造血肝细胞的移植与捐献

造血肝细胞的移植与捐献第1页，共57页，2023年，2月20日，星期二萌芽阶段:19世纪末至20世纪中叶科学家开始应用骨髓治疗疾病，但未引起足够的重视，仅有少数的报道。1950年--1980年是造血干细胞移植术的早期研究阶段。1980年--2000年是造血干细胞移植术的发展时期。造血干细胞移植史第2页，共57页，2023年，2月20日，星期二

E.DonnallThomas1990年诺贝尔医学奖得主骨髓移植治疗白血病的主要奠基人；直到现在，骨髓移植仍是治疗严重血液病的最好方法。第3页，共57页，2023年，2月20日，星期二血液特性骨髓（造血干细胞）移植的原理为什么要建骨髓库？什么样的人适合成为志愿者？(注意事项)学生报名经常遇到的问题？捐献过程、原则。捐献造血干细胞的意义?目录第4页，共57页，2023年，2月20日，星期二细胞成份占血液总量的40-45%，其中：

RBC（红细胞）Hb12~15g/dl,Hct36~45%

WBC（白细胞）5000~10000/ul

BPC（血小板）10~30x105/ul

液体成份即血浆占血液总量的55-60%，其中：

血清（H2O）91~92%

纤原8~9%Protein:Alb.clottingfactors,Anti-clottingfactors

saltsandions:Na+,K+,CL-etc

others

血液组成第5页，共57页，2023年，2月20日，星期二第6页，共57页，2023年，2月20日，星期二造血干细胞

(hematopoieticstemcell,HSC)造血干细胞存在于骨髓(BM)中功能：自我更新增殖、分化潜能产生成熟血细胞维持个体终生造血免疫活性细胞建立机体免疫系统第7页，共57页，2023年，2月20日，星期二

1.具有自我更新能力。（捐献不会影响捐献者的造血能力）

PHSC分裂、增殖形成各系造血干细胞的同时，部分(约50%)PHSC始终保持PHSC“自我状态”，因此它取之不尽、用之不竭。持久地维持正常造血。

HSC细胞生物学特性:第8页，共57页，2023年，2月20日，星期二第9页，共57页，2023年，2月20日，星期二HSC细胞生物学特性:

2.具有强大的分裂增殖形成血液各系造血祖细胞的潜能。各系祖细胞将进一步增殖分化，最终产生各类成熟血细胞。每天均有部分HSC/HPC增殖分裂，可产生10亿个新细胞替代消耗和衰老的血细胞。增殖分化的方向是不可逆的。各级HSC/HPC的增殖分裂能力，自我更新能力，移植能力进行性下降。调控HSC/HPC增殖分化的机制十分复杂。取决于HSC/HPC环境因素的相互作用。

第10页，共57页，2023年，2月20日，星期二

3.具有可移植性。能在受体内植活，重建受体的造血和免疫功能。

HSC细胞生物学特性:第11页，共57页，2023年，2月20日，星期二Allogeneichematopoieticstemcelltransplantation(HCT