蛋白质的结构和功能讲

蛋白质的结构和功能讲第1页/共101页被集体宰杀的疑似疯牛

第2页/共101页疯牛病--Madcowdiseases疯牛病学名牛海绵状脑病，克罗伊茨费尔德—雅各布氏症（简称克－雅氏症），是一种危害牛中枢神经系统的传染性疾病。其典型临床症状为出现痴呆或神经错乱，视觉模糊，平衡障碍，肌肉收缩等。病牛最终因精神错乱而死亡。食用被疯牛病污染了的牛肉、牛脊髓的人，有可能染上.疯牛病曾于80年代中后期在英国大规模流行。以后又蔓延到法国等国家。疯牛病和老年性痴呆症一直以来是发病机制不明的绝症疯牛病因子既不是细菌和病毒，也不是寄生虫。目前能够预防和杀灭感染性细菌、病毒的所有一般性措施都不能有效地消灭“疯牛病因子”。

第3页/共101页疯牛病引起疯牛病和羊瘙痒病病原因子的真正性质目前尚不清楚。疯牛病成因在于金属锰中毒?目前最被认可的理论是一种叫做“Prion”的正常细胞蛋白发生结构变异而造成的，暂且称之为“疯牛病因子”。疯牛病和老年痴呆症的病变蛋白氨基酸序列惊人相似。朊毒体的复制传播都较细菌、病毒更快.利用正常细胞中氨基酸排列顺序一致的蛋白（不利用DNA或RNA)进行复制，其过程不清楚。

日本岐阜大学医学系副教授桑田一夫等在美国《全国科学院学报》上报告说，他们查明了疯牛病病原体———变异普里昂蛋白中有毒部分的结构。由253个氨基酸构成。在正常普里昂中，氨基酸链扭曲折叠成一种称为“阿尔法(a)螺旋构造”的特殊结构，这种结构比较脆弱，容易发生变异。变异普里昂则具有非常稳定的“贝塔(ß)板状或片层构造”，它能够促使正常普里昂发生变异，形成粉状纤维，杀死神经细胞。第4页/共101页蛋白质结构异常与分子病

分子病(MolecularDiseases)

结构异常;分子减少或缺失

举例:

结构异常镰刀状细胞贫血(Sicklecellanemia)—HbSß亚基第6位谷 aa变成疏水的缬aa.

分子减少或缺失蚕豆病(favism)葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏.家族性高胆固醇血症

LDL-receptor缺乏.痛风症(gout)磷酸核糖焦磷酸合成酶缺乏

白化症(albinism)

酪氨酸酶缺乏

糖尿病胰岛素缺乏构象病折叠错误导至功能改变

如：帕金森氏病，Alzheimer’s病,Madcowdiseases.第5页/共101页第一篇蛋白质蛋白质的结构和功能脂蛋白糖蛋白与蛋白聚糖细胞外基质蛋白质(自学)蛋白质的转运、加工与修饰(自学)第6页/共101页

第一章

蛋白质的结构与功能

第7页/共101页蛋白质的一至四级结构第8页/共101页生物大分子(分子量从104~1012道尔顿不等)蛋白质主要的结构和功能分子核酸

遗传信息的载体多糖

提供能量第9页/共101页

第一节组成蛋白质的氨基酸

氨基酸的结构特点

1.与羧基相邻的α-碳原子上都有氨基(Pro除外)

2.除Gly外，所有α-氨基酸的α-碳原子均为不对称性碳原子(asymmetric)或手性碳原子（chiral）

α第10页/共101页氨基酸的分类非极性疏水氨基酸：侧链为非极性疏水基团，如脂肪烃或芳香烃不解离的极性氨基酸：侧链中含不解离的极性基团，如巯基、羟基和酰胺基团解离的极性氨基酸：

