白血病免疫分型专家讲座

白血病/淋巴瘤免疫分型临检血液蒋能刚白血病免疫分型专家讲座第1页应用目标：确定淋巴系病变起源和分化程度；判别反应性与克隆性淋巴细胞增生性疾病；确定髓系白血病各亚型；对形态学分类不明细胞进行定性；诊疗急性未分化型白血病；诊疗急性混合细胞白血病；诊疗微小残留白血病或白血病浸润；判断白血病/淋巴瘤预后。白血病免疫分型专家讲座第2页流式细胞术(FlowCytometry):对高速流过检测区单个细胞或生物颗粒进行多参数、快速分析（或分选）一个技术。白血病免疫分型专家讲座第3页白血病免疫分型专家讲座第4页数据显示方式：单参数直方图双参数二维点图等高图二维密度图三维图白血病免疫分型专家讲座第5页单参数直方图双参数点图白血病免疫分型专家讲座第6页荧光素FITC(异硫氰酸荧光素）：530nm（绿）PE（藻红蛋白）：575nm（橙黄）PI(碘化丙啶）：620nm（橙红）PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋白）：675nm（深红）APC(别藻兰蛋白）：660nm（红）白血病免疫分型专家讲座第7页检测物：细胞表面、胞浆或胞核抗原性物质白血病免疫分型专家讲座第8页CD（clusterofdifferentiation）：1982年起将识别同一分化抗原来自不一样试验室单克隆抗体归为一个分化群，并进行流水编号。一个CD相关抗体可包含多个克隆号。其它非CD系列抗原：如TCR、HLA等白血病免疫分型专家讲座第9页正常血细胞中抗原表示特点1.系列保守性2.时序性3.抗原表示量模式化白血病免疫分型专家讲座第10页干细胞嗜碱性细胞嗜酸性细胞定向髓系干细胞红系巨核系粒单核系粒系单核系CD36CD71CD235aCD41CD42a/bCD61CD4CD11bCD14CD64HLA-DRCD36CD15CD71CD16(TDTCD7)CD34CD117CD13CD33CD38MPOCD34CD13CD33CD117MPO白血病免疫分型专家讲座第11页抗原刺激干细胞早前B前B静止期BPro-BALLPre-BALLCommon-BALLCLL/SLL免疫母细胞浆细胞样淋巴细胞大B细胞淋巴瘤淋巴浆细胞淋巴瘤外套细胞滤泡区母细胞中心母细胞中心细胞边缘带细胞浆细胞套细胞淋巴瘤伯基特淋巴瘤大B细胞淋巴瘤滤泡淋巴瘤边缘带淋巴瘤骨髓瘤TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD10±cμ-TDT+CD34+cCD79a+CD19+CD20±CD10+cμ-TDT+CD34±cCD79a+CD19+CD20+CD10±cμ+CD5+CD19+CD20CD22+CD23+sIg+FMC7-CD38CD138CD56cIgCD19-CD45-CD22+CD5-CD10-CD23-CD22+CD10+FMC7+CD23±bcl-2+CD5-CD19+CD20+CD22+CD38+IgM++sIg++CD22+CD10+sIg+CD34-TDT-CD5+CD22+sIg+FMC7+CyclinD1+CD23-CD22+bcl-6+CD10±CD5±CD30±白血病免疫分型专家讲座第12页干细胞胸腺Ⅱ期胸腺Ⅰ期TDT+CD34+CD2cCD3CD7CD71TDT+CD34±CD1aCD2cCD3CD7CD4CD8胸腺Ⅲ期TDT+CD2CD3CD5CD7CD4/CD8TCRPrecursor-TALL成熟T细胞各分化群白血病免疫分型专家讲座第13页造血细胞在其分化、发育过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原有没有、表示强弱与血细胞分化发育阶段亲密相关，表现出与细胞系列及其分化程度相关特征。白血病免疫分型专家讲座第14页白血病细胞中抗原表示特点表示模式基本与对应阶段正常细胞相同，还含有以下特点：1.跨系表示2.时相混乱3.抗原表示量改变白血病免疫分型专家讲座第15页免疫分型四种急性白血病单表型急性白血病表示某一个系列抗原为主急性白血病双表型/双克隆急性白血病未分化型急性白血病白血病免疫分型专家讲座第16页各系急性白血病主要抗原指标1.急性淋巴细胞白血病(AL)敏感性特异性B-ALL:CD19100%非特异cCD79a99%特异T-ALL:CD7100%非特异cCD3100%特异白血病免疫分型专家讲座第17页2.急性髓细胞白血病(AML)表示率特异性CD1370%非特异CD3370%非特异CD11770%特异cMPO70%特异白血病免疫分型专家讲座第18页错译表示（Ly+AML，My+ALL）：白血病细胞表示非本系细胞抗原标志物，含有预后意义。白血病免疫分型专家讲座第19页ALLCD13，CD33 t(9;22)AMLCD2+，DR- M3 t(15;17)，或RAR+， t(11;17)CD2+，DR+ M4Eo inv(16)或t(16;16)

CD19+ M0 t(9:22)多见M2 t(8;21)

TdT+,CD7+ 见于M0CD56+ M5/M4白血病免疫分型专家讲座第20页双表型急性白血病记分系统分值B系T系髓系2cCD79acCD3cMPOCD22TCRαβcIgMTCRγδ1CD19CD2CD117CD10CD5CD13CD20CD8CD330.5TdTTdTCD14CD24CD7CD15CD64白血病免疫分型专家讲座第21页部分慢性B淋巴细胞增殖性疾病免疫表型

CD5CD10CD19CD22CD23HLA-DRFMC7SIgCD11cCLL+-++/-++-++/-PLL--++-+++-MCL+-/+++-+++-HCL--++-++++FCL-+++-/+++/-+-MZL--++-++++/-LPL--++-/++-/+注：HCLCD103+CD25+白血病免疫分型专家讲座第22页部分慢性T淋巴细胞增殖性疾病免疫表型CD2CD3CD5CD7CD4CD8CD25CD56CD57T-CLL/PLL+++++/--/+-T-LGL+++/-+/--+--/++NK-LGL+---+/--+-ATL+++-++肝脾γδT细胞淋巴瘤：CD2+CD3+CD7+TCRγδ+CD16+/-CD56+/-CD8-/+

CD4-TCRαβ-白血病免疫分型专家讲座第23页标本种类：怀疑含有病变细胞组织或体液，如外周血、骨髓、胸腹水、脑脊液、淋巴结等。标本要求：细胞有活性，最好不要超出48h。白血病免疫分型专家讲座第24页光散射特征与细胞形态关系白血病免疫分型专家讲座第25页淋巴单核粒细胞CD45CD45M4/M5M3正常白血病L1~3,M0~2M6,M7TSSCSSCMM非造血起源细胞CD45在免疫分型中应用意义原始嗜碱嗜酸白血病免疫分型专家讲座第26页正常骨髓白血病免疫分型专家讲座第27页AML-M1AML-M2AML-M3AML