高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座

(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程A植物细胞B植物细胞原生质体A原生质体B融合体杂种细胞愈伤组织杂种小植株(6)杂种植株温故知新:高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第1页

回想已学知识，你是否已经见到过动物细胞融合实例？人-鼠(想像图)高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第2页2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第3页鼠细胞人细胞人工诱导一、动物细胞融合杂交细胞动物细胞融合（技术）：是指（在一定条件下）两个或多个细胞融合形成一个细胞过程。1、概念：高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第4页2、诱导融合原因化学法：聚乙二醇(PEG)诱导融合.物理法：电激融合生物法：灭活病毒诱导融合.病毒颗粒黏附细胞表面细胞膜连接细胞膜被病毒颗粒穿通细胞融合、形成杂种细胞

为何灭活病毒能作诱导剂？灭活丧失感染性但保留融合活性高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第5页取得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活病毒

物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）直接诱导细胞融合去壁—原生质体融合—诱导新壁—杂种植株细胞膜流动性细胞膜流动性结果诱导方法步骤融合原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合比较取得杂交细胞小结高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第6页3、动物细胞融合技术意义和应用高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第7页问题：抗体由什么细胞产生？其化学本质是什么？与抗原作用特点？主要分布在哪里？二、单克隆抗体制备高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第8页抗体传统生产方法：从血清中分离抗体

该法制备抗体特点：

产量低、纯度低，且抗体特异性差。各种浆细胞动物体内各种抗体抗原高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第9页提醒：每一个效应B淋巴细胞只分泌一个化学性质单一，特异性强抗体。假如利用单个效应B淋巴细胞进行无性繁殖（克隆），形成细胞群，这么细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强抗体——单克隆抗体。问题：怎样取得化学性质单一、特异性强抗体呢？高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第10页材料：效应B细胞在体内只能由B淋巴细胞增殖、分化而来,不再进行分裂,在体外培养条件下，也极难分裂。思索：用什么方法才能让B淋巴细胞在体外培养时既能产生抗体又能无限增殖?高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第11页杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体

既能产生特异性抗体，又能大量繁殖细胞骨髓瘤细胞能无限增殖+一个浆细胞只分泌一个特异性抗体设计方案：米尔斯坦科勒高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第12页读下面一段文字资料，找出单克隆抗体概念

人们发觉，在动物发生免疫反应过程中，体内B细胞能够产生多达百万种以上特异性抗体，不过每个B细胞只分泌一个化学性质单一、特异性强抗体。要想取得大量单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。单克隆抗体概念单:单个细胞克隆:无性繁殖单克隆抗体:单个细胞克隆产生化学性质单一特异性强抗体高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第13页单克隆抗体制备问题思索Q1Q2细胞两两融合后，有哪些类型？B-B;B-瘤;瘤-瘤哪种是需要类型，要筛选吗？高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第14页①细胞合成DNA有D和S两条路径，其中D路径能被氨基嘌呤阻断。②人淋巴细胞中有这两种DNA合成路径，但普通不分裂增殖。

③鼠骨髓瘤细胞中只有D路径，没有S路径，可是能不停分裂增殖。你想到筛选杂交瘤细胞方案了么？

小资料：高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第15页单克隆抗体制备问题思索Question经过选择培养基筛选杂交瘤细胞群进行克隆是否就得到产生纯度高抗体？还需怎么办？高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第16页有限稀释法稀释屡次稀释对能产生特异性抗体单个杂交瘤细胞进行克隆，即单细胞克隆。由它产生抗体，即单克隆抗体。将培养皿孔内上清液取出，检测抗体。多孔细胞培养板高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第17页单克隆抗体杂交细胞灭活病毒等伎俩小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞经免疫小鼠提取杂交瘤细胞第一次筛选用特定选择培养基第二次筛选能产生专一抗体杂交瘤细胞体外培养注射到小鼠腹腔提取单克隆抗体4.单抗制备过程中应用了那些技术？动物细胞融合、动物细胞培养1.此过程中最少进行了几次筛选？目标相同吗？3.单克隆抗体优点？特异性强，灵敏度高，可大量制备。2.最终从哪儿提取单克隆抗体？高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第18页（1）作为诊疗试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速（如同位素标识单克隆抗体，可诊疗肿瘤、心血管畸形等）三、单克隆抗体应用高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第19页（2）治疗疾病和运载药品生物导弹=单克隆抗体+药品（治疗肿瘤）(“生物导弹”—单抗导向，药品为弹头)单克隆抗体应用疗效高、副作用小高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第20页1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合是（）A.经过免疫B淋巴细胞B.没经过免疫T淋巴细胞

C.经过免疫T淋巴细胞D.没经过免疫Ｂ淋巴细胞A巩固练习2.动物细胞融合与植物体细胞杂交比较中，正确是（）诱导融合方法完全相同B.所用技术伎俩基本相同C.操作步骤基本相同D.都能形成杂种细胞D高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第21页3.单克隆抗体制备过程中培育杂交细胞是（）A.由小鼠能产生抗体B淋巴细胞与肝细胞融合B.由小鼠一个B淋巴细胞诱导融合而成C.由小鼠一个B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成D.由小鼠一个B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成D4.只能使动物细胞融合惯用诱导方法是（）

A．PEG

B．灭活病毒C．电刺激D．离心B高中生物选修三动物细胞融合和单克隆抗体专家讲座第22页5.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞本身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞本身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.②④B.①③⑤

C.①②③④