a.酸性氨基酸：侧链中有羧基

b.碱性氨基酸：侧链中有碱性基团第11页/共101页H3N+CHRCOOHCNH3+RCOOL-α-氨基酸D-α-氨基酸

α-氨基酸的两种构型构型：指在立体异构体中取代原子或基团在空间的取向。构型的改变涉及共价键的破裂和重建。第12页/共101页

两种结构特殊的氨基酸CH2CH2CH2CHNHCOOH脯氨酸(Pro）HCCOOHNH2H甘氨酸(Gly)第13页/共101页第二节蛋白质的一级结构

（primarystructure）

基本概念

肽键/肽/二肽/多肽第14页/共101页肽链/氨基酸残基/主链与侧链

CCαRNH2CαRNHOHHCαRNHHCOCOOH氨基酸残基N-末端C-末端

一级结构：指多肽链中氨基酸的排列顺序， 稳定因素：肽键第15页/共101页蛋白质的空间结构

构象／高级(2;3;4)结构构象(conformation)

指构成分子的原子和基团因为化学键的旋转而形成在三维空间上不同的排布、走向。构象的改变不涉及共价键的破裂，仅涉及氢键、疏水键等次级键的变化。第16页/共101页定义稳定因素：氢键基本类型：

α-螺旋和β-折叠（有规则）

β-转角和Ω环（部分有规则）无序结构第三节蛋白质的二级结构

（secondarystructure）

第17页/共101页蛋白质的二级结构第18页/共101页氢键第19页/共101页1,肽平面（peptideplane）与二面角肽单元(peptideunit)／酰胺平面(amideplanes)CαCαOCNHCαCα

-OCN+H第20页/共101页肽键具有部分双键的性质第21页/共101页第22页/共101页

二面角(构象角)（dihedralangle）连结两个相邻肽平面的Cα产生的角

a.单键的旋转角度Cα-C:Ψ（psi）

Cα-N:Φ（phi）

b.二面角决定了两个相邻肽平面的空间相对位置第23页/共101页肽平面,二面角(构象角)第24页/共101页Ⅰ型(反式)Ⅱ型(顺式)第25页/共101页2,α-螺旋（α-helix）

结构特征：以3.613螺旋为例第26页/共101页

3.613螺旋a.3.6指每圈螺旋含3.6个残基b.13表示氢键封闭的环内含13个原子

(氢键在第一个肽键的亚氨基-NH的H原子与其前方第四个肽键的羰基C=O的O原子之间形成)CCαRNOHHNHCOn=3第27页/共101页其它局部螺旋

α-左手螺旋

310

-螺旋

4.416-螺旋(π螺旋)第28页/共101页左手超螺旋（left-handedsuperhelix）第29页/共101页

影响α-helix结构的因素a.甘氨酸,脯氨酸b.侧链R基的大小：过大，产生空间位阻过小，空间占位太小c.带同种电荷的R基临近：

产生静电排斥，不能形成氢键

第30页/共101页

两种结构特殊的氨基酸CH2CH2CH2CHNHCOOH脯氨酸(Pro）HCCOOHNH2H甘氨酸(Gly)第31页/共101页

3,β-折叠（β-pleatedsheet）结构特征肽平面折叠成折扇状,链内或链间氢键相连,排成片层结构第32页/共101页反向平行顺向平行第33页/共101页4,β－转角与Ω环

β－转角(β－turn）

结构特征a.通常由4个氨基酸残基,三个肽单元构成,甘氨酸转角,脯氨酸转角b.第1个氨基酸残基的C=O与第4个氨基酸残基的NH形成氢键c.多数位于球状蛋白质分子的表面d.常为磷酸化或N-糖基化的位点e.分型：I型(反式)和II型(顺式)第34页/共101页Ⅰ型(反式)Ⅱ型(顺式)第35页/共101页Ω环（Ωloop）结构特征：a.由6~16（常为6~8）个氨基酸残基组成，外形象“Ω”。b.常见残基有Gly、Pro和Tyr，和亲水性的Asp、Asn和Serc.常位于蛋白质分子表面，是识别配体和分子进化突变的位点第36页/共101页5,无序结构对一种确定的蛋白质而言，无序结构的长度和方向是一定的含有Lys、Arg等氨基酸残基,常与蛋白质的结合功能和催化功能有关第37页/共101页二级结构与一级结构的关系各种氨基酸残基并非均匀地分布在所有类型的二级结构中

