医院感染监测标本采集的标准操作

感染监测标本采集标准操作向霞医院感染监测标本采集的标准操作1/70医院感染病例监测消毒灭菌效果监测抗菌药品及耐药菌监测消毒药械一次性医疗用具及其它监测环境卫生学监测医院感染监测医院感染监测标本采集的标准操作2/70环境卫生学监测范围空气物体表面医护人员手灭菌后物品使用中消毒剂及灭菌剂医院感染监测标本采集的标准操作3/70制作依据《医务人员手卫生规范》WS/T313-中华人民共和国卫生部-12-01实施《医疗机构消毒技术规范》WS/T367-中华人民共和国卫生部-08-01实施《洁净手术部建筑技术规范》修订稿GB50333-中华人民共和国国家标准《医院消毒卫生标准》GB15982—中华人民共和国国家标准医院感染监测标本采集的标准操作4/70环境卫生学监测目标监测消毒效果是否到达标准要求，追寻消毒方法是否正确（消毒设备是否功效完好，消毒剂浓度、质量是否达标），确保医疗环境安全。医院感染监测标本采集的标准操作5/70规范采集标本意义只有标本采集正确，培养结果才可能正确。才能正确指导消毒隔离办法落实。医院感染监测标本采集的标准操作6/70医院空气消毒与监测医院感染监测标本采集的标准操作7/70

当前普通科室取消常规空气监测重点科室有针对性采样监测医院感染监测标本采集的标准操作8/70空气净化效果监测频率手术室产房导管室洁净病房器官移植病房ICU新生儿室母婴同室血透烧伤病房常规：每季度监测一次暂时：遇医院感染暴发怀疑与空气污染相关时随时进行监测洁净手术部及其它洁净场所，依据洁净房间总数，合理安排每次监测房间数量，确保每个洁净房间能每年最少监测一次洁净手术部(室)及其它洁净场所.新建与改建验收时以及更换高效过滤器后应进行监测

