物病毒专题知识讲座第15页Unattachedvirion.Attachmenttothewallbythelongtailfibersinteractingwithcorepolysaccharide.Contactofcellwallbythetailpins.ContractionofthetailsheathandinjectionoftheDNA.AttachmentandPenetration微生物病毒专题知识讲座第16页(3)

噬菌体繁殖——增殖核酸复制蛋白质合成微生物病毒专题知识讲座第17页病毒基因组转录微生物病毒专题知识讲座第18页翻译微生物病毒专题知识讲座第19页病毒基因组复制与表示存在着强烈时序性微生物病毒专题知识讲座第20页(4)

噬菌体繁殖——装配（成熟）微生物病毒专题知识讲座第21页(5)

噬菌体繁殖——释放（裂解）微生物病毒专题知识讲座第22页大量噬菌体吸附于同一宿主细胞表面并释放众多溶菌酶，最终因外在原因而造成细胞裂解现象称之为自外裂解单纯溶菌现象不可能造成大量子代噬菌体产生自外裂解vs裂解微生物病毒专题知识讲座第23页T4噬菌体裂解性周期(增殖性周期)吸附侵入增殖装配释放平均每一个宿主细胞裂解后所产生子代噬菌体数称作裂解量（T4约100）微生物病毒专题知识讲座第24页6.2噬菌体繁殖表征噬菌体效价测定一步生长曲线噬菌斑微生物病毒专题知识讲座第25页噬菌体效价测定——噬菌斑法效价：表示每毫升试样中所含有具侵染性噬菌体粒子数，又称噬菌斑形成单位数（plaque-formingunit，pfu）或感染中心数微生物病毒专题知识讲座第26页较常见且较准确测定效价方法称为双层平板法噬菌体效价测定方法微生物病毒专题知识讲座第27页噬菌体效价测定——双层平板法微生物病毒专题知识讲座第28页微生物病毒专题知识讲座第29页6.2噬菌体繁殖表征噬菌体效价测定有感染力噬菌体粒子数一步生长曲线定量描述烈性噬菌体生长规律试验曲线微生物病毒专题知识讲座第30页少许病毒与敏感细胞接触，病毒吸附后，高倍稀释，继续培养，定时取样测定培养物中病毒效价以感染时间为横坐标，病毒效价为纵坐标，绘制出病毒特征性繁殖曲线，即一步生长曲线一步生长曲线微生物病毒专题知识讲座第31页裂解量：每个受感染细胞所释放产生子代病毒数目裂解量=平稳期平均噬菌斑数/潜伏期平均噬菌斑数潜伏期裂解期平稳期一步生长曲线微生物病毒专题知识讲座第32页温和噬菌体感染细胞后，将其核酸整合到宿主核DNA上，而且能够随宿主DNA复制而进行同时复制，在普通情况下，不引发宿主细胞裂解噬菌体。6.3温和噬菌体和溶源菌微生物病毒专题知识讲座第33页整合到宿主基因组噬菌体—前噬菌体或原噬菌体含前噬菌体宿主——溶源菌溶源菌所特有性质——溶源性6.3温和噬菌体和溶源菌微生物病毒专题知识讲座第34页溶源性周期vs裂解性周期微生物病毒专题知识讲座第35页微生物病毒专题知识讲座第36页产生烈性噬菌体潜在能力：10-2—10-5溶源菌在外界理化因子诱导下，可发生高频率裂解宿主细胞有时能产生新生理特征，如溶源性白喉杆菌产生白喉毒素溶源性表现微生物病毒专题知识讲座第37页游离态成熟后被释放并有侵染性游离噬菌体粒子整合态已整合在宿主基因组上前噬菌体状态营养态指前噬菌体经外界理化因子诱导后，脱离宿主核基因组而处于主动复制、合成和装配状态温和噬菌体三种存在形式微生物病毒专题知识讲座第38页游离态整合态营养态微生物病毒专题知识讲座第39页大肠杆菌l噬菌体E.coliK12(l)大肠杆菌Mu-1噬菌体大肠杆菌P1、P2噬菌体常见温和性噬菌体微生物病毒专题知识讲座第40页进入宿主后线状基因组依靠粘性末端环化温和性噬菌体代表l噬菌体头部呈20面体，尾部弯曲、中空、非收缩性，头尾间有颈部连接关键为线状dsDNA，末端有一由12个碱基组成粘性末端微生物病毒专题知识讲座第41页Video微生物病毒专题知识讲座第42页溶源菌判定少许溶源菌与大量敏感性指示菌(遇溶源菌裂解后所释放温和噬菌体会发生裂解循环)相混合，与琼脂培养基混匀后倒一个平板，经培养后显示出特殊噬菌斑。微生物病毒专题知识讲座第43页6.4植物病毒繁殖植物病毒引发病害在数量上占植物病害第二位由植物病毒引发植物病害植物有：禾本科、茄科、豆科、十字花科和葫芦科等。茄科和十字花科植物有50%病害为病毒病植物病毒也有可利用价值，尤其在开发基因工程载体、转基因植物研究等方面，发挥了很大作用植物病毒共分为9个科(或亚科)，47个属，729个种或可能种（以ssRNA病毒为主）植物病毒对寄主专一性较差微生物病毒专题知识讲座第44页繁殖无吸附阶段，借植物天然创口侵入借带病汁液与植物伤口相接触而侵入借人工嫁接时伤口而侵入借昆虫刺吸式口器损伤植物而侵入6.4植物病毒繁殖微生物病毒专题知识讲座第45页植物病毒借植物细胞间连丝扩散胞间联丝是植物细胞间物质运输通道（20-30nm），植物病毒产生运动蛋白可修饰胞间联丝，使其孔径扩充几倍甚至几十倍，方便侵染性病毒结构经过。6.4植物病毒繁殖微生物病毒专题知识讲座第46页6.5动物病毒繁殖人类传染病70-80%由病毒引发SARS，H1N1，禽流感，艾滋病……人类恶性肿瘤15%由病毒引发微生物病毒专题知识讲座第47页皮肤和颈部癌症乳头状瘤病毒乙肝病毒肝癌微生物病毒专题知识讲座第48页内吞动物病毒繁殖过程与噬菌体有一些差异，如侵入过程微生物病毒专题知识讲座第49页第三章病毒和亚病毒第二节亚病毒微生物病毒专题知识讲座第50页只含有核酸或蛋白质一个成份分子病原体或者是由缺点病毒组成功效不能完整病原体为亚病毒类病毒：只含含有独立侵染性RNA组分拟病毒：只含不具独立侵染性RNA组分朊病毒：只含单一蛋白质组分亚病毒概念和分类微生物病毒专题知识讲座第51页类病毒只含RNA，专性寄生活细胞当前只在植物中发觉类病毒发觉：最早由在美国工作瑞士学者迪纳于1971年在马铃薯纺锤块病中发觉微生物病毒专题知识讲座第52页拟病毒（类类病毒）包裹在真病毒颗粒内有缺点类病毒普通仅由裸露RNA组成，不具侵染活性与拟病毒“共生”真病毒又称