P9图案1--5第38页/共101页各种氨基酸残基在不同的二级结构中出现的频率不同

a.形成α-螺旋能力强的氨基酸有：Glu、Met、Ala、Leu

b.形成β-折叠能力强的氨基酸有：Val、Ile、Tyr

c.形成β-转角能力强的氨基酸有：Pro、Gly、Asn、Asp、Ser第39页/共101页第四节蛋白质的超二级结构和结构域超二级结构（supersecondarystructure）定义：几个二级结构组合而成，又称基序or模体（motif）类型：αα(EFhand;Leucinezipper)

ββ

βαβ第40页/共101页αα组合EF手型（EFhand）

第41页/共101页细胞色素C的αα结构

αα是一种α螺旋束,经常是由两股平行或反平行排列的右手螺旋段相互缠绕而成的卷曲螺旋或称超螺旋第42页/共101页亮氨酸拉链（leucinezipper）

第43页/共101页ββ组合第44页/共101页纤溶酶原的ββ结构反平行β折叠片在球状蛋白质中由一条多肽链的若干段β折叠股反平行组合而成,两个β股之间通过一个短回环(发夹)连接起来。第45页/共101页βαβ组合

特点:

由两股平行的β-链通过一条α-螺旋和两个环连接而成。整个结构呈松散的右手螺旋。

第46页/共101页细胞核抗原的βαβ结构

最常见的βαβ组合是由三段平行的β股和两段α螺旋构成,相当于两个βαβ单元组合在一起,称Rossman折叠(βαβαβ)。由于L-氨基酸的伸展多肽链(β股)倾向于采取右手扭曲结构产生几乎所有连接链都是右手交叉,第47页/共101页锌指结构(螺旋-折迭-折迭模序)第48页/共101页转录因子MyoD的螺旋-环-螺旋模序第49页/共101页Rossman折叠(Rossmanfold)两个连续的βαβ单元共享一个β折叠

四螺旋捆绑(four-helixbundle)两个αα单元由松散结构连接在一起第50页/共101页蛋白质的结构域（domain）

定义：超二级结构进一步组合折叠成半独立紧密的球状类型：

1,平行α/β型

2,反平行β-型

3,全α-型

4,小的不规则结构第51页/共101页结构域（domain)

1,平行α/β型

特点：a.由α-螺旋和β-折叠交替连接成多层结构，平行β-折叠片层在内，α-螺旋覆盖在外b.平行β-片层的疏水侧链分布于片层的两侧两种基本型

(1)单绕平行β-筒

(2)双绕平行β-片层第52页/共101页结构域（domain）

第53页/共101页(1)单绕平行β-筒

（singlywoundparallelβ-barrel）特点：中心部分由平行的β-链组成内筒，周围由α-螺旋以右手交叉的连接方式沿同一个方向逐个连接β-链形成外筒举例：磷酸丙糖异构酶第54页/共101页单绕平行β-筒---磷酸丙糖异构酶第55页/共101页(2)双绕平行β-片层（doublywoundparallelβ-sheet）特点：多个平行的β-链右手扭曲成马鞍形，α-螺旋分别沿两个不同的方向连接相邻的β-链而分布在β-片层的两侧举例：乳酸脱氢酶

第56页/共101页双绕平行β-片层--乳酸脱氢酶

第57页/共101页结构域（domain)

2,反平行β-型

特点：a.主要由反平行β-链组成b.反平行β-片层的疏水侧链位于片层的一侧，而另一侧具有亲水性希腊花边β-筒

升降β-筒第58页/共101页(1)希腊花边β-筒特点：一条伸展的多肽链往返缠绕，方向类似希腊花边，而相邻的各β-链反向平行第59页/共101页(2)升降β-筒特点：

