戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用

一、戊型肝炎相关概念及特点戊型肝炎由戊型肝炎病毒（HEV）引发，HEV是单股正链RNA病毒,属于嗜肝病毒科.约占临床散发型肝炎15－20%，戊肝在病毒性肝炎中病死率最高，孕妇病死率可高达20%。传输路径:主要经胃肠道传输，常经过水源和食源暴发或流行,丙球蛋白免疫无效临床症状:厌食、乏力、恶心、巩膜黄染、右上腹部不适、呕吐、肝脏肿大等.其临床症状与甲肝类似。1戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第1页戊肝不一样临床阶段HEV感染指标临床阶段ALTRNAIgMIgG戊肝急性期++++近期隐性感染-+++戊肝恢复期--++既往感染---+2戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第2页HEV-IgM是良好近期感染标志物戊肝病程中各感染指标改变过程清楚显示，HEV-IgM抗体是一个良好戊肝病毒近期感染指标。3戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第3页二.优良诊疗试剂是检测结果准确可靠确保

优质抗原是检测试剂关键！4戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第4页关键:构象抗原现有试剂以线性表位为主重组蛋白或合成肽作为抗原，未能模拟出HEV最主要构象依赖性抗原表位。优质抗原是检测试剂关键!!!5戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第5页2.1HEV基因ORF1主要编码与病毒RNA复制相关非结构蛋白，ORF2为HEV主要结构基因编码区,编码病毒衣壳蛋白，ORF3基因编码产物pORF3为磷蛋白。6戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第6页

试剂关键E2抗原发觉及其特征1998年，用大肠杆菌表示HEV结构蛋白ORF2一个片段(E2)时发觉，该蛋白能够自发形成二聚体，而且二聚体蛋白对戊肝恢复期血清有极强反应性，这一反应性伴随二聚体解聚而消失。WesternBlot(See:JMedVirol,,64:125-132)单体二聚体SDS7戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第7页E2抗原反应性：对戊肝急性期血清和多年后恢复期血清有显著反应，恢复期血清反应性集中在二聚体上。急性期血清(10例)恢复期血清(8例)二聚体E2单体E28戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第8页2.2含有动物模型诊疗试剂(恒河猴HEV感染模型)

感染时间（周）F9HEV感染、发病与抗体发生过程9戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第9页感染时间（周）N2HEV感染、发病与抗体发生过程10戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第10页感染时间（周）F4HEV感染、发病与抗体发生过程11戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第11页献血员中HEV检测：E2-IgM(+)、E2-IgG(-)、GL-IgM和IgG均(-)献血员206血清HEVRNA基因分型I型IV型IV型II型III型12戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第12页206血清可感染猴子13戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第13页5278构象性表位线性表位猴HEV感染过程中各项指标消长分析14戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第14页三.HEVELISA试剂

与

临床急性肝炎诊疗15戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第15页3.1人们对戊型肝炎重视逐步增强

新《中华人民共和国食品安全法实施条例》实施条例对食品安全法中较为标准制度作了详细要求：食品从业者应按章检验戊型病毒型肝炎和甲型病毒性肝炎，同时取消乙肝检测。员工入职新生入校等健康体检也取消了乙肝检测项目。16戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第16页食品从业人员健康体检新试行条例要求食品从业人员健康体检取消了HBV检测项目，新增了HAV-M和HEV-M两种检测项目。IgM抗体检测目标主要是防止近期感染对食品安全威胁。（包含显性感染和隐性感染）颁布了《戊型病毒性肝炎诊疗规范》，用以明确HEV诊疗及治疗。人们对戊型肝炎重视逐步增强。17戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第17页3.2万泰HEV试剂与其它国内外厂家试剂比较18戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第18页3.2.1灵敏度和特异度综合评价

复旦大学公共卫生学院指标正常人群急性戊肝约登指数(%)阴性数/检测数特异度（%）阳性数/检测数灵敏度（%）WTIgM273/273100.047/4897.997.9GLIgM264/27396.735/4872.969.6GLIgG233/27385.445/4893.879.619戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第19页E2IgM+-TotalGL-IgM+29029-286290Total5762119

临床非甲非乙急性肝炎中HEVIgM检出

E2IgM检出率=100%GLIgM检出率=50.8%(香港卫生署公共卫生试验中心)20戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第20页E2IgM与GLIgM在急性肝炎中检出符合情况GLIgME2IgM累计＋－＋7065135－29361390累计99426525

其中58例(89%)抗HAVIgM阳性(复旦大学公共卫生学院)21戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第21页临床阴转血清评价

－新疆戊肝感染10年后血清抗HEV抗体检出1992年全国流调新疆和田HE暴发后3~4年HEVIgG感染率为11.79%(Genelabs)地方病通报

，17（3）：1422戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第22页两种试剂对WHO戊肝标准血清检测比较23戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第23页3.2.2试验室数据PCR+标本总数万泰检出SKH22份22份20份（1份阴性灰区）阳性S/C.O均8.456.8924戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第24页表1：两种试剂对PCR阳性检验

万泰SKH荧光PCR套式PCR编号C.O=0.265C.O=0.253

112.7641.487

+

+142.8291.165

+

+162.9711.026

+

+172.3431.797

+

+172.3431.797

+

+271.5921.218

+

+292.0260.471

+

+333.1541.68

+

+372.8541.423

+

+403.0811.819

+

+422.8371.935

+

+522.1640.103

+

+552.9941.461

+

+592.8511.239

+

+612.9691.752

+

+632.4581.082

+

+680.8630.089

+

+722.8531.601

+

+733.221.726

+

+741.7911.098

+

+741.7911.098

+

+773.2971.816

+

+25戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第25页3.2.3试验室数据PCR+标本总数万泰检出BGD检出16份15份（1份阴性灰）5份（3份阴性灰区）检出百分率93.8%

31.3%

26戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第26页标本编号万泰A值（C.O=0.266）BGDA值（C.O=0.150）PCR背景+/P31.0420.021+WX11.0950.131+WX111.9620.441+WX121.5030.387+WX131.6420.108+WX141.9390.523+WX150.1270.011+WX170.8910.026+WX180.4090.489+WX190.7480.126+WX221.0930.020+WX240.9910.076+WX301.1890.016+WX322.9870.045+WX620.8040.027+WX640.4570.192+M261.0041.084/M280.1520.009/M292.0040.439/M302.0450.897/M311.7910.347/M410.0150.012/P11.7120.311/表2：两种试剂对PCR阳性检验27戊肝诊疗试剂在医院和疾控的应用第27页HEV诊疗指标

(依据戊型病