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文档简介
实验三、寄生虫学粪便检查法(三)一、目的通过本次实验学习掌握线虫幼虫的检查方法、学习掌握虫卵的计数方法;了解线虫幼虫的形态。二、内容1、学习虫卵计数法a)简易计数法b)麦克马斯特计数法2、学习线虫幼虫检查法a)幼虫培养法b)温水引诱法本次实验的意义:学习虫卵计数法的操作技术,对于我们判定宿主感染寄生虫病的强度,或者检验驱虫药使用后的效果如何,都有着重要的参考价值。1、寄生虫排卵有一定的规律性,因此,宿主所排出的粪便中虫卵的含量就会有所很大差异,而且虫卵在同一个粪样中,分布也是不均匀的;2、粪便的浓稠程度的不同,虫卵的含量也会不同。如果要想获得较为准确的数据,不仅要克服主观上的不足外,还要将被检宿主在24小时内所排出的粪便全部收集起来,经充分混合均匀后,称量好总量,按一定的比例来称取粪样,通过换算后,得出的结果才是较为准确的数据。四、操作方法
1、虫卵计数法:(1)、简易计数法:取粪样(1g)_加清水(10-15倍)_搅拌均匀_过滤_静置(30-40分钟)_倒去上清液_再加饱和盐水_混匀_倒入青霉素瓶_用吸管加满并使之凸出瓶口_加上盖玻片_静置(20-30分钟)_垂直取下盖玻片_镜检_并盖上另一块盖玻片(一般要检三片以上)。用吸管将粪液加满并使之凸出瓶口(2)、麦克马斯特计数法;麦克马斯特计数板的规格:它由两块玻片所组成,其间隔距离为1.5mm,上面的盖玻片上一般有1-2个1平方厘米的方格,每个计数室的体积为o.15立方厘米,容量为o.15ml。1.5mm1.5mm麦克马斯特计数板麦克马斯特操作方法:取样(2g)_加饱和盐水(58ml)_充分混匀_过滤_混匀后立即用吸管注入计数室内_静置(1-2分钟)_镜检。计算公式:每克粪便中的虫卵数=全部计数室的虫卵总数/计数室的个数×2002、线虫幼虫的检查法:方法:在平皿中垫上一层吸水纸--将含有虫卵的粪便(混匀)--放入平皿中(如粪便太干燥时洒适量的水,如太湿时应洒适量的炭末)--塑成半球状(压平并略高出平皿口)--放入恒温箱内(25-30℃,夏天可放在室内,根据情况可适当洒点水,以保持吸水纸的潮湿度)--经过7-10天的时间--就会发育成第三期幼虫。(2)、温水引诱法:
A、贝尔曼法:该方法检出率高,适用于检查各种线虫的幼虫,包括土壤、饲料和器官内的幼虫检查。贝尔曼分离器装制:用一个直径为10-15cm的漏斗,下接一条10-15cm长的胶管,再接一个沉淀管,并准备一个止水夹和铜滤筛。
试管胶管漏斗滤筛操作方法:
取培养好的粪样(10-20g)_用两层纱布包扎好_置于漏斗中的铜筛中_沿漏斗边缘加入37-40℃的温水(以淹盖粪样为佳)_静置(1-2小时)_夹好止水夹_取下沉淀管_吸去上清液_取沉渣镜检。如果没有沉淀管时,在加温水之
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