蛋白质糖类脂质的实验鉴定

蛋白质糖类脂质的实验鉴定第1页/共26页还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验第2页/共26页实验原理生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。(1)糖类淀粉+碘→蓝色还原糖+斐林试剂50~65℃水浴加热约2min砖红色沉淀(2)脂肪＋苏丹Ⅲ染液→橘黄色脂肪＋苏丹Ⅳ染液→红色(3)蛋白质＋双缩脲试剂→紫色第3页/共26页实验流程(1)还原糖的检测和观察选材：含糖量较高、白色或近于白色的植物组织结论：组织样液中有可溶性还原糖第4页/共26页第5页/共26页在鉴定可溶性还原糖的实验中，加热试管中的溶液时,应该用试管夹夹住试管上部，放入盛50℃～65℃温水的大烧杯中加热。注意试管底部不要接触烧杯底部；斐林试剂不稳定，应现用现配。第6页/共26页(2)脂肪的检测和观察方法一：花生种子匀浆＋3滴苏丹Ⅲ染液→橘黄色方法二：取材：花生种子(浸泡)，将子叶削成薄片结论：花生种子中有脂肪存在第7页/共26页脂肪的鉴定中，实验用的花生种子需提前浸泡3～4h，浸泡时间太短，不易切片；浸泡时间太长，则组织太软，切下的薄片不易成形。第8页/共26页(3)蛋白质的检测和观察选材与制备：鲜肝提取液或黄豆浆滤液

结论：组织样液中存在蛋白质在蛋白质的鉴定实验中，如果用蛋清稀释液作为实验材料，一定要稀释到一定程度，否则，与双缩脲试剂发生反应后会粘在试管的内壁上，使反应不彻底，试

管也不易洗刷干净.第9页/共26页第10页/共26页还原糖、蛋白质的鉴定实验中，在加相应试剂鉴定之前，要留出一部分组织样液，以便与鉴定后的样液颜色作对比，增强实验的说服力。第11页/共26页(1)实验材料的选择由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质，因此在实验的选材上应注意以下两点：①材料本身应无色，以免对结果产生干扰；②材料应富含相关物质，使现象更显著。第12页/共26页(2)斐林试剂与双缩脲试剂的比较斐林试剂双缩脲试剂鉴定成分还原糖蛋白质鉴定原理还原糖中的醛基(—CHO)在加热条件下能将Cu(OH)2中的Cu2＋还原成Cu＋，从而生成砖红色的Cu2O沉淀双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)在碱性溶液中能与Cu2＋结合生成紫色络合物，蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键第13页/共26页斐林试剂双缩脲试剂试剂浓度甲液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；乙液：质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液A液：质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液；B液：质量浓度为0.01g/mL的CuSO4溶液使用方法甲液、乙液混合均匀后，再加入样液先加A液造成碱性环境，再加B液使用条件加热(水浴50～65℃)不加热，摇匀即可实验现象浅蓝色→棕色→砖红色紫色第14页/共26页斐林试剂双缩脲试剂使用方法甲液、乙液混合均匀后，再加入样液先加A液造成碱性环境，再加B液使用条件加热(水浴50～65℃)不加热，摇匀即可实验现象浅蓝色→棕色→砖红色紫色第15页/共26页习题2、连线题：苏丹Ⅲ染液豆浆砖红色沉淀斐林试剂马铃薯汁橘黄色双缩脲试剂葡萄汁蓝色碘液花生子叶紫色基础题

1.（1）√；（2）X。

第16页/共26页典例印证(2010·茂名质检)根据相关实验，回答下列问题：(1)鉴定成熟苹果果肉中存在还原性糖，所用的试剂

是

，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成

沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病人尿液中

的含量。

第17页/共26页(2)鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双

缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。

其中双缩脲试剂B的量只有3～4滴，而不能过量，为

什么？

。第18页/共26页[解析]

还原糖的鉴定试剂常用斐林剂试，也可用班氏试剂，原理是相同的：还原糖的—CHO将Cu(OH)2的Cu2＋还原为Cu＋。在蛋白质鉴定中，NaOH的作用是制造蛋白质与Cu2＋形成络合物的碱性条件，若Cu2＋过量，会与NaOH反应，生成蓝色的Cu(OH)2，干扰现象的观察。[答案]

(1)斐林试剂砖红色葡萄糖(2)过量的双缩腺试剂B会于试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色第19页/共26页利用某些化学试剂能够使生物组织中有关有机化合物产生特定颜色反应的原理和方法，还可以解决以下问题：

(1)对生物组织进行某种成分的检测。

(2)在医学上进行疾病的诊断，如糖尿病、肾炎。

(3)可以鉴定某些消化液中含有蛋白质。

(4)用于劣质奶粉的鉴定。

(5)不同生物组织中含糖量高低的测定。

第20页/共26页1.(2008·广东理基)双缩脲试剂可以鉴定蛋白质，是由于

蛋白质有(

)A.肽键

B.氨基酸

C.羧基

D.氨基第21页/共26页解析：在碱性溶液中，双缩脲(H2NOC－NH－CONH2)能与Cu2＋作用，形成紫色的络合物。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应，从而用来鉴定蛋白质的存在。答案：A第22页/共26页2.(2007·广东理基)下列健康人的4种液体样本中，能与双

缩脲试剂发生紫色颜色反应的是(

)①尿液②胃液③汗液④唾液

A.①③B.①④C.②③D.②④

第23页/共26页解析：双缩脲试剂是用于鉴定蛋白质的试剂，可与蛋白质发生紫色反应。胃液中含有胃蛋白酶，唾液中含有唾液淀粉酶，它们都属于蛋白质。答案：D第24页/共26页3.(2007·江苏高考)若以鸡蛋蛋白液为材料进行蛋白质鉴

定实验，发现蛋白液与双缩脲试剂发生反应后会粘固