权威细胞免疫治疗开展情况专家讲座

我院细胞免疫治疗开展情况

辽宁省人民医院肿瘤科：赫丽杰

权威细胞免疫治疗开展情况第1页细胞免疫治疗在辽宁省人民医院临床应用情况

辽宁省人民医院肿瘤科：赫丽杰

权威细胞免疫治疗开展情况第2页我院生物治疗发展史1999年：开始LAK细胞和肿瘤疫苗工作年：开始利用CIK应用到恶性肿瘤临床工作中，至今累计病例千余例。年底：在原有试验室基础上，建成了符合GMP标准细胞治疗试验室。年始：开展DC细胞治疗肿瘤工作，并更新CIK细胞培养方法，使细胞愈加丰富，治疗效果更佳。权威细胞免疫治疗开展情况第3页肿瘤生物治疗中心建立年1月27日新建试验室经过了辽宁省疾控中心认证，成为国际先进整体万级、局部百级洁净，符合GMP标准细胞治疗试验室！临床制订了规范化诊疗流程2011年3月10日辽宁省人民医院肿瘤生物治疗中心正式成立！2011年3月15日GMP标准试验室正式开启运行！权威细胞免疫治疗开展情况第4页肿瘤生物治疗中心概况肿瘤生物治疗门诊室细胞单采室：血细胞单采分离机1台GMP细胞试验室：有生物安全柜，CO2培养箱，-80度低温冰箱，离心机等一批先进细胞培养试验设备，在国内外同类试验室中处于领先地位。细胞质检室权威细胞免疫治疗开展情况第5页细胞免疫治疗项目及方案项目：自体细胞因子诱导杀伤（CIK）细胞抗原致敏树突状细胞（DC）方案：单纯CIK+DC治疗CIK+DC联合化疗权威细胞免疫治疗开展情况第6页细胞免疫治疗适应症手术后患者手术及放疗后患者手术及化疗后患者手术及放、化疗以后患者放化疗后患者对于很多放、化疗无效或不接收放、化疗患者，单独使用DC/CIK免疫治疗，依然有效且无毒副作用。癌性胸、腹腔积液患者。权威细胞免疫治疗开展情况第7页细胞免疫治疗禁忌症细胞因子过敏T细胞淋巴瘤权威细胞免疫治疗开展情况第8页细胞免疫治疗临床规范化实施流程病例选择治疗过程：单采→体外诱导→回输临床观察指标权威细胞免疫治疗开展情况第9页细胞免疫治疗病例选择入选标准：①年纪大于18岁；②病理组织学或细胞学确诊为肿瘤患者；③卡氏体力情况评分标准60分以上；④预计生存期最少大于3个月；⑤签署知情同意书；如若能够接收手术治疗或其它方式能够取得一定数量肿瘤组织件或细胞患者最正确。权威细胞免疫治疗开展情况第10页细胞免疫治疗病例选择排除标准：①脏器移植者；②长久使用免疫抑制药品或正在使用本身免疫性疾病者；③身体情况较差，伴严重心肺肝及肾功效不良者（心功效不全IV级以上；呼吸衰竭；国内肝功效分级C级以上；肾功效衰竭及尿毒症期）；④脑转移并伴意识障碍者；⑤精神疾病者；⑥急性肝炎或其它急性感染病活动期、HIV感染者；⑦怀孕或哺乳期妇女；⑧对本治疗中全部生物试剂过敏者；⑨T细胞淋巴瘤；权威细胞免疫治疗开展情况第11页细胞免疫治疗过程

每位患者在接收免疫治疗前1-2天内，需完善检验包含：血常规、血型、感染筛查、肝肾功、血离子、凝血功效、T细胞亚群、肿瘤标志物、心电图、心功效。对于有可观察靶病灶病例，治疗前需进行基线评定，即有最少1个月内影像检验，如CT、MRI等签署知情同意书权威细胞免疫治疗开展情况第12页细胞免疫治疗过程自体外周血单个核细胞采集：血细胞分离机（PBMC液50-60ml，即≥1×109及血浆80ml）免疫活性细胞制备：DC培养、CIK培养7-8天开始收获DC细胞;12-16天开始收获CIK细胞细胞回输：静脉输注CIK、DC各分4次回输，交织进行。每次回输细胞数为CIK﹥1×109、DC﹥1×107一疗程：4DC+4CIK大约1个月。权威细胞免疫治疗开展情况第13页DC制备流程负载肿瘤抗原成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞肿瘤抗原临床疗效监测

