精高考生物冲刺复习酶的应用和生物技术在其他方面的应用张

精高考生物冲刺复习酶的应用和生物技术在其他方面的应用张第1页/共138页专题20酶的应用和生物技术在其他方面的应用第2页/共138页酶的存在与简单制作方法知道酶的作用、制备的方法——从细胞或细胞分泌物中提取酶活力测定的一般原理和方法理解酶活性测定的原理及温度影响酶活性的曲线分析酶在食品制造和洗涤等方面的应用理解加酶洗衣粉的应用与果胶酶在果汁生产中的作用制备和应用固相化酶能够说明固定化酶的固定方法以及固定化酶与固定化细胞的异同及在实际生产中的作用植物的组织培养熟知植物组织培养的原理、方法、步骤及细胞产物的获取方法第3页/共138页蛋白质的提取和分离主要记住蛋白质分离的原理、方法——电泳PCR技术的基本操作和应用PCR技术原理、方法、步骤的识记与识图从生物材料中提取某些特定的成分记住植物芳香油的提取原理、方法、步骤，认识蒸馏装置DNA的粗提取与鉴定用鸡血细胞提取DNA的方法步骤第4页/共138页

物质提取与分离技术【典例1】(2011·海南高考)许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题：(1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用______(鲜、干)薄荷叶作原料，其原因是______________________________。(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是__________等,原理是____________________________________。第5页/共138页(3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是______________。常用于分离油层和水层的器皿是_______________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是______________，除去固体硫酸钠的常用方法是________________。【审题视角】解答本题的“两”个点：(1)切入点：根据薄荷油易挥发的性质判断出所选择的原料是新鲜的。(2)关键点：①理解薄荷油的化学本质。②理解掌握各种化学试剂的作用。第6页/共138页【精讲精析】(1)薄荷油易挥发，干燥过程中会使薄荷油挥发掉,因此选择鲜薄荷叶作为原料。(2)薄荷油易溶于有机溶剂，因此萃取时所选用的溶剂必须是有机溶剂，如酒精或石油醚、乙醚、戊烷等。(3)增加盐的浓度，可使分层更明显；分离油层和水层的器皿一般选用分液漏斗；无水硫酸钠是干燥剂，可以用来吸收油层中的水分；除去固体硫酸钠最简单的方法是过滤。第7页/共138页答案：(1)鲜薄荷油易挥发，干燥过程中会使薄荷油挥发掉(2)酒精或石油醚、乙醚、戊烷薄荷油易溶于有机溶剂(3)增加盐的浓度，使分层更明显分液漏斗吸收油层中的水分过滤第8页/共138页【命题人揭秘】命题规律：近几年的高考命题不仅全面考查芳香油提取的有关内容，还进一步将生物知识与化学物质的性质、原理结合起来考查。预测今后考查的重点会主要集中在对植物芳香油提取原理、常用试剂的作用的理解上。备考策略：解答这类问题的方法就是将生物学实验与物质化学性质原理相结合。解答此题的关键是明确薄荷油的理化性质，从而根据其挥发性来确定提取的方法——蒸馏，再根据其不溶于水，易溶于有机溶剂，可进一步确定用水蒸气蒸馏法进行提取，因此，在蒸馏过程中控制蒸馏的温度、时间、冷却液的回收要及时、保存要低温等就都有了理论基础。第9页/共138页