医院感染监测标本采集的标准操作9/70惯用空气消毒方法通风1集中空调通风系统2空气洁净技术3紫外线消毒4空气消毒器5化学消毒法6

医院感染监测标本采集的标准操作10/70通风自然通风机械通风机械送风与自然排风自然送风与机械排风机械送风与机械排风医院感染监测标本采集的标准操作11/70紫外线消毒适合用于无人状态下室内空气消毒没有连续作用需要一定时间、强度医院感染监测标本采集的标准操作12/70消毒方法保持紫外线灯表面清洁，每七天用75％－80％酒精擦拭一次。发觉灯管表面有灰尘、油污时，应及时擦拭。紫外线灯消毒室内空气时，房间内应保持清洁干燥，降低尘埃和水雾。温度<20℃或>40℃时，或相对湿度>60％时，应适当延长照射时间。室内有些人时不应使用紫外线灯照射消毒。紫外线灯采取悬吊式或移动式直接照射。灯管吊装高度，距离地面1.8m-2.2m。安装时紫外线灯照射强度应≥1.5W/m3，照射时间≥30min。紫外线消毒医院感染监测标本采集的标准操作13/701m5min1min紫外线强度照射指示卡监测法医院感染监测标本采集的标准操作14/70注意事项测定时电压220V±5V，温度20℃-25℃，相对湿度＜60%，紫外线辐照计应在计量部门检定使用期内使用；指示卡应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在使用期内使用。结果判定使用中紫外线灯照射强度≥70μW/cm2为合格；30W高强度紫外线新灯辐射强度≥180μW/cm2为合格。紫外线消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作15/70紫外线消毒每六个月监测一次各科室负责监测医院感染管理科负责审核医院感染监测标本采集的标准操作16/70空气消毒器作用原理适用范围注意事项过滤、紫外线、静电吸附、等离子体、光触媒适合用于有些人状态下室内空气消毒消毒时应关闭门窗；进风口、出风口不应有物品覆盖或遮挡。医院感染监测标本采集的标准操作17/70采取洁净技术净化空气房间在洁净系统自净后与从事医疗活动前采样未采取洁净技术净化空气房间在消毒或要求通风换气后与从事医疗活动前采样怀疑与医院感染暴发相关时采样空气消毒效果监测采样时间医院感染监测标本采集的标准操作18/70空气消毒效果监测监测方法洁净手术部（室）及其它洁净用房可选择沉降法或浮游菌法进行监测。浮游菌法可选择六级撞击式空气采样器或其它经验证空气采样器。监测时将采样器置于室内中央0.8m-1.5m高度，按采样器使用说明书操作，每次采样时间不应超出30min。房间面积＞10m2者，每增加10m2增设一个采样点。医院感染监测标本采集的标准操作19/70空气消毒效果监测将普通营养琼脂平皿（Φ90mm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m-1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露要求时间后盖上平皿盖及时送检。医院感染监测标本采集的标准操作20/70空气消毒效果监测未采取洁净技术净化空气房间采取沉降法：室内面积≤30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；室内面积＞30m2，设四角及中央五点，四角布点位置应距墙壁1m处。医院感染监测标本采集的标准操作21/70√手臂越过平皿×皿盖朝上×√医院感染监测标本采集的标准操作22/70洁净手术部（室）和其它洁净场所，空气中细菌菌落总数要求应≤4cfu/(30min·直径9cm平皿)非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中细菌菌落总数≤4cfu/(15min·直径9cm平皿)儿科病房、母婴同室、妇产科检验室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中细菌菌落总数≤4cfu/(5min·直径9cm平皿)空气消毒效果监测结果判定医院感染监测标本采集的标准操作23/70注意事项1、采样前，关好门、窗，在无人走动情况下，静止10分钟进行采样医院感染监测标本采集的标准操作24/702、※放置平皿时，放置次序是从里往外放，收起时候是从外往里收，这么防止人员走动引发空气中漂浮粒子震荡引发结果偏高。医院感染监测标本采集的标准操作25/70空气净化目标经过空气净化创造一个温度、湿度适宜，空气清新，无菌、洁净微环境，将室内整个环境设施、器械进行科学地组构，使秩序性、方便性、安全性、清洁性和无菌程度都到达一个理想高度，为手术成功提供保障。医院感染监测标本采集的标准操作26/70监测状态医院感染监测标本采集的标准操作27/70对于消毒效果监测，都做静态检测。普通动态检测只是作为参考，惯用于一些课题研究等，因为每个人动作幅度大小不一，人员数量不一。假如ICU是洁净环境，通常动态标准为静态条件下乘以5倍。假如是普通ICU，则是4cfu/15min.直径9cm平皿乘以5倍。静态：室内设施及功效齐全，空调净化系统正常运行，但无人员状态医院感染监测标本采集的标准操作28/70空态：空调净化系统正常运行，没有安装设备，也没有些人员动态：一切系统正常运行、医护人员进行正常手术操作状态，是我们日常工作状态布点次序：放置培养皿从总平面中最靠里房间开始布置，依次向外布，最终人员撤出。每间房间也是从房间最靠里地方开始布置，最终布置门附近点，然后人员撤出。收取培养皿时次序相反，从最外边房间开始收，每个房间从最靠门培养皿开始收，最先布置皿最终收，沉降时间略有差异。医院感染监测标本采集的标准操作29/70医院感染监测标本采集的标准操作30/70▲▲⒒医院感染监测标本采集的标准操作31/70医院感染监测标本采集的标准操作32/70医院洁净手术部建筑技术规范-GB医院感染监测标本采集的标准操作33/70医院洁净手术部建筑技术规范-GB50333—报批稿