DC细胞成熟抗原负载细胞分选14权威细胞免疫治疗开展情况第14页15INF-γ、CD3McAb、IL-2权威细胞免疫治疗开展情况第15页细胞免疫治疗临床观察指标生活质量改进免疫功效检测客观疗效评定不良反应权威细胞免疫治疗开展情况第16页观察指标：生活质量改进主要应用EORTCQLQ-C30生命质量测定表及KPS评分标准评价患者生活质量改进卡式评分增加：KPS评分增加≥20分疼痛程度减轻：疼痛减轻≥50％食欲及睡眠改进胸腹水降低权威细胞免疫治疗开展情况第17页权威细胞免疫治疗开展情况第18页观察指标：免疫功效改进治疗前及治疗后1周，采集患者外周血，采取流式细胞仪检测T细胞亚群（CD3、CD4、CD8、CD3/CD56等含量及百分比），评定患者治疗前后免疫功效改进。权威细胞免疫治疗开展情况第19页观察指标：客观疗效评定近期疗效：1.靶病灶大小改变：按照RECIST1.1版评定肿瘤近期疗效，即以治疗前后影像学检验为依据进行评价，分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、病灶稳定(SD)和进展(PD)2.疾病控制率（DCR）：CR+PR+SD反应率（RR）：CR+PR远期疗效：无病生存时间（DFS）无进展生存时间（PFS）总生存（OS）

权威细胞免疫治疗开展情况第20页观察指标：不良反应每次输注CIK或CIK细胞时均观察有没有寒战、发烧及过敏等症状，不良反应按照美国国立癌症研究所制订通用药品毒性反应标准（NCI-CTC），分为0～IV度。权威细胞免疫治疗开展情况第21页治疗基本流程疗效观察单个核细胞采集细胞分离、扩增细胞判定及无菌检测细胞回输权威细胞免疫治疗开展情况第22页新试验室建成后开展概况单采例次：6（2011.3.15～）肺癌1例直肠癌1例胃癌1例非霍奇金淋巴瘤1例甲状腺癌1例恶性黑色素瘤1例回输例次：临床疗效及不良反应有待于深入观察

权威细胞免疫治疗开展情况第23页道路曲折前景光明权威细胞免疫治疗开展情况第24页

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11clinicaltrials.867patients,.426

patientsweretreated.

MosttrialsincludedpatientswithHCC,gastriccancer,

andHodgkin,non-Hodgkindisease.

In10of11studies,autologousCIK

cellswereused.权威细胞免疫治疗开展情况第27页The1-,3-and5-yearDFSinpatientsreceivingCIKcellswhencomparedtonoCIKcelltreatment(127patients)Conclusion:Adjuvantimmunotherapywithcytokineinduced

killercellsmaypreventrecurrenceandimprove

qualityoflifeandprogression-freesurvivalrates

in

patients

withcancer.权威细胞免疫治疗开展情况第28页生物中心概况医生10人、博士2人，硕士5人、护士7人；技术人员7人主任医师3人，副主任医师3人，主治医师1人，医师3人。病床30张；单采室：血细胞单采分离机1台肿瘤生物治疗门诊权威细胞免疫治疗开展情况第29页概念：是机体内最有效、功效最强专职抗原提呈细胞（APC）它能高效地摄取、加工处理和递呈抗原未成熟DC含有较强捕捉抗原及迁移能力成熟DC能有效激活初始型T细胞处于开启、调控、并维持免疫应答中心步骤

DC，树突状细胞免疫疗法权威细胞免疫治疗开展情况第30页肿瘤患者抗原提呈缺点做为抗原递呈细胞DC细胞数量不足。肿瘤细胞分泌大量抑制因子如转化生长因子（TGF-β）等抑制免疫反应。缺乏危险信号，DC细胞不能完全成熟。肿瘤细胞形成生理屏障妨碍DC摄取抗原。肿瘤患者体内存在过量调整性T淋巴细胞(Treg)产生免疫抑制效应。要避开这些原因影响，体外诱导激活树突状细胞是最高效一个方法！权威细胞免疫治疗开展情况第31页DC杀瘤机制在机体抗肿瘤免疫反应中，细胞免疫是主要形式。而产生CD8+细胞毒性T细胞(CTL)是有效抗肿瘤细胞免疫关键。在体外以肿瘤抗原专一地冲击致敏、激活DC，将摄取了肿瘤抗原DC回输至体内，携带肿瘤抗原DC再将抗原信息提呈给T细胞时，活化了T细胞，从而诱导机体产生了含有特异性杀伤肿瘤细胞CTL，因而对肿瘤产生一定治疗作用。权威细胞免疫治疗开展情况第32页DC应用当前，DC疗法，在我国已被同意用于肿瘤患者临床治疗，已上全国及辽宁省医疗服务价格项目规范，也是当前国内唯一被同意应用于临床肿瘤疫苗类治疗方法，已经大量应用于肿瘤临床免疫治疗。（FDA同意Provenge治疗晚期前列腺癌疫苗)对肿瘤切除术后癌症患者在术后进行CIK过继免疫治疗，杀灭残余肿瘤细胞同时，结合DC疗法，可激发机体特异性抗肿瘤免疫，到达长久对肿瘤细胞控制杀伤效果。权威细胞免疫治疗开展情况第33页DC制备流程负载肿瘤抗原成熟DC细胞细胞回输诱导DC细胞肿瘤抗原临床疗效监测

