现代生化技术

《现代生化技术》习题第一章生物大分子的提取与沉淀分离技术一、名词解释1.生化技术2.提取（萃取）3..沉淀分离技术盐溶盐析作用等电点沉淀法有机溶剂沉淀法二、填空现代生化技术的显著特点：是以三高所著称，即： 、 及 。生物大分子主要包括： 、 、 、 和 ，它们生物体内存在的具有特殊生物学功能的高分子化合物。生化分离技术主要有 分离、 分离、 分离和 分离技术。蛋白质和酶的种类繁多在提取时应根据其 、 及 的不同选不同的提取方法。影响提取的因素主要有 、 、 、 等。水溶液法提取酶和蛋白质时，要注意控制好 、 、 等因素。沉淀分离技术包括 沉淀、 沉淀和 沉淀等技术。在分段盐析中，在一定pH和温度条件下，改变离子强度称为 盐析，而在一定的盐和离子强度条件下，改变温度pH值称为 盐析。实验室进行蛋白质盐析沉淀时应用最多、最广的盐是 。在核蛋白提取时应选0.14mol/L的氯化钠溶液提取 核蛋白而选的氯化钠溶液提取 核蛋白。核酸分离时pH5沉淀中可分离得到 。RNA的提取方法主要有 提取和 提取。苯酚水溶液提取核酸时， 和 沉淀于 层中，和 溶解于 中。核酸沉淀分离主要有 、 和 四种方法。能够选择性地沉DNA的试剂是 三、问答题进行细胞破碎的方法有哪些？蛋白质和酶提取、分离的一般原则核酸提取要注意的原则？第二章层析分离技术一、名词解释12..吸附层析解吸作用洗脱分配层析分配系数薄层层析气相层析担体死时间保留时间校正保留时间死体积保留体积校正保留体积定量校正因子离子交换层析凝胶层析洗脱体积亲和层析21.配基二、填空1.层析分离技术按流动相状态可分为层析和的物理化学性质分为 层析、层析、层析、层析、 层析等。2.洗脱方法根据所用洗脱剂不同分为、、。.聚酰胺薄膜层析只适用于的分离。纸上层析是以 的为固定相，以作为流动相，展开时品中各物质在两相之间不断地进行分配由于各物质有不同的 、也就不同，从而达到分离的目的。溶质在滤纸上移动的速度可Rf值表示= 值决定系数，不同的物质在两相间的不同，Rf值也不同，由此可根Rf值的大小对质进行定性分析。薄层层析中用的薄层板有 与之分，常用的薄层板制作方法法、法、法和法。气相层析根据其固定相的不同可分为层析和层析两种。气相层析具有 、 、 和 等特点。气固层析的固定相为 ，其分离的主要依据是 对 的不同所以又称为 层析气液层析的固定相为 其分离的要依据是 的不同，又称为 层析。气相层析的流动相是 ，称为 ，常用有 、 、 、 等。载气的选择主要根据所使用的 和 决定。红色担体用于分离 和 物质；白色担体用于分物质的衍生物再进行气相层析。进行气相层析时，应注意控制好 、 和进样量。热导池检测器属于 氢焰检测器属于 其灵敏度比热导池检测器高 倍左右，是目前应用最广泛的检测器之一。15.离子交换层析的操作过程包括 、和树脂再生三大步骤。16.凝胶装柱时必须注意柱中不能有 或存在三、问答题：1.选择吸附剂时应注意的问题？选择洗脱剂时应注意的问题？纸层析时对滤纸的选择有何要求？在纸层析前，滤纸和层析装置为什么要先用层析溶剂平衡？担体应具备哪些条件？离子交换剂选择时应考虑哪些因素？试述凝胶层析的基本原理。第三章电泳技术一、名词解释：电泳泳动度薄层电泳凝胶电泳等电聚集电泳二、填空按所使用的支持体的不同分为 电泳、 电泳、 电泳电泳和 电泳。按支持介质的形状分为 电泳和电泳。分子在电场中移动的方向决定于所带 的种类，带正电荷的向的电场中移动的速度主要决定于于颗粒所带，同时受分子的和的影响。影响电泳的外界因素有 、 、 以及缓冲液的粘度和温度。凝胶电泳与其他电泳的主要区别，在于凝胶电泳同时具有 的双重作用，具有很高的。凝胶电泳和凝胶电泳。不连续电泳的凝胶由上至下可分为、、。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中，其迁移率主要取决于它 以及 在聚丙烯酰胺系统中加则蛋白质分子的迁移率主要取决其 ，而与它的 及 无关。效应，因此比连续电泳系统具有更高的分辨率和区带清晰度。三、问答题试述聚丙烯酰胺凝胶具有哪些的优点。等电聚集电泳具有哪些优缺点？对载体两性电解质有什么要求？第四章离心分离技术一、名词解释离心分离技术沉降系数差速离心密度梯度离心等密度梯度离心RCF)二、填空通常按离心机转速的不同，将其分为 离心机、 离心机离心机三种。常速离心机的转速通常在 r/min以内，高速离心机的转速r/min，转速大于 r/min的离