植物的组织培养技术【典例2】(2012·山东高考)辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。第10页/共138页(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的____________和____________过程。(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是___________。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_____________(填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采取的灭菌方法是_____________。(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是_________和纤维素酶。第11页/共138页(4)提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_______________。【审题视角】解答此题的关键是：熟练掌握植物组织培养过程及固体培养基的灭菌和色素的提取装置的应用。第12页/共138页【精讲精析】(1)由植物组织培养的过程可知，①为脱分化形成愈伤组织，②为愈伤组织再分化为根、芽。(2)培养外植体需要用固体培养基，固体培养基的凝固剂为琼脂；生长素和细胞分裂素的比例低时利于发芽，高时利于生根；固体培养基要用高压蒸汽灭菌。(3)外植体消毒一般用70%的酒精；由于植物细胞有细胞壁，所以将愈伤组织分离成单个细胞需要用纤维素酶和果胶酶。(4)提取辣椒素类似于提取胡萝卜素，萃取加热时要安装冷凝回流装置，目的是防止加热时有机溶剂挥发。第13页/共138页答案：(1)脱分化(或去分化)再分化(2)琼脂低高压蒸汽灭菌(3)70%果胶酶(4)防止有机溶剂的挥发第14页/共138页【命题人揭秘】命题规律：植物组织培养是选修1和选修3同时具备的知识。针对选修1模块的命题，多以组织培养的过程为核心考查外植体的选择、培养基的制备、激素比例对组织培养的影响以及无菌操作的有关内容，有时也会联系选择性培养基进行考查。备考策略：植物组织培养的核心内容是组织培养的过程，备考时，需关注以下注意事项和基本原则：(1)培养基配制过程的关键点是培养基中包含有植物生长发育所必需的各种元素，通常还要添加适量的植物激素以促进分化。第15页/共138页(2)熟悉外植体的内容核心知识是选取生长旺盛的嫩枝、嫩芽。如培养脱毒苗，则必须选择分生组织，如根尖、茎尖，原因是这两个部位含有的病毒少，甚至不含病毒。(3)无菌技术主要理解实验各步骤都要进行严格灭菌、消毒：培养基要进行灭菌，外植体也要进行消毒处理，超净工作台上进行接种。(4)培养条件，以理解适宜温度和避免污染为中心：18℃～22℃左右进行培养，定期消毒。第16页/共138页DNA的粗提取与鉴定【典例3】(2010·江苏高考)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的菜花、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃，另一组置于-20℃条件下保存24h。DNA粗提取：第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。第17页/共138页第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。第三步：取6支试管，分别加入等量的2mol/LNaCl溶液溶解上述絮状物。DNA检测：在上述试管中各加入4mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。第18页/共138页(注：“+”越多表示蓝色越深)分析上述实验过程，回答下列问题：(1)该探究性实验课题名称是_____________。(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少____________。(3)根据实验结果，得出结论并分析。材料保存温度菜花辣椒蒜黄20℃++++++-20℃+++++++++第19页/共138页①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。结论2：_____________________________________________。②针对结论1，请提出合理的解释：_____________________。(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：__________________________________________。然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。第20页/共138页【审题视角】解答本题需注意以下几点：(1)思路图示：(2)取材：植物组织细胞。(3)步骤：研磨→过滤→酒精中粗提取→盐水中洗涤→二苯胺检测。(4)进一步提纯的原理：氯仿能使蛋白质变性沉淀，而且对DNA影响极小。实验变量分析实验研究课题设计实验步骤分析得出实验结论第21页/共138页【精讲精析】本题主要考查实验探究能力，包括明确实验课题、处理和解释实验步骤、设计可行的实验步骤等。(1)据题意，该探究实验的自变量有实验材料的种类和温度，因变量为DNA提取量，则该探究性实验课题名称是探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。(2)搅拌过程中常常会发生DNA的断裂，因而该步骤需要“缓缓地”进行。第22页/共138页(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA量最多。②低温能使DNA酶的活性受到抑制，从而降低了DNA的降解速度，使DNA提取量增多。(4)根据氯仿的理化性质，可用氯仿与提取液混合，然后去除上清液，以获得纯度较高的DNA。第23页/共138页答案：(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响(2)DNA断裂(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄中提取的DNA量最多②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液 第24页/共138页【命题人揭秘】命题规律：DNA的粗提取与鉴定是选修1中的一个实验考点，考查对实验过程中有关步骤和注意事项的理解。提取DNA的方法(盐析)和去除蛋白质的方法(酒精溶解)、提取DNA所用植物材料与动物材料的不同处理方法是考查的重要内容。实验现象和结果结论的解释和DNA的鉴定方法也是重要考点。在2013年的高考中很可能会以DNA的鉴定、提取DNA的原理和过程为切入点命题。第25页/共138页备考策略：备考该考点内容时，应多注意对DNA粗提取和分离的知识总结。(1)提取原理是实验的中心，是识记和理解实验的关键。DNA与杂质在提取液中的溶解度不同，对温度、酶、洗涤剂的耐受性不同。(2)理解物质提取实验选材一定是选取待检测物质含量丰富的组织。含DNA相对较多的生物组织有菜花、洋葱、鸡血细胞等。(3)去杂质步骤要与原理相联系进行理解。DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同；在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最小而析出。第26页/共138页

酶的制备、应用和固定化技术【典例4】(2010·浙江高考)某同学进行苹果汁制作实验，工艺如图所示：第27页/共138页(1)图中用KMnO4溶液浸泡苹果的目的是___________________。黑曲霉提取液中含有的___________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过________方式将酶固定化，酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去_____________。(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为__________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_________。要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还含有果胶，可取一定量的果汁与等量的________混合，如果出现________现象，说明果胶还没有被完全水解。为使果胶完全水解，应将流速调__________。第28页/共138页(3)实验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被_____使用。【审题视角】本题的解题关键需注意以下两点：(1)全面把握固定化酶的制备流程、酶的作用特点；(2)明确酶在食品生产中的作用：加快反应速度，提高产品产量及质量。第29页/共138页【精讲精析】本题考查苹果汁制作过程的反应条件、注意事项和操作过程中需要注意的细节。(1)在制作工艺中必须对原材料消毒，这样才能保证后续实验的成功。KMnO4是强氧化剂，可以起到对苹果的消毒作用。黑曲霉能够产生分解果胶的果胶酶，可将果胶分解，提高果汁产量。固定化酶技术则可以提高酶的利用率，制备固定化柱后要用蒸馏水洗去未被固定的酶等。第30页/共138页(2)利用固定化技术生产果汁的流程是：提取酶溶液固定化酶制备固定化酶反应柱注入浑浊的果汁充分反应澄清的果汁第31页/共138页根据该过程可知，应先将酶在固定化柱中固定，再注入果汁，使果汁与果胶酶充分反应，使果汁变澄清；要想进一步检测固定化柱中流出的果汁是否还含有果胶，可用乙醇进行鉴定，原因是乙醇可以与果胶中的果胶酸钙作用，形成沉淀。因此，若乙醇、果汁混合液中出现沉淀，则证明果汁中还含有果胶。果汁流经固定化柱的速度越慢，酶促反应越充分，果汁越澄清。(3)固定化酶的特点是可以反复使用，提高酶的利用率。答案：(1)消毒果胶酶吸附未被固定的酶等(2)A、B阀1乙醇浑浊(沉淀)慢(3)重复第32页/共138页【阅卷人点拨】失分警示对于流程图没有看明白，不理解果汁制作流程，未明白实验流程中各步骤的作用及注意事项。(1)蒸馏水洗涤固定化柱的目的是洗去未固定的酶，以防止反应过程受到干扰，易错答为“清洗吸附剂或石英砂”；(2)忽视KMnO4强氧化性的特性，不明白KMnO4的强氧化性是其消毒、灭菌的原理，易错认为是化学催化剂。

