生物制药工艺学

药物：用于预防，诊断，治疗人的疾病，改善生活质量和影响人体生物学进程的物质。制造而成的一大类药物。抗生素：是指生物在其生命过程中所产生的一类在微量浓度下就能选择性的抑制他钟生物或细胞生长的生理活性物质及其衍生物。的物质。半合成药物：就是对本身是天然是天然药物的结构进行了修改而生成的新药就是半合成药物。需的酶，并通过各种方法使酶发挥其催化功能的技术。的过程。萃取：指利用化合物在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。浓缩：使溶液中溶剂蒸发溶液浓度增大的过程。蒸气的过程。PCR:是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。必需氨基酸：人体蛋白质由20种氨基酸组成，其中有8种氨基酸是人体自身不能合成或合成速度不能满足机体需要，必须从食物中直接获得的。半必需氨基酸：半必需氨基酸是指在一定条件下能代替或节省部分必需氨基酸的氨基酸发酵：细菌和酵母等微生物在无氧条件下，酶促降解糖分子产生能量的过程。产生氨基酸的方法。新型疫苗:是指利用重组DNA技术制备的生物制品。基因治疗：是指将外源正常基因导入靶细胞，以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病，以达到治疗目的。反义RNA:是指与mRNA互补的RNA分子，也包括与其它RNA互补的RNA分子。发热反应，故名热原质。的蛋白质。毒的作用。达到无菌保障水平。无菌：是指在环境中一切有生命活动的微生物的营养细胞及其芽胞或孢子都不存在。防腐：通过采取各种手段，保护容易锈蚀的金属物品的，来达到延长其使用寿命的目的。浸渍：用冷溶液溶出固体材料中的物质。盐溶作用：稀盐溶液可促进蛋白质等生物大分子的溶解。DNA重组药物：是指利用DNA重组技术研制和生产的药物。盐解作用：高浓度盐溶液可促进蛋白质等生物大分子的溶解。DNA组疫苗，反义药物和核酶等。生源：次级代谢产物分子的装配单位的来源。生物合成技术：利用微生物、植物或动物细胞的生命活动而获得所需酶的技术工程。一、谈谈生物药物的特性与分类答）在化学构成上十分接近于体内的正常生理物质，容易为机体吸收利用（）在药理上具有更高的生化机制合理性和特异治疗有效性（3在医疗上具有药理活性高针对性强毒性低、副作用小、疗效可靠（） 原材料中浓度较低（常为生物大分子组成结构复杂，空间构象严格（6）化学与生物学性质不稳定，对各种理化因素敏感，生物活性易受影响分类：天然生化药物、微生物药物、基因工程药物、基因药物、生物制品二、生物活性物质主要有哪些提取方法1pH2、表面活性剂提取法和反胶束提取法、有机溶剂提取（1）固-液提取（浸提）常用于水不溶性的脂类、脂蛋白、膜蛋白结合酶等（2）液-液萃取利用溶质在两个互不混溶的溶剂中溶解度的差异将溶质从一个溶剂相向另一个溶剂相转移的操作。、双水相萃取法三、生物活性物质有哪些主要的浓缩、干燥方法答浓缩方法：1）减压浓缩 通过降压液面压力使液体沸点降低，减压的真空度愈高，液体沸点降得愈低蒸发愈快该法适应于一些不耐热的生物活性物质的浓缩吸取法 利用吸收剂直接吸取除去溶液中的溶剂分子使溶液得到浓缩使用的吸取剂必须与样品溶液不发生反应，对生物活性物质没有吸附作用并且易与溶液分开3）超滤浓缩 应用不同型号的超滤浓缩不同的分子量的生物活性物质干燥方法真空干燥是在密闭容器中抽去空气后进行干燥的方法其原理与减压浓缩相同真空度愈高溶液沸点愈低蒸发愈快该法不适用于不耐高温易氧化物质的干燥和保存冷冻干燥 是将需要干燥的生物活性物质的溶液预先冻结成固体然后在低温低压的条件下从冻结状态不经液态而直接升华除去水分的一种干燥方法。