医院感染监测标本采集的标准操作34/70采样中常见误区采样时开启空气处理机时间不足30分钟手术间未清洁、开着手术间门采样采样时培养皿放置位置不符合要求采样时有些人员流动未洗手、未按无菌操作进行采样平皿受到污染※平皿应新鲜透亮，当日领取使用。医院感染监测标本采集的标准操作35/70物体表面消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作36/70物体表面消毒效果监测在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发相关时进行采样物体表面消毒效果监测采样频率每季度一次医院感染监测标本采集的标准操作37/70物体表面消毒效果监测采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌洗脱液棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积被采表面＜100cm2，取全部表面被采面积≥100cm2，取100cm2医院感染监测标本采集的标准操作38/70物体表面消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作39/70物体表面消毒效果监测采样方法剪去手接触部分，将棉拭子放入装有10ml无菌检验用洗脱液试管中送检。门把手等小型物体则采取棉拭子直接涂抹物体表面采样。采样物体表面有消毒剂残留时，采样液应含对应中和剂。硫代硫酸钠（0.1%~1.0%）医院感染监测标本采集的标准操作40/70物体表面消毒效果监测结果判定洁净手术部、其它洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2儿科病房、母婴同室、妇产科检验室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供给中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2医院感染监测标本采集的标准操作41/70医护人员手消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作42/70医护人员手消毒效果监测采样时间

在接触患者、进行诊疗活动前采样。医院感染监测标本采集的标准操作43/70医护人员手消毒效果监测采样方法

被检者五指并拢，用无菌洗脱液浸湿棉拭子在双手指曲面从指端到指根再到指端为往返1次，共往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子将棉拭子接触操作者部分剪去，投入10ml含对应中和剂无菌洗脱液试管内，及时送检。监测频率每季度一次医院感染监测标本采集的标准操作44/70医护人员手消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作45/70卫生手清毒监测细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2外科手消毒监测细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2

不能检出致病性微生物手消毒效果监测医院感染监测标本采集的标准操作46/70使用中消毒剂及灭菌剂监测医院感染监测标本采集的标准操作47/70采样方法：用无菌注射器按无菌操作方法吸收1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀使用中消毒剂及灭菌剂监测监测频率：消毒剂每季度监测一次灭菌剂每个月监测一次结果判断：1、使用中灭菌用消毒液：无菌生长2、使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml3、其它使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml注意事项：采样后4h内检测