第33页/共138页备考策略在复习时要注意以下四个方面：(1)固定化柱是酶的固定化的主要方式，固定化柱的制作中选择吸附剂是关键。注入酶液后，洗去未吸附的酶，是固定化酶技术的一个重要环节。(2)为防止其他微生物代谢对实验的影响，必须对实验材料进行消毒灭菌。(3)固定化酶技术对于提高酶的利用率具有积极的意义。(4)处理后果汁的澄清透明度可以看作是果汁制作成功与否的标准。第34页/共138页

物质提取和分离技术高考指数:★★★★1.(2012·江苏高考)下列关于“DNA粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的是()A.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在NaCl溶液中的溶解度B.将DNA丝状物放入二苯胺试剂中沸水浴后冷却变蓝C.常温下菜花匀浆中有些酶类会影响DNA的提取D.用玻棒缓慢搅拌滤液会导致DNA获得量减少第35页/共138页【解析】选C。A错误，洗涤剂能瓦解生物膜，增加DNA从细胞中释放出来，但是不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度。B错误，将DNA丝状物溶解在0.015mol/L的NaCl溶液中，然后放入二苯胺试剂，沸水浴后冷却可观察到蓝色出现。“DNA析出”的步骤中，必须用玻棒缓缓搅拌使DNA聚集，防止DNA在搅拌的过程中断裂而使DNA获得量减少，故D错误。第36页/共138页2.(2011·广东高考)以下关于猪血红蛋白提纯的描述，不正确的是()A.洗涤红细胞时，使用生理盐水可防止红细胞破裂B.猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核，提纯时杂蛋白较少C.血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测D.在凝胶色谱法分离过程中，血红蛋白比相对分子质量较小的杂蛋白移动慢第37页/共138页【解析】选D。在凝胶色谱柱中，相对分子质量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙，路程短、流动快，相对分子质量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部，路程长，流动慢，血红蛋白比相对分子质量小的杂蛋白移动快，D错误。A正确，洗涤的目的是去除杂蛋白以利于后续步骤的分离纯化，加入的是生理盐水，缓慢搅拌10min，低速短时间离心，重复洗涤三次，直至上清液不再呈现黄色，表明红细胞已洗涤干净。B正确，哺乳动物成熟红第38页/共138页细胞没有细胞核与众多的细胞器，提纯时杂蛋白较少。C正确，血红蛋白是有色蛋白，因此在凝胶色谱分离时可以通过观察颜色来判断什么时候应该收集洗脱液(如果操作都正确，能清楚地看到血红蛋白的红色区带均匀、狭窄、平整，随着洗脱液缓慢流出)，这使得血红蛋白的分离过程非常直观，简化了操作。第39页/共138页3.(2011·江苏高考)在利用鸡血进行“DNA的粗提取与鉴定”的实验中，相关叙述正确的是()A.用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol/L，滤去析出物B.调节NaCl溶液浓度或加入木瓜蛋白酶，都可以去除部分杂质C.将丝状物溶解在2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂即呈蓝色D.用菜花替代鸡血作为实验材料，其实验操作步骤相同第40页/共138页【解析】选B。A项，用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至0.14mol／L,使DNA析出。B项，NaCl溶液为2mol／L，过滤除去不溶的杂质，木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。C项，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。D项，如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜。第41页/共138页4.(2010·山东高考)生物柴油是一种可再生的清洁能源，其应用在一定程度上能够减缓人类对化石燃料的消耗。科学家发现，在微生物M产生的脂肪酶作用下，植物油与甲醇反应能够合成生物柴油(如图)。第42页/共138页(1)用于生产生物柴油的植物油不易挥发，宜选用__________、________方法从油料作物中提取。(2)筛选产脂肪酶的微生物M时，选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________，培养基灭菌采用的最适方法是__________________法。(3)测定培养液中微生物数量，可选用______________________法直接计数；从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测____________，以确定其应用价值；为降低生物柴油生产成本，可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。(4)若需克隆脂肪酶基因，可应用耐热DNA聚合酶催化的_____________________________技术。第43页/共138页【解析】(1)植物油不易挥发，不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取。(2)植物油中不含矿质元素，只为微生物提供碳源。培养基适合用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。(3)测定微生物的数量，可以用显微镜直接计数。分离出的脂肪酶要对其活性进行检测，以确定其应用价值。可以利用固定化酶技术重复使用脂肪酶。(4)利用PCR技术可以扩增基因。答案：(1)压榨萃取(2)碳源高压蒸汽灭菌(3)显微镜直接计数酶活性(或酶活力)固定化酶(或固定化细胞)(4)PCR(或多聚酶链式反应，或聚合酶链式反应)第44页/共138页5.(2010·新课标全国卷)下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有__________的性质。蒸馏时收集的蒸馏液_______(是、不是)纯的玫瑰精油，原因是__________________________________。(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和____________。当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是_____________________________________________________________________。第45页/共138页(3)如果蒸馏过程中不进行冷却，则精油提取量会_______，原因是_______________________________________________。(4)密封不严的瓶装玫瑰精油保存时最好存放在温度_______的地方，目的是_________________________________。(5)某植物花中精油的相对含量随花的不同生长发育时期的变化趋势如图所示。提取精油时采摘花的最合适时间为__________天左右。(6)从薄荷叶中提取薄荷油时________(能、不能)采用从玫瑰花中提取玫瑰精油的方法，理由是__________________________。第46页/共138页【解题指南】解答本题的思路如下：提取物性质提取、保存方法易挥发易溶于有机溶剂决定水蒸气蒸馏法、低温保存第47页/共138页【解析】本题考查芳香油的性质、提取、保存、影响提取量的因素等问题。(1)玫瑰精油属于芳香类化合物，具有易挥发、难溶于水、化学性质稳定等性质。(2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏时间和温度；当原料量等其他条件一定时，提取量随蒸馏时间的变化趋势是一定时间内随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后蒸馏量不再增加。第48页/共138页(3)蒸馏时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，如果不进行冷却，部分精油会随水蒸气的蒸发而流失。(4)玫瑰精油易于挥发，应保存在温度较低的地方。(5)根据图示可以确定提取精油时采摘花的最合适时间为a天左右，此时精油含量最高。(6)薄荷油与玫瑰精油化学性质相似，同样可以采用水蒸气蒸馏法提取。第49页/共138页答案：(1)易挥发、难溶于水、化学性质稳定不是蒸馏时玫瑰精油随水蒸气一起蒸馏出来，得到的是油水混合物(2)温度一定时间内随蒸馏时间的延长而增加，一定时间后蒸馏量不再增加(3)下降部分精油会随水蒸气的蒸发而流失(4)较低减少挥发(或防止挥发)(5)a(6)能薄荷油与玫瑰精油化学性质相似