四、简述酸水解法制备L-胱氨酸的工艺路线及注意事项注意事项：水解条件：酸的用量、水解时间和水解温度五、简述胸腺素的性质和工艺路线八、简述白蛋白的制备工艺要点。1．络合将人血泵入不锈钢夹层反应罐内，开启搅拌器，用碳酸钠溶液调PH8.6，在泵入等体积的2%利凡诺溶液，充分搅拌后静置2~4h，分离上清与络合沉淀。2．解离沉淀加灭菌蒸馏水稀释，用0.5mol/l的盐酸调节ph至弱酸性，加0.15%~0.2%氯化钠，不断搅拌进行解离。3.加温充分解离后，65c恒温1h,立即用自来水夹层循环冷却。4.分离充分解离后经离心分离，分离液再用不锈钢压滤器澄清过滤。5.超滤澄清后的滤液用超滤器浓缩6.热处理浓缩液在60c恒温处理10h.7.澄清和除菌以不锈钢压滤器澄清过滤，再通过冷灭菌系统除菌。8．分装白蛋白含量及全项检查合格后，用自动定量罐注器进行分瓶灌装，得白蛋白成品。九、简述胰岛素的结构与性质、作用与用途、提取法制备胰岛素的生产工艺要点以及基因工程技术生产人胰岛素的途径结构：胰岛素原是由一条连接肽）一端与胰岛素的A链的NB51个氨基酸组成。有、BA链21B链30个，两链由两个二硫性质8080%以上丙酮中难溶。在高浓度锌的溶液中pH6～8时胰岛素溶解度急剧下降。作用和用途：它是调节血糖水平的重要激素胰岛素依赖型糖尿病以及糖尿病引起的其十、简述L-天冬酰胺酶和超氧化物歧化酶的性质、作用工艺路线和工艺要点最适pH8.5，最适温度37℃作用：肿瘤细胞本身不能合成天冬酰胺，需依赖宿主供给，外源性天冬酰胺酶能使血液中天冬酰胺分解成天冬氨酸工艺要点：①菌种培养大肠杆菌A.S.1.37537℃24h。②种子培养16%玉米浆接种量1%~1.5%，37℃，4~8h8%，37℃通气搅拌培养6~8h。④菌体干粉制备离心分离发酵液得菌体，加20.01mol/LpH8的硼酸缓冲30℃5mol/lHAc调节滤液中加入2体积的丙酮，放臵3~4h。过滤、集沉淀、自然风干得干粗酶。⑥精制、冻干超氧化物歧化酶(SOD)是一种重要的氧自由基清除剂，作为药用酶在美国、德国、澳大利亚等国已有产品。由于SOD能专一清除超氧阴离子自由基(O2-)，故引起国内外生化界和医药界的极大关注。目前SOD病。此酶属金属酶，广泛存在于动植物、微生物细胞中。十一、简述RNA,DNA的提取与制备的主要方法核酸类药物的生产方法主要有四种、直接提取法、水解法、发酵法；4、合成和半合成法1直接提取法 主要是对ＤＮＡ和ＲＮＡ的生产；提取的ＤＮＡ和ＲＮＡ可以通过酶解制成相应的核苷酸辅酶A也可以采取直接提取法进行生产水解法 核苷酸核苷、碱基都是核酸的降解产物可以通过相应的原料水解制得，水解法有分为酶水解法、碱水解法和酸水解法三种发酵法主要生产单核苷酸和核苷；所用的菌种多数为营养缺陷型菌株如肌苷、肌苷酸的发酵生产合成和半合成法 合成法主要生产核苷碱基类似物如叠氮胸苷阿糖腺苷等的化学合成半合成法即微生物发酵和化学合成并用的方法如用发酵法先制成肌苷再利用微生物的或化学的磷酸化作用使肌苷转变为肌苷酸。十二、利用酶合成法制备三氮唑核苷时如何防止可逆反应影响收率？答：有两种方法可以防止可逆反应（24h培养，收集菌株集体后在60前段及后段反应都利TCA低得多。根据这些原则，使用尿苷、肌苷、黄苷为底物，优秀的菌株是乙酰短杆菌AJ1442，将该菌24h培养的湿细胞加入底物，在反应液100mg/mL，60℃,96h，可获得较高产率到饿三氮唑核苷。