医院感染监测标本采集的标准操作48/701.采样时间:采取更换前使用中消毒剂与无菌器械保留液。2.采样量及方法:在无菌条件下，用无菌吸管吸收1ml被检样液，加入9ml稀释液中混均，对于醇类与酚类消毒剂，稀释液用普通营养肉汤即可；对于含氯消毒剂、含碘消毒剂、过氧化物消毒剂，需在肉汤中加入0.1%硫代硫酸钠；对于洗必泰、季铵盐类消毒剂，需在肉汤中加入3%吐温80和0.3%卵磷脂；对于醛类消毒剂，需在肉汤中加入0.3%甘氨酸；对于含有表面活性剂各种复方消毒剂，需在肉汤中加入3%吐温80，以中和被检样液残效作用。使用中消毒剂及灭菌剂监测医院感染监测标本采集的标准操作49/703.细菌菌落总数检验:采样管于混旋仪上混匀2分钟，取1ml采样液放入无菌平皿内，用普通营养琼脂作倾注培养，每份样品同时做2个平行样，一平板置于28℃培养7天，观察霉菌生长情况；另一个平板置于36±1℃培养72小时计数菌落数。4.结果计算：消毒液染菌量（cfu/ml）=平板上菌落平均数×10×稀释倍数（常为1）。使用中消毒剂及灭菌剂监测医院感染监测标本采集的标准操作50/705.结果分析:平板上有菌生长,证实被检样液有残余活菌,若每个平板菌落数在10个以下,仍可用于消毒处理(但不能用于灭菌),若每个平板菌落数超出10个,说明每毫升被检样液含菌量已超出100个,即不宜再用。6.判断标准6.1使用中灭菌用消毒液：无菌生长6.2使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml6.3其它使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml使用中消毒剂及灭菌剂监测医院感染监测标本采集的标准操作51/70压力蒸气灭菌生物学检测医院感染监测标本采集的标准操作52/70压力蒸气灭菌生物学检测压力蒸气灭菌：其中生物指标为检验灭菌效果直接监测指标。通常采取嗜热脂肪芽胞杆菌(ATCC7953)作为观察灭菌效果指示菌。生物指示剂：嗜热脂肪芽孢杆菌，定时监测（每周一次）化学指示剂：变色指示带（每包监测）压力表定时检测（每六个月一次）安全阀检测、校验（每年一次）医院感染监测标本采集的标准操作53/70压力蒸气灭菌生物学检测培养方法：经一个灭菌周期后，在无菌条件下取出标准试验包指示菌片，投入溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培养基中，经56℃±1℃培养7d（自含式生物指示物按产品说明书执行），观察培养结果；结果判定：阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，阴性对照组培养阴性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应深入判定试验组阳性细菌是否为指示菌或是污染所致。自含式生物指示物不需要做阴性对照；注意事项：监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在使用期内使用。医院感染监测标本采集的标准操作54/70过氧化氢低温等离子灭菌、环氧乙烷气体灭菌效果监测标准指示菌株：枯草杆菌黑色变种芽孢监测方法：将常规生物测试包放在灭菌器最难灭菌部位（整个装载灭菌包中心部位）。灭菌周期完成后应马上取出指示菌片接种于含有复方中和剂0.5%葡萄糖肉汤培养基管中，36℃±1℃培养7d（自含式生物指示物应遵照产品说明），观察培养基颜色改变，同时设阳性对照；结果判定：阳性对照组培养阳性，试验组培养阴性，判定为灭菌合格。阳性对照组培养阳性，试验组培养阳性，则灭菌不合格；同时应深入判定试验组阳性细菌是否为指示菌或污染所致；注意事项：监测所用菌片应取得卫生部消毒产品卫生许可批件，并在使用期内使用。医院感染监测标本采集的标准操作55/70常见多重耐药菌监测医院感染监测标本采集的标准操作56/70几个多重耐药菌监测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）耐青霉素肺炎链球菌检测（PRSP）耐万古霉素肠球菌（VRE）产超广谱β-内酰胺酶细菌（ESBLs）多重耐药/泛耐药鲍曼不动杆菌（MDR/PDR-AB）多重耐药/泛耐药铜绿假单胞菌（MDR/PDR-PA）耐碳青霉烯类抗菌药品肠杆菌科细菌（CRE包含NDM-1）耐碳青霉烯类抗菌药品鲍曼不动杆菌（CR-AB）耐万古霉素金黄色葡萄球菌（VRSA）多重耐药结核分枝杆菌（MDRMT）医院感染监测标本采集的标准操作57/70地面和物体表面清洁与消毒医院感染监测标本采集的标准操作58/70物体表面消毒剂浓度选择地面采取400mg/L～700mg/L有效氯含氯消毒液擦拭，作用30min

消毒方法同地面或采取75%酒精擦拭。医院感染监测标本采集的标准操作59/70地面和物体表面清洁与消毒地面无显著污染当受到患者血液、体液等显著污染湿式清洁

先用吸湿材料去除可见污染物，再清洁和消毒医院感染监测标本采集的标准操作60/70物体表面清洁与消毒物体表面（地面）清洁与消毒地面清洁与消毒地面无显著污染时，采取湿式清洁。当地面受到患者血液、体液等显著污染时，先用吸湿材料去除可见污染物，再清洁和消毒室内用具如桌子、椅子、凳子、床头柜等表面无显著污染时，采取湿式清洁。当受到显著污染时，先用吸湿材料去除可见污染物，然后再清洁和消毒感染高风险部门地面和物体表面清洁与消毒感染高风险部门如手术部、产房、导管室、洁净病房、器官移植病房、ICU、新生儿室、血透、烧伤病房、感染疾病科、口腔科、检验科、急诊等病房与部门地面与物体表面，应保持清洁、干燥，天天进行消毒，遇显著污染随时去污、清洁与消毒

医院感染监测标本采集的标准操作61/70感染高风险部门地面和物体表面清洁与消毒手术室产房导管室洁净病房器官移植病房ICU新生儿室血透烧伤病房感染疾病科口腔科检验科急诊等应保持清洁、干燥，天天进行消毒遇显著污染随时去污、清洁与消毒地面消毒采取400mg/L～700mg/L有效氯含氯消毒液擦拭，作用30min物体表面消毒方法同地面或采取

75%酒精擦拭。

医院感染监测标本采集的标准操作62/70内镜消毒效果监测医院感染监测