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酶的制备、应用和固定化技术高考指数:★★★6.(2012·江苏高考)下列关于“探究加酶洗衣粉和普通洗衣粉的洗涤效果”的叙述，合理的是()A.先用热水溶解洗衣粉，再将水温调节到最适温度B.实验的观察指标可以是相同洗涤时间内污渍的残留程度C.相同pH时加酶洗衣粉洗涤效果好于普通洗衣粉D.衣物质地和洗衣粉用量不会影响实验结果第51页/共138页【解析】选B。具体分析如下：选项具体分析结论A项温度会影响酶的活性，高温会破坏酶的结构，导致酶失去活性，且不可恢复，所以应该先将水温调节到最适温度，再溶解洗衣粉错误B项本实验可以通过观察相同洗涤时间内污渍的残留程度来判断不同酶的洗涤效果正确C项pH会影响酶的活性，只有在最适pH条件下加酶洗衣粉洗涤效果才好于普通洗衣粉错误D项衣物质地和洗衣粉用量会影响实验结果，如加蛋白酶的洗衣粉不能洗涤蚕丝类衣物错误第52页/共138页7.(2012·江苏高考)下列关于酶和固定化酵母细胞的研究与应用的叙述，错误的是()A.从酶的固定方式看，吸附法比化学结合法对酶活性影响小B.作为消化酶使用时，蛋白酶制剂以口服方式给药C.尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶和过氧化氢酶，可以反复使用D.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，目的是洗去CaCl2和杂菌【解题指南】解答本题的关键是明确：(1)固定化酶和固定化细胞的常用方法。(2)固定化酶的应用。第53页/共138页【解析】选C。吸附法是利用离子键作用、物理吸附等方法，将酶固定在载体上，而化学结合法是利用多功能试剂进行酶与载体之间的交联，从而得到三维的交联网架结构，后者有可能影响酶活性部位，所以A正确。消化酶是在消化道中起作用的，因此蛋白酶制剂以口服方式给药，故B正确。尿糖试纸含有固定化的葡萄糖酶、过氧化氢酶和无色的化合物,主要是利用原子氧将某种无色化合物氧化成有色化合物，所以不可以反复使用，因此C错误。将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗,目的是洗去CaCl2

