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文档简介

实验指导书(范文)实验名称：酶的活性测定实验目的：1.了解酶的性质；2.掌握测定酶活性的原理及方法；3.熟悉用酶法检测某些物质的含量。实验器材：计量筒、量筒、容量瓶、滴定管、滴定管架、试剂瓶、吸管、电磁搅拌器、水浴、比色皿、紫外可见分光光度计等。实验试剂：碳酸氢钠、酚酞指示剂、酒精、稀硫酸、氯化钙、蛋白质酶、甲酚酸钾、K2HPO4、NaH2PO4、双氧水、PMSF等。实验步骤：1.制备反应体系。依据所测酶的特性及反应条件，将反应体系制备好，如若需要温度、PH控制，需做好预先调节控制好温度、pH值。2.酶的活性测定。将实验室酶样品、测量体系反应液等放入恒温水浴中反应，反应时间到后取数。然后对反应结果进行分析，并按照分析结果计算出酶的活性。3.数据处理。将测得的数据进行整合、分析和处理，得到各试样反应速率常数、酶活力等数据。实验操作：1.制备反应体系：以过氧化氢酶为例，按以下方法制备反应体系：(1)在无灰胶式量筒中加入1.0ml测量液，再加入10ul稀硫酸和10ul过氧化氢酶，快速混合均匀；(2)将无灰胶式量筒置于恒温水浴中(37℃)反应五分钟；(3)反应结束，加入过氧化氢催化剂，打止反应并立即测定样品的吸光度；2.酶的活性测定：按照上述方法制备不同浓度的过氧化氢酶反应体系，进行反应并记录结果；3.数据处理：根据反应结果计算出酶的折合品，从而得出酶的活性。注意事项：1.实验过程应注意安全；2.实验基本操作要求精度和规范；3.实验时应注意控制实验环境和仪器的干净卫生程度。实验结果分析：1.酶的活性测定过程中，酶催化分子与基质分子之间的反应速率与浓度成正比，酶活性越大，反应速率越快。2.酶的光学密度随着时间的增加而增加，但增加速度随时间的增加而减缓，直到反应结束，光学密度停止增加。3.通过将不同反应体系的活性值进行比较，我们可以确定酶的最佳反应条件，并可以对酶活性进行量化计算。总结：本次实验通过测定不同反应体系下酶的活性，根据测定结果对酶的特性进行了深入探讨。实验结果表明，酶的活性与反应条件密切相关，不同反应条件会对酶的催化效率和反应速率产生重要影响。在今后的酶工程及药

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