十三、简述糖类药物的分类、生理功能答：糖类药物的分类方法有很多种，根据其分子构成一般分为单糖、双糖、多糖。糖类的生理功能供给能量，这是糖类最重要的生理功能。构成机体的重要物质的能量来弥补。（糖尿病）保肝解毒；当肝糖原及葡萄糖充足时，肝对某些化十四、简述肝素的性质、生产工艺、低分子量肝素与未分级肝素的区别肝素(heparin)是一种典型的天然抗凝血药肝素是一种含有硫酸基的酸性黏多糖十五、简述卵磷脂的结构、性质、生产途径、应用性质生产途径：有机溶剂提取法、柱层析法、超临界流体提取法、沉应用：可用于肝炎、脂肪肝及其引起的营养不良、贫血消瘦。十六、简述前列腺素E2的酶转化生产过程①酶的制备原料取-30℃冷冻羊精囊，去除结缔组织及脂肪，操作在低温下进行。②酶转40mg500mg37-381h，3PGPGA和PGE)制备乙醚分33(30-603340℃减压浓缩得黄色油状物即为PG粗品。④分离PGE2每克PG15g100—160PGE2每克PGE220g200-250(1：10)进行柱层析分离。可分别收集PGE1PGE2作用PGE2有促进平滑肌收缩、扩张血管及抑制胃分泌作用，也有松弛支气管平滑肌作用。主要用于治疗哮喘、高血压，也用于催产及早、中期引产。目前多采用羊精囊为酶原以花生四烯酸为原料生产PGE2PGE2结构和性质PGE2PGE268-69℃，溶异构化为PCA2PGB2，后二者紫外吸收最大波长分别为217nm278nm。十七、简述抗生素的定义、常用分类法、应用抗生素是指“在低微浓度下即可对某些生物的生命活动有特异抑制作用的化学物质的总称分类生物来源13、动植物产生的抗生素作用对象分类123456根据化学结构分类1氨基环醇类抗生素2大环内酯类抗生素3四环内抗生素应用用于治疗流行性脑膜炎、细菌性内膜炎、肺炎等农用抗生素杀菌、杀虫、促进生长的作用食品保藏十八、简述医用抗生素应包括哪些主要要求。（1）较大差异毒性，即对人体和正常细胞只是轻微毒性而对某些致病菌或变异肿瘤细胞有较大毒性不大量与体内血清蛋白产生不可逆的结合在给药后能较快的被吸收，并迅速分布至被不易引起过敏反应（6）具备较好的理化性质和稳定性，以利于提取、制剂和储藏pH、通气、搅拌等）下使之生长繁殖，其特点是成本低，周期长，波动性较大等抗生素提取方法：溶剂萃取法：利用溶解度不同的特性；离子交换法；利用阳离子和阴离子特性；吸附法；大孔吸附树脂直接沉淀法：调PH或加有机溶剂。精制：脱色、除热原和结晶二十、简述生物制品的概念与分类接加工制成，或用现代生物技术方法制备的用于预防、治疗和诊断的药品。分类234234重组DNA2制品二十一、什么是机体的抗感染免疫？什么是人工免疫？人工免疫有哪两种方式？人工免疫是经人工接种而使机体主动或被动获得免疫力两种.抗感染免疫人工免疫是经人工接种而使机体主动或被动获得免疫力两种.二十二、简述生产乙肝疫苗的主要途径有哪些？答：主要途径（1）血液乙型肝炎疫苗 血源乙型肝炎疫苗的原材料采自无症状HbsAg带者献血者的血浆。先使冷冻血浆融化，加入CaCl脱去纤维蛋白，加入固体SO或2 2 4饱和SO溶液至相应饱和程度以沉淀HbsAg重组痘苗乙型肝炎疫苗 生成重组2 4痘苗乙肝疫苗所用毒种为重组痘苗病毒TH2株，该株系将编码HbsAg的基因拼接入天坛株痘苗基因组中非必需区的TK基因而获得的，宿主细胞采用鸡胚成纤维细胞（3）重组CHO细胞乙型肝炎疫苗 国内生产重组CHO细胞乙肝疫苗所用细胞种子为重组CHO细胞C28株株系列利用DNA操作技术将编码HbsAg的基因拼接入CHO细胞染色体中而获得重组酿酒酵母乙型肝炎疫苗