和杂菌，防止CaCl2导致凝胶珠硬度变大，所以D正确。第54页/共138页8.(2011·江苏高考)下列有关酶的制备和应用的叙述，正确的是()A.酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶B.透析、电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化C.棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤D.多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层【解析】选A。酶解法和吸水涨破法可使微生物细胞破裂，释放出胞内酶；常用透析法、离心沉降法和电泳法进行酶的分离和纯化；棉织物经添加纤维素酶的洗衣粉洗涤后更为蓬松，更为鲜亮；多酶片中的胃蛋白酶位于糖衣之内，肠溶衣之外。第55页/共138页9.(2010·江苏高考)某种蛋白酶是由129个氨基酸脱水缩合形成的蛋白质，下列叙述正确的是()A.该蛋白酶分子结构中至少含有129个氨基和129个羧基B.该蛋白酶溶液与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应C.利用透析法纯化该蛋白酶时，应以蒸馏水作为透析液D.用含该蛋白酶的洗衣粉去除油渍，效果比其他类型加酶洗衣粉好第56页/共138页【解析】选B。A项错误，蛋白酶的本质是蛋白质，蛋白质分子结构中至少含有一条肽链，每条肽链至少含有1个氨基和1个羧基；B项正确，蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应，这是鉴定蛋白质的基本原理；C项错误，利用透析法纯化该蛋白酶时，应以磷酸缓冲液作为透析液；D项错误，油渍的主要成分属于脂质，而酶的催化作用具有专一性，用含该蛋白酶的洗衣粉去除油渍，效果不明显甚至更差。第57页/共138页10.(2010·江苏高考)图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图2是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述正确的是(多选)()第58页/共138页A.刚溶化的海藻酸钠应迅速与活化的酵母菌混合制备混合液B.图1中X溶液为CaCl2溶液，其作用是使海藻酸钠形成凝胶珠C.图2发酵过程中搅拌的目的是为了使培养液与酵母菌充分接触D.图1中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图2装置中【解题指南】解答此题的关键是明确固定化酵母细胞的操作细节：(1)溶解海藻酸钠要用文火，间隔加热。(2)加入CaCl2的作用是有利于海藻酸钠形成凝胶珠。(3)固定好的酵母细胞(凝胶珠)要洗涤后才能转移到培养液中进行培养。第59页/共138页【解析】选B、C、D。解答本题的具体分析如下：A项，刚溶化的海藻酸钠要冷却至室温，才能与活化的酵母菌混合制备混合液，以免高温使酵母菌失活；B项，混合液加入CaCl2溶液进行固定化酵母细胞，CaCl2的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠；C项，发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母菌充分接触，以利于发酵过程的顺利进行；D项，制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤(去除残留的CaCl2)后再转移到图2装置中进行发酵。

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植物组织培养技术高考指数:★★11.(2011·江苏高考)下列有关植物组织培养的叙述，正确的是()A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得第61页/共138页【解析】选D。愈伤组织处于未分化的状态，所以没有特定结构和功能，所以A选项错误；二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到的植株是单倍体，高度不育，所以B选项错误；人工种子就是以植物组织培养得到具有生根发芽能力的胚状结构等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，所以C选项错误；可通过添加适量NaCl的培养基培养淘汰不耐盐个体，筛选出耐盐个体，所以D选项正确。第62页/共138页12.(2012·全国新课标)为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，其研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基(见下表)，灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)，结果如下表。第63页/共138页培养基编号浓度/mg·L-1