DC细胞成熟抗原负载细胞分选34权威细胞免疫治疗开展情况第34页DC细胞疫苗优势整个治疗过程病人简单易行，非常轻松，无痛苦和不适。培养所需淋巴细胞数量少，不需要采集大量外周血。诱导并激活病人本身特异性抗肿瘤免疫反应。诱导产生免疫记忆，使机体取得持久抗肿瘤免疫力。可治疗肿瘤种类广，对国内发病率较高肿瘤如消化道肿瘤（胃癌、直肠癌）、肺癌、前列腺癌、乳腺癌、肾癌、白血病等都有一定疗效。与CIK细胞治疗能够协同进行，到达互补效果。35权威细胞免疫治疗开展情况第35页CIK，细胞因子诱导杀伤细胞免疫疗法CIK细胞是一个用外周血单个核细胞（PBMC），在体外经过各种细胞因子培养激活后，取得对肿瘤细胞含有高效溶解毒性一群异质细胞。又称为NK细胞样T淋巴细胞：主要组成包含CD3+CD8+双阳性细胞、CD3+CD4+双阳性细胞以及CD3+CD56+双阳性细胞（主要效应细胞）。特点：兼含有T淋巴细胞强大抗肿瘤活性、NK细胞非MHC限制性杀瘤优点。应用CIK细胞被认为是新一代抗肿瘤过继细胞免疫治疗首选方案。权威细胞免疫治疗开展情况第36页CIK细胞作用机制CIK细胞权威细胞免疫治疗开展情况第37页CIK细胞特点增殖速度快杀瘤活性高，兼含有T淋巴细胞强大抗肿瘤活性杀瘤谱广，兼含有NK细胞非MHC限制性杀瘤优点细胞起源丰富：正常或患者骨髓或外周血单个核细胞均可诱导取得CIK细胞对多重耐药肿瘤细胞一样敏感杀瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制剂影响对正常骨髓造血前体细胞无毒性能抵抗肿瘤细胞引发效应细胞Fas-FasL凋亡权威细胞免疫治疗开展情况第38页CIK治疗适应证1、肿瘤根治性治疗结束后巩固、维持治疗，在接收细胞免疫治疗前应尽可能降低肿瘤负荷。2、肿瘤综合治疗组成部分，如在化疗治疗间隙期或在肿瘤局部放疗过程中同时联合自体免疫细胞治疗。3、晚期肿瘤患者辅助治疗。权威细胞免疫治疗开展情况第39页CIK治疗禁忌症1、细胞因子过敏。2、T细胞淋巴瘤病人应禁用。权威细胞免疫治疗开展情况第40页41INF-γ、CD3McAb、IL-2权威细胞免疫治疗开展情况第41页CIK细胞治疗优势整个治疗过程简单易行，病人非常轻松，无痛苦和不适。培养所需淋巴细胞数量少，不需要采集大量外周血。毁灭微小残留病灶对多重耐药肿瘤细胞敏感，故可用于治疗一些化疗不敏感肿瘤；不宜手术且对化疗和放疗禁忌肿瘤患者。显效时间短，病人能够马上感到食欲和精神状态好转以及疼痛减轻，使病人对继续接收治疗充满信心。与DC细胞治疗能够协同进行，到达互补效果。421012109106权威细胞免疫治疗开展情况第42页细胞回输方案治疗路径：全身治疗是经过静脉输注进行；

局部治疗是经过介入方法或直接注入病灶部位。治疗过程：第0天采集外周血单个核细胞分离培养；第7-8天开始收获DC细胞，分4次回输，每次间隔3-4天；第10天开始收获CIK细胞，分4次回输,与DC回输交织进行。总疗程：4DC+4CIK总疗程约为20天。权威细胞免疫治疗开展情况第43页观察指标普通状态改进免疫功效检测疗效评定不良反应权威细胞免疫治疗开展情况第44页普通状态改进卡式评分增加：KPS评分增加≥20分疼痛程度减轻：疼痛减轻≥50％食欲及睡眠改进胸腹水降低权威细胞免疫治疗开展情况第45页权威细胞免疫治疗开展情况第46页免疫功效改进治疗前及治疗后，采集患者外周血，采取流式细胞仪检测CD3、CD4、CD8、CD3/CD56，评定患者治疗前后免疫功效改进。T辅助细胞（%）T抑制细胞（%）NKT细胞（%）治疗前30.24±4.2128.94±5.386.53±0.46治疗后34.21±3.1224.55±4.7110.68±1.43权威细胞免疫治疗开展情况第47页疗效评定近期疗效：1.WHO标准或RECIST，分为