检验仪器的性能评价专家讲座

DepartmentofLaboratoryMedicine第一部分

性能验证

王全哲课件编号:JYK-K-03-01年检验仪器的性能评价专家讲座第1页DepartmentofLaboratoryMedicine性能验证何时进行性能验证性能验证项目怎样作性能验证检验仪器的性能评价专家讲座第2页DepartmentofLaboratoryMedicine何时做性能验证CLIA`88法案：改进或更换系统时、改变试剂时、增加新项目时。ISO15189：进行能力验证时，对设备、系统与方法进行性能验证。《临床试验室管理方法》临床试验室应对检测系统性能进行验证。仪器进行系统性维修后。检验仪器的性能评价专家讲座第3页DepartmentofLaboratoryMedicine性能验证包含哪些项目1

精密度2准确度3可汇报范围4参考区间5灵敏度6特异性检验仪器的性能评价专家讲座第4页DepartmentofLaboratoryMedicine怎样做性能验证1

配套系统

2自建系统检验仪器的性能评价专家讲座第5页DepartmentofLaboratoryMedicine配套系统1

精密度2准确度3可汇报范围4参考区间检验仪器的性能评价专家讲座第6页DepartmentofLaboratoryMedicine自建检测系统1精密度2准确度3可汇报范围4参考区间5灵敏度6特异性检验仪器的性能评价专家讲座第7页DepartmentofLaboratoryMedicine精密度验证定义：相同检测条件下，对某一标本进行重复检测，所得测量值离散程度。要求：包含批内与日间精密度试验检验仪器的性能评价专家讲座第8页DepartmentofLaboratoryMedicine精密度验证详细方法1.1批内精密度：取同一份标本插入病人标本中，重复检测20次，计算SD、CV值，可接收范围：Tea/4为经过。1.2日间精密度，每日检测同一份标本5次，非一日完成四次检测，共20次，计算SD、CV，可接收范围Tea/3为经过。检验仪器的性能评价专家讲座第9页DepartmentofLaboratoryMedicine准确度验证定义：指测量结果与被测量值靠近程度。方法：①参考方法比较

②应用参考物质

③回收试验。检验仪器的性能评价专家讲座第10页DepartmentofLaboratoryMedicine准确度验证2.1参考方法比较取材：20个结果分布于可汇报范围内标本，使用参考方法与系统使用方法进行检测，计算相对偏倚，符合厂家说明。2.2应用参考物质：参考物质：质控品、标准品（非系统使用批）、已经过能力验证质控标准物质（室间质评品）。

可接收范围：偏倚值在参考物质允许范围为经过。2.3回收试验：配制已知浓度样品，比较结果与预期值，可接收范围90-110%。检验仪器的性能评价专家讲座第11页DepartmentofLaboratoryMedicine可汇报范围

可汇报范围等同于测量范围，部分系统与线性范围一致。测量范围：测量误差处于允许极限（变异系数小于10%）测量分布于高、低值界限内范围。可汇报范围：检测系统对病人结果检测范围。线性范围：试验系统最终分析结果为可接收线性浓度范围，此时非线性误差应低于允许误差。检验仪器的性能评价专家讲座第12页DepartmentofLaboratoryMedicine线性范围验证验证前准备：

操作人员熟练操作系统，能对标本进行正确处理；仪器状态：性能指标与标称值相符，有很好精密度不存在显著携带污染率；

同批号合格试剂；

标本，无显著干扰检测结果原因；

标准品，配套或经验证可用；

标本数量，如为新建需9-11个浓度，如为验证或评价，只需4-6个样本。检验仪器的性能评价专家讲座第13页DepartmentofLaboratoryMedicine验证方法：

标本制备：浓度范围，预期测定值范围内并包含与临床相关主要评价浓度。

通常取最大浓度与最小浓度标本按百分比配比法制备。样品号编号1（ml）编号2（ml）编号3（ml）编号4（ml）编号5（ml）低浓度血清5.003.752.501.250.00高浓度血清0.001.252.503.755.00线性范围验证检验仪器的性能评价专家讲座第14页DepartmentofLaboratoryMedicine线性范围验证

测量：每个样本重复检测3-4次，随机检测，双盲测定，最好一天内完成。样品号第一次第二次第三次第四次均值12345检验仪器的性能评价专家讲座第15页DepartmentofLaboratoryMedicine线性范围验证剔除离群值

方法：采取Crubbs法，单个离群值不需重测，多个值或数据过于分散应查找原因，纠正后重测。（剔除水平α*值应不超出检出水平α值，除非另有约定，α*值应为0.01）。检验仪器的性能评价专家讲座第16页DepartmentofLaboratoryMedicine线性范围验证数据处理