m/%n/个6-BAIAA10.5076.73.120.177.46.130.266.75.340.560.05.0第64页/共138页回答下列问题：(1)按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为_______和________两类。上述培养基中，6-BA属于_______________类生长调节剂。(2)在该实验中，自变量是________，因变量是_________，自变量的取值范围是__________。(3)从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是________号培养基。(4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入________(填“6-BA”或“IAA”)。第65页/共138页【解题指南】解答本题需掌握以下知识：(1)植物培养基营养成分的组成。(2)对照实验中自变量与因变量的判断方法。(3)生长素含量与细胞分裂素含量的比值对植物组织分化为根和芽的影响。第66页/共138页【解析】(1)根据植物的需求量，组成生物体的元素可以分为大量元素和微量元素，6-BA属于细胞分裂素类生长调节剂。(2)根据实验目的和实验步骤中的数据，可以得出IAA的浓度是自变量，菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数是因变量。由表中数据可以看出IAA的浓度范围是0～0.5mg·L-1。(3)再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，诱导丛芽总数最少的培养基是1号培养基。(4)当生长素用量与细胞分裂素用量的比值较高时，容易诱导试管苗生根，所以培养基中一般加入IAA,而不加入6-BA。第67页/共138页答案：(1)大量元素微量元素细胞分裂素(2)IAA浓度再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)0～0.5mg·L-1(3)1(4)6-BA第68页/共138页13.(2012·江苏高考)某研究组对籼稻开展了组织培养及相关研究，请回答下列问题：(1)2，4-D常用于籼稻愈伤组织的诱导，对形态的发生有一定的抑制作用。为促进愈伤组织再分化，在配制分化培养基时需__________(填“升高”“保持”或“降低”)2，4-D的浓度。(2)当籼稻愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但不能继续出芽，通常在培养基中添加____________________，以促进幼苗形成。第69页/共138页(3)研究中用显微镜可以观察到的现象是______(填下列序号)。①绿色芽点细胞排列松散②刚融合的籼稻和稗草杂交细胞发生质壁分离③胚状体细胞中有叶绿体④分化的愈伤组织内各细胞的形态大小一致(4)经组织培养筛选获得的籼稻叶绿素突变体，其叶绿素a与叶绿素b的比值显著大于对照，叶绿素总量不变。某同学用_____________(填序号：①绿色；②红色；③蓝紫色；④黄色)光照射突变体和对照叶片，检测到两者光合放氧速率差异不大。若取等量色素提取液进行层析，会发现突变体第_________条色素带(自上而下)窄于对照组。第70页/共138页(5)胚乳(3n)由一个精子与两个极核受精发育而成。若用籼稻种子的胚乳诱导愈伤组织，培育三倍体，需适时剔除胚，以免胚的存在影响愈伤组织细胞的____________，还可避免再生苗中混有_____________。【解题指南】解答本题的关键是：(1)明确愈伤组织培养过程中不同时期需用的激素种类与含量。(2)明确叶绿素a和叶绿素b在色素带上的位置及对光的吸收。第71页/共138页【解析】(1)2，4-D有利于细胞愈伤组织的形成，不利于愈伤组织的再分化，因此分化培养基中应降低2，4-D的浓度。(2)出现具有分生能力的绿色的芽点，但不能继续出芽说明细胞的分裂受到了阻碍，因此应添加适量的生长素。(3)绿色芽点属于分生组织，细胞排列紧密；刚融合的杂交细胞还没有形成大液泡，不能发生质壁分离；将单个细胞或组织培养到胚状体时，需进行光照，说明此时胚状体中含有叶绿体；分化的细胞具有不同的形态结构。第72页/共138页(4)叶绿素a和叶绿素b对绿光和黄光吸收较少，用这两种光照射含叶绿素a和叶绿素b不同的叶片时，检测到的光合放氧速率差异不大；叶绿素b位于色素带的最下方，突变体中叶绿素b的含量下降，因此最下方的色素带变窄。(5)在组织培养过程中胚更容易发育成愈伤组织，而且由胚发育成的个体为二倍体。答案：(1)降低(2)适量的生长素(3)③(4)①④4(5)增殖与分化二倍体幼苗第73页/共138页14.(2010·安徽高考)草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代，导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：外植体愈伤组织芽、根植株①②第74页/共138页请回答：(1)微型繁殖培育无病毒草莓时，一般选取_________作为外植体，其依据是_______________。(2)在过程①中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和___________，在配制好的培养基中，常常需要添加_____________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2d～5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是______。(3)在过程②中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是_________________________________________________________________________________。第75页/共138页【解题指南】解答本题的关键是明确以下几个方面：(1)理解外植体选材的基本原则：生长旺盛的部位。(2)掌握培养基制备中各物质的作用：必需的各种物质和元素。(3)联系两种激素的相互作用关系。【解析】(1)植物组织培养时常采用根尖或茎尖部位，原因是该部位含病毒极少，甚至无病毒。(2)MS培养基的成分包括大量元素、微量元素和有机物，在配制好的培养基中，常需要添加生长素和细胞分裂素等植物激素。植物组织培养也应注意无菌操作。第76页/共138页(3)生长素与细胞分裂素的比值低时有利于芽的分化，生长素与细胞分裂素的比值高时有利于根的分化。答案：(1)茎尖(或根尖)茎尖(或根尖)病毒极少，甚至无病毒(2)有机物植物激素外植体消毒不彻底(3)培养基中生长素类物质和细胞分裂素类物质用量的比值偏低第77页/共138页15.(2009·山东高考)人参是一种名贵的中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：第78页/共138页请回答：(1)配制诱导愈伤组织的固体培养基，分装后要进行________。接种前，要对人参根进行_____________。(2)用于离体培养的根切块，叫做_______。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于______污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于_________污染。(3)用少量_______酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。(4)人参皂苷易溶于水溶性(亲水性)有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用________方法，操作时应采用_______加热。第79页/共138页【解析】(1)接种前，要对外植体进行消毒(不能填灭菌，灭菌是采用强烈的理化因素杀菌)，配制培养基并分装后要用灭菌锅灭菌。(2)比较菌落特征①真菌污染：有颜色的绒毛状菌落。②细菌污染：有光泽的黏液状菌落。(3)利用果胶酶处理愈伤组织可以获得单个的细胞。(4)由题干知，人参皂苷易溶于亲水性有机溶液，故而采用萃取的方法可以从培养物干粉中提取人参皂苷。第80页/共138页答案：(1)灭菌消毒(2)外植体真菌(霉菌)细菌(3)果胶(4)萃取水浴

第81页/共138页PCR技术的基本操作和应用高考指数:★★16.(2011·江苏高考)请回答基因工程方面的有关问题：(1)利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。第82页/共138页图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为_________________。②在第_______轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)设计引物是PCR技术关键步骤之一。某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理(如图)，请分别说明理由。第83页/共138页①第1组：________________________________________；②第2组：________________________________________。第84页/共138页(3)PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为__________________________________________________________________________。第85页/共138页(4)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ单独或联合切割同一种质粒，得到的DNA片段长度如下图(1kb即1000个碱基对)，请画出质粒上EcoRⅤ、MboⅠ的切割位点。第86页/共138页【解析】(1)①从理论上推测，第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为15/16。②在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。(2)某同学设计的两组引物(只标注了部分碱基序列)都不合理，原因①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效，②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效。(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上。第87页/共138页答案：(1)①15/16②三(2)①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部发生碱基互补配对而失效②引物Ⅰ′自身折叠后会出现局部碱基互补配对而失效(3)DNA聚合酶只能将单个脱氧核苷酸连续结合到双链DNA片段的引物链上(4)见图第88页/共138页

果胶酶与纤维素酶的比较组成本质作用果胶酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶等蛋白质催化水解果胶成为可溶性半乳糖醛酸