由相邻的反平行β-链以发夹连接形成升降式的筒形结构

第60页/共101页3,全α-型(1)升降螺旋束特点：相邻的反向排列的αα基序首尾相连，形成左手扭曲的筒形螺旋束第61页/共101页(1)左手扭曲的升降筒形螺旋束第62页/共101页(2)希腊花边螺旋束特点：连续的αα基序相互垂直地折叠起来，形成回形花边myoglobin第63页/共101页4,小的不规则结构

特点:

分子量小,富含金属或半胱氨酸,分子构象易受其金属辅基或二硫键的影响第64页/共101页第五节蛋白质的三级结构

(Tertiarystructure)定义在二级结构，超二级结构及结构域基础上，一级结构相隔较远的aa残基以次级键相连，盘旋折叠成特定空间排布．稳定因素：侧链R基团之间相互作用形成的各种非共价键，包括疏水键、氢键、离子键和范德华力等举例：肌红蛋白（myoglobin,Mb）

p17Picture1-19第65页/共101页蛋白质分子中的非共价键

a.氢键：分子两极一端具有正电性，另一端具有负电性，由于这一特点两个分子间有静电引力，此类引力称为氢键

b.非极性疏水键：疏水基团在水中聚集成簇的凝聚力

c.离子键：异性电荷间的静电引力所形成的键

d.范德华力：分子中原子与原子之间的相互作用力（吸引力）

第66页/共101页稳定蛋白质三维结构的作用力

第67页/共101页第68页/共101页盐键又称盐桥或离子键，它是正电荷与负电荷之间的一种静电相互作用

第69页/共101页稳定蛋白质三维结构的作用力第70页/共101页胰岛素的三级结构

第71页/共101页溶菌酶分子的三级结构

第72页/共101页血红素结构第73页/共101页血红蛋白结构第74页/共101页第75页/共101页第四节蛋白质的四级结构定义

组成单位：亚基稳定因素：主要靠疏水键，氢键和离子键也参与维持四级结构的稳定举例：血红蛋白（hemoglobin,Hb）第76页/共101页血红蛋白的四级结构第77页/共101页血红蛋白不同亚基间的盐键（离子键）第78页/共101页血红蛋白的四级结构

第79页/共101页紧密型（T）松弛型（R）第80页/共101页蛋白质的四级结构亚基的立体排布

第81页/共101页第五节蛋白质的结构和功能的关系一,1,蛋白质变性（denaturation）与复性(renaturation)定义：物理化学因素使理化性质变化,生物学功能降低或改变实质：破坏维系蛋白质空间构象的次级键，但不涉及一级结构的改变

举例：牛胰核糖核酸酶的可逆变性实验第82页/共101页第83页/共101页２，蛋白质前体的激活

定义：举例：胰蛋白酶原的激活生理意义：

a.避免自身消化b.具有级联反应性质，可使信号放大第84页/共101页胰蛋白酶原的激活过程第85页/共101页第86页/共101页

二，同源蛋白质的进化同源蛋白质（homologusprotein）不变残基可变残基举例:细胞色素c

不变残基:35个，占人细胞色素c的1/3，可变残基:物种之间亲缘关系越远的，可变残基的差异越大第87页/共101页三，蛋白质家族与超家族

蛋白质家族（family）

>50%aa相似，空间结构和功能相似蛋白质亚家族(subfamily)同家族中>８０%aa相似蛋白质超家族（superfamily）

属俩个以上的家族来源:

同一祖先趋异（divergent）或不同祖先趋同（convergent）进化而来第88页/共101页四，蛋白质变构例如：血红蛋白结构aaßß

第一个亚基结合Ｏ2后，紧密型变构为松弛型，促进其余亚基与Ｏ2结合，称为正协同效应．

此类蛋白通称变构蛋白可在变构剂诱导下变构，并改变活性，是细胞内快速代谢调节的主要方式之一．第89页/共101页第90页/共101页血红