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文档简介
实验五、动物组织一、目的与内容(一)目的
1.了解动物的四类基本组织的结构特点,理解组织结构与机能的密切关系;2.掌握血液涂片的方法。(二)内容1、上皮组织的观察:单层扁平上皮装片,小肠横切,纤毛上皮装片等;2、肌肉组织的观察:平滑肌装片,骨骼肌横切,心肌切片等;3、结缔组织的观察:疏松结缔组织装片,腱纵切,透明软骨等,自制人或蛙血液涂片等;4、神经组织的观察:脊髓横切,运动神经元装片等。二、材料与用品
(一)材料蟾蜍,动物各组织的玻片标本[一般用苏木精一曙红(也称伊红)染色,简称H·E染色]。(二)用品1.器具显微镜,解剖器具,蜡盘,载玻片,盖玻片,烧杯,染色缸,玻片架,蛙钉,采血针、棉花等。2.试剂0.65%生理盐水,甘油,香柏油,甲醇,吉姆萨染液或瑞氏染液,蒸馏水,乙醚、等。①取血:左手从蛙背面握蛙,右手持注射器从蛙胸部进针刺入蛙心脏采血。滴1滴在洁净载玻片右端,注意血滴不宜过大。(或者从人的左手无名指指端内侧取血。)②涂片:另取边缘光滑的1块载玻片作推片斜置于第1块载玻片上血滴的左缘,成40。左右角度。将推片稍向右移,接触血滴,使血液充满两玻片之间的夹角。再将推片向左方匀速推进,使玻片上留下薄而均匀的血膜。左右摇动涂有血膜的玻片,使之尽快干燥,避免细胞皱缩。
③染色:晾干后,用瑞特氏染液数滴加于涂片上固定染色1min,在染液的上面再加蒸馏水再染3min,然后在染色玻片的一端用自来水细流缓缓冲去染液(在稀醋酸液中蘸数下),斜立血涂片于玻片架上,晾干后置显微镜下观察。
注意事项:第一.滴加瑞氏染液的量不宜太少,太少易挥发变干,形成颗粒。1张血片,一般可滴加2~3滴染液。第二.冲洗时应将蒸馏水直接向血膜上倾倒,使液体自血片边缘溢出,沉淀物从液面浮去。切勿先将染液倾去再冲洗,否则沉淀物附着于血膜上不易冲掉。分类:单层上皮和复层上皮功能:保护、感觉、分泌和吸收。特征:(1)上皮细胞主要为柱状、扁平状。(2)排列紧密,有单层和多层之分。(3)细胞间紧密连接,间质少。(4)基部分泌一层很薄的基膜。1.上皮组织(二)观察各组织制片低倍镜观察,可看到许多大小不等的、圆形或椭圆形的红色甲状腺滤泡。高倍镜观察,滤泡壁由1层立方体形上皮细胞构成,核圆形、蓝紫色,位于细胞中央,细胞质粉红色。(1)单层立方上皮(图3—3)(兔甲状腺切片)(2)单层柱状上皮(图3—4)(猫小肠横切片)
低倍镜观察,可见黏膜面形成许多指状突起,突向管腔,突起表面覆有1层柱状上皮。
单层柱状上皮
(胃、肠黏膜)(3)假复层纤毛柱状上皮(兔气管横切片)气管壁内表面即黏膜层由假复层纤毛柱状上皮组成。肉眼辨别切片中朝向气管腔的黏膜层,并置于视野中央。低倍镜观察,管壁黏膜表面着色较深的一厚层即假复层纤毛柱状上皮。细胞排列紧密,细胞界限不清晰,细胞核位置高低不等。高倍镜观察,该上皮由4种细胞成。锥形细胞:基部宽,顶部窄,不能达到上皮游离面,细胞排列在个上皮的下部。梭形细胞:两端尖细,中间略宽,细胞核排列于整个上皮的中部。柱状细胞:胞体达上皮游离面,细胞游离面较宽,基部较细,细胞游离面有纤毛,细胞核排列于整个上皮的上部。杯状细胞:夹于柱状细胞之间,游离面无纤毛,细胞核也排列在上皮的上部。
(4)复层扁平上皮(图3—6)(猫食管横切片)
复层扁平上皮位于食管壁内表面。低倍镜观察,此上皮由许多层细胞组成,上皮的基底面呈波浪形。2.肌组织
骨骼肌心肌平滑肌(1)心肌(图3—9)(狗心肌切片)先低倍镜后高倍镜观察,在纵切面上,心肌纤维彼此以分支相连,核卵圆形,位于肌纤维中央。缩小虹彩光圈,使光线暗些,可看到心肌纤维的横纹,但不及骨骼肌的明显。在心肌纤维及其分支上,可见到染色较深的梯形横线,即闰盘。在横切面上,心肌纤维为不规则横线,由于切片的关系,有的有核,有的无核。心肌与骨骼肌不同:(1)心肌纤维具有分支,各纤维以分支相连成网;(2)一个椭圆形细胞核位于纤维的中央;(3)心肌也有横纹,但不如骨骼肌的明显和规则。3.神经组织
(1)多极神经元(兔脊髓横切片)
肉眼观察观脊髓横切片中央为蝴蝶状的灰质的其中心有一孔为中央管,灰质较狭的一端为背角,较宽的为腹角。包围在灰质周围染色较淡的部分是白质。低倍镜观察,将脊髓灰质腹角移至视野中央,观察神经元。在腹角内有许多较大的多突起细胞即脊髓腹角运动神经元,为多极神经元。神经元胞体上的突起包括树突和轴突,但二者不易区分,一般可根据轴突基部的轴丘处染色较浅(无尼氏体)来识别轴突。选择1个胞体较大、突起较多、核较清晰的神经元移至视野中央进一步观察。(2)运动终板(兔肋间肌撕片装片)低倍镜观察,可见骨骼肌平行排列成束,呈蓝紫色或紫红色,肌原纤维的横纹明显。传出神经纤维染成黑色,形似树枝,分布到骨骼肌纤维上,当它们接近肌纤维时,其末端再行分支成爪形小球,附着于肌纤维表面。高倍镜观察,神经纤维终末的爪状分支端膨大,在与肌纤维附着处形成椭圆形板状隆起,即为运动终板。骨骼肌轴突(2)疏松结缔组织(图3—12)(小白鼠皮下疏松结缔组织平铺片,H·E染色)
由排列疏松的纤维与分散在纤维间的多种细胞构成的,纤维和细胞埋在基质中,充满在器官内部的间隙中。细胞种类多,间质也多。(4)致密结缔组织(图3—14)(猫的尾腱纵切片)
先低倍镜后高倍镜观察。胶原纤维束粗而直,彼此平行排列。腱细胞在纤维束
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