纤维素酶C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶蛋白质纤维素纤维二糖葡萄糖第89页/共138页【名师点睛】1.果胶和纤维素是植物细胞壁的主要组成成分，植物体细胞杂交时，必须使用果胶酶和纤维素酶，将细胞壁水解掉，以获得原生质体。2.果胶酶和纤维素酶都是复合酶，并不特指某一种酶，而是一类酶的总称。第90页/共138页

探究温度和pH对酶活性的影响1.酶的活性及其影响因素(1)酶的活性：酶催化一定化学反应的能力。酶活性的高低可以用在一定条件下，酶所催化的某一化学反应的反应速度来表示，即可用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。(2)影响酶活性的因素：温度、pH、酶的抑制剂等。第91页/共138页2.探究温度对果胶酶活性影响的实验(1)实验方案：确定温度梯度→探讨控制温度的方法和措施。(2)实验程序：制备水果泥→制备果胶酶→水果泥与果胶酶分别水浴保温→将水果泥和果胶酶混合保温→过滤出果汁→记录果汁量→改变为不同温度后，重复上面实验。(3)记录实验数据，并填入表格。(4)得出结论：获得的果汁越多，或果汁越澄清，表明果胶酶的活性越高。(5)实验分析温度和pH在很大程度上对酶的构象会产生巨大的影响，温度过高、pH过高或过低都会使其失去活性。第92页/共138页【名师点睛】1.调节pH的方法在探究不同pH对果胶酶活性的影响时，可以用体积分数为0.1%的NaOH溶液和盐酸进行调节。2.纤维素和果胶对果汁制作的两个影响一是果肉的出汁率低，耗时长；二是榨取的果汁浑浊、黏度高、容易发生沉淀。第93页/共138页

探究不同种类加酶洗衣粉的洗涤效果1.实验原理酶的催化作用具有专一性，复合酶洗衣粉加入的酶制剂种类较多，与单一加酶洗衣粉相比，对各种污渍都有较好的洗涤效果。第94页/共138页种类洗涤原理洗涤实例蛋白酶可将蛋白质水解为可溶性的氨基酸或小分子的肽血渍、奶渍及各种食品类的蛋白质污垢脂肪酶把脂肪水解为较易溶解的甘油和游离的脂肪酸

食品的油渍、人体皮脂、口红淀粉酶能使淀粉迅速水解成糊精、麦芽糖等来自面条、巧克力等的污垢纤维素酶使纤维的结构变得蓬松，从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触，达到更好的去污效果棉纺织品的表面浮毛第95页/共138页2.实验变量的控制(1)自变量：加酶洗衣粉(酶种类)。(2)无关变量：其他条件(如温度、pH等)相同且适宜。第96页/共138页步骤烧杯编号ⅠⅡⅢ注入自来水500mL

500mL500mL加入物质(等量)奶渍布奶渍布奶渍布

控制水温37℃37℃37℃加入洗衣粉(等量)蛋白酶洗衣粉

复合酶洗衣粉

脂肪酶洗衣粉

用玻璃棒搅拌5min5min5min观察实验现象效果最好

效果较好效果较差3.实验步骤第97页/共138页【名师点睛】1.变量控制实验变量为洗衣粉，设计时应遵循单一变量原则、对照原则，有效地控制其他变量，如水的用量、污物的量、所用实验用布的质地和大小、两种洗衣粉的用量、搅拌及洗涤时间等。2.温度梯度的设置(1)初测最适温度：温度梯度设置为20℃、25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃、55℃。第98页/共138页(2)精测最适温度：若测出40℃时洗涤效果较好，应进一步设置梯度更小的实验组，如35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃、41℃、42℃、43℃、44℃、45℃，直至测出最接近最适温度的范围。第99页/共138页

直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化优缺点的比较项目直接使用酶固定化酶固定化细胞酶的种数一种或几种一种一系列酶常用载体高岭土、皂土、硅胶、凝胶

明胶、琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、聚丙烯酰胺

制作方法化学结合固定化、物理吸附固定化

包埋法固定化

第100页/共138页项目直接使用酶固定化酶固定化细胞是否需要营养物质否否是催化反应单一或多种单一一系列反应底物各种物质(大分子、小分子)各种物质(大分子、小分子)小分子物质

第101页/共138页项目直接使用酶固定化酶固定化细胞缺点①对环境条件非常敏感，易失活②难回收，成本高，影响产品质量

不利于催化一系列的酶促反应

反应物不易与酶接触，尤其是大分子物质，反应效率下降

优点催化效率高、耗能低、低污染①既能与反应物接触，又能与产物分离②可以反复利用成本低、操作容易第102页/共138页【名师点睛】1.海藻酸钠溶液的浓度如果海藻酸钠溶液浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数量少。2.CaCl2溶液的作用使海藻酸钠胶体发生聚沉，形成凝胶珠。3.酶和细胞固定方法的不同酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定，而细胞多采用包埋法固定。这是因为细胞个大，而酶分子很小，个大的细胞难以被吸附或结合，而个小的酶容易从包埋材料中漏出。第103页/共138页