方法：采取SPSS或SAS。回归分析：回归方程线性检验价数多项式Rdf一阶Y=b0+b1X2二阶Y=b0+b1X+b2X23三阶Y=b0+b1X+b2X2+b3X34数学模型：一阶、二阶、三阶方程如拟合最优方程为多阶，则验证能否采取一阶式方程，需采取t检验，计算t值，t=bi/Sei;计算n值，n=LxR-Rdf，双边检验，a=0.05,如b3、b2经检验P>0.05无显著性差异则可用一阶方程，如P<0.05为有显著性差异，则进行下一步检验，即“非线性程度判断”—临床标准线性与非线性检验。检验仪器的性能评价专家讲座第17页DepartmentofLaboratoryMedicine线性范围验证“非线性程度判断”—临床标准线性与非线性检验。计算ADL值，查ADL表，拟合方程为多阶性，不然为不可接收非线性。数据精密度检验检验仪器的性能评价专家讲座第18页DepartmentofLaboratoryMedicine参考区间参考区间1验证取20份标本，检测如有95%结果在区间内为合格，如未到达需扩大标本量60（大样本验证）。2参考区间制订2.1个体选择，考虑原因：饮酒、献血、血压、疾病、妊娠与哺乳、药品、肥胖、吸毒、特殊职业、环境、饮食、近期有没有手术、吸烟、遗传原因、输血史、滥用维生素、运动等。2.2分组：年纪、性别、血型、种族、昼夜节律、取样时状态及时间、月经周期、妊娠、运动、饮食、吸烟、职业、其它。检验仪器的性能评价专家讲座第19页DepartmentofLaboratoryMedicine参考区间

主体准备样本采集样本处理饮食进食与禁食药品禁忌药品摄取生物节律身体活动采集前休息压力与情绪采集环境时间身体姿势标本类型采集地点采集准备血流仪器和技术运输方式标本状态分离储存分析前准备试剂检测系统检验仪器的性能评价专家讲座第20页DepartmentofLaboratoryMedicine参考区间系统要求：质评、质控、精密度与准确度验证、溯源性证实离群值剔除：D/R大于等于R/3。最小标本量120例，如需分组，每组120例。（90%置信区间）198例为99%置信区间。参考区间确定：正态分布：均值加减1.96S（95%数据分布）、均值加减2.58S（99%分布范围）非正态分布：取P2，S到P98，S分组：如S2>1.5S1或S2/S2-S1<3或Z>Z*需分组。检验仪器的性能评价专家讲座第21页DepartmentofLaboratoryMedicine自建系统性能验证定义：试验室依据自已意愿选定仪器、试剂与操作程序等组成检测系统。验证项目：分析灵敏度、准确度、精密度、可汇报范围、分析特异性（干扰）、校准与质控方法。检验仪器的性能评价专家讲座第22页DepartmentofLaboratoryMedicine灵敏度验证分析灵敏度包含：最低检测限LLD、生物检测限BLD、功效灵敏度FS功效灵敏度定义为：以天间重复CV为20%时对应检测限样品含有平均浓度。标本准备：用稀释液作空白，将标准品围绕最低检测限制成浓度梯度制备液，分别检测10次，空白日内10次X均值SD制备液1日间10次X均值SDCV值制备液2X均值SDCV值制备液3X均值SD如：CV值=20%FS检验仪器的性能评价专家讲座第23页DepartmentofLaboratoryMedicine携带污染率取高低值标本各一份依次测高值3次(i1，i2，i3)、低值3次(j1，j2，j3)，计算各自携带污染率:携带污染率(%)=(j1-j3)/(i3-j3)×100%。

特异性试验将可疑干扰物质加入到检测标本（浓度），以有没有偏倚为检验标准，如有干扰，确度干扰物浓度范围。检验仪器的性能评价专家讲座第24页DepartmentofLaboratoryMedicine第二部分

临床血液学分析质量要求王全哲课件编号:JYK-K-03-01年检验仪器的性能评价专家讲座第25页DepartmentofLaboratoryMedicine质量管理血液分析仪

仪器本底：检测项目WBCRBCHbPlt检测要求≤0.5x109/l≤0.05x1012/l≤2.0g/l≤10x109/l验证方法：用稀释液作为样本连续检测3次，最大值应在此范围内。检验仪器的性能评价专家讲座第26页DepartmentofLaboratoryMedicine质量管理血液分析仪

携带污染率验证方法：取高低浓度样本，连续进行检测，先检测高浓度样本3次连，再检测低浓度样品3次。检测项目WBCRBCHbPlt检测要求≤3.0%≤2.0%≤2.0%≤4.0%检测项目结果1结果2结果3高值H1H2H3低值L1L2L3检验仪器的性能评价专家讲座第27页DepartmentofLaboratoryMedicine质量管理样本浓度要求检测项目WBCRBCHbPlt高值>9.0x10*9/L>6.2x10*12/L>220g/L>900x10*9低值<3<1.5<50<30检验仪器的性能评价专家讲座第28页DepartmentofLaboratoryMedicine质量管理批内精密度要求。取合格标本一份，重复检测11次，取后10次检测值，计算CV。检测项目测量范围变异系数WBC4-1010*9/L≤4%RBC3.5-5.510*12/L≤2%Hb110-160g/L≤1.5%Hct35-55%≤3%PLT100-30010*9/L≤5%MCV80-100fl≤2%MCH27-34pg≤2%MCHC320-360g/L≤2%批内精密度日间精密度要求。室内质控数据，剔除失控数据，统计CV。检测项目变异