植物组织培养1.原理：植物细胞的全能性(1)植物细胞全能性的概念：高度分化的植物细胞，仍然具有发育成完整植株的潜能。(2)高度分化的植物细胞全能性表达的条件：①离体条件；②无菌操作(防止杂菌污染)；③适宜物质的诱导和调节(激素主要是生长素、细胞分裂素等)；④种类齐全、比例适合的营养物质；⑤温度、酸碱度、光照等条件的控制。第104页/共138页2.基本过程(1)菊花茎与月季花药组织培养：项目菊花茎的组织培养月季花药的组织培养理论依据植物细胞的全能性材料选取未开花植株茎上部新萌生的侧枝完全未开放的花蕾光照状况每日用日光灯照射12h开始不需要光照，幼小植株形成后需要光照

操作流程制备MS固体培养基→外植体消毒→接种→培养→移栽→栽培选材→材料消毒→接种和培养→筛选和诱导→移栽→栽培选育第105页/共138页项目菊花茎的组织培养月季花药的组织培养影响因素选材、营养、激素、pH、温度、光照等基本过程脱分化、再分化完整过程离体的植物器官、组织或细胞(外植体)愈伤组织试管苗完整的植物体脱分化再分化第106页/共138页(2)植物组织培养与花药离体培养的比较：项目植物组织培养花药离体培养选材体细胞生殖细胞(精子)生殖方式无性生殖有性生殖相同点原理：植物细胞全能性；过程：外植体→愈伤组织→丛芽→生根→移栽；灭菌技术、接种方法一致第107页/共138页3.影响植物培养的因素(1)内因：外植体的选取。①不同植物的组织培养难度不同。②对于同一种植物材料，材料的年龄、保存时间的长短等也会影响实验结果。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。第108页/共138页(2)外因营养矿质元素有机物植物激素(生长素、细胞分裂素)使用顺序不同→结果不同两者用量比例不同→发育方向不同环境条件：温度、pH、光照等第109页/共138页【名师点睛】有关植物组织培养的几点注意(1)材料的选取：①菊花的组织培养实验中，应选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。②月季的花药培养实验中，应选择花粉发育过程中的单核期的花粉进行培养。③确定花粉发育时期的最常用的方法是醋酸洋红法，还可用焙花青-铬矾法。第110页/共138页(2)外植体消毒：所用消毒剂为体积分数为70%的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞溶液，所使用的清洗液是无菌水。(3)培养过程：在初期，菊花的组织培养需光照，月季的花药培养不需光照，而在后期均需光照。(4)在培养过程中一定要注意激素的使用方法及时间。第111页/共138页【状元心得】培养物污染后的处理方法一旦发现培养物被污染，特别是真菌性污染，一定不要打开培养瓶。应先将被污染的培养瓶统一放在高压蒸汽锅内进行高压蒸汽灭菌，然后再打开培养瓶进行清理。第112页/共138页

血红蛋白的提取和分离1.蛋白质分离的依据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。第113页/共138页2.方法及原理(1)凝胶色谱法原理：相对分子质量大相对分子质量小凝胶内部不能进入能进入运动方式垂直向下

垂直向下和无规则扩散运动经过路程较短较长洗脱次序先流出后流出蛋白质比较第114页/共138页(2)电泳法原理：①一些生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上正电或负电。②在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动。③由于分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状不同，使带电分子产生不同的迁移速度，从而实现样品中各种分子的分离。第115页/共138页3.实验操作程序样品处理红细胞的洗涤：除去血浆蛋白等杂质，有利于后续步骤的分离纯化血红蛋白的释放：使红细胞涨破，血红蛋白释放出来分离血红蛋白溶液：经过离心使血红蛋白和其他杂质分离开来，便于下一步对血红蛋白的纯化第116页/共138页粗分离——透析：除去样品中相对分子质量较小的杂质纯化：一般采用凝胶色谱法对血红蛋白进行分离和纯化纯度鉴定：一般用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳方法，来测定蛋白质的相对分子质量，即对血红蛋白进行纯度鉴定第117页/共138页【名师点睛】1.红细胞洗涤红细胞洗涤过程中，洗涤三次后，若上清液仍有黄色，可增加洗涤次数，否则无法除去血浆蛋白。2.血红蛋白的释放血红蛋白释放过程中，蒸馏水的作用是涨破红细胞，甲苯的作用主要是溶解细胞膜。第118页/共138页3.凝胶的膨胀处理为了加快干凝胶的膨胀，可将加入洗脱液的湿凝胶用沸水浴加热，逐渐升温至接近沸腾，通常只需1h～2h。这种方法不但节约时间，而且可以除去凝胶中可能带有的微生物，排除胶粒内的空气。4.蛋白质分子的分离相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。第119页/共138页5.凝胶色谱柱的填装注意事项凝胶色谱柱在填装时，尽量紧密均匀，不得有气泡存在。因为气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果。在凝胶色谱操作过程中，不能发生洗脱液流干而露出凝胶颗粒的现象。第120页/共138页

植物有效成分的提取1.植物精油和胡萝卜素的提取实验(1)植物精油的提取实验：①提取玫瑰精油的实验：a.方法：水蒸气蒸馏法。b.实验流程：第121页/共138页②提取橘皮精油的实验：a.方法：一般用压榨法。b.实验流程：石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤→静置→再次过滤→橘皮油。(2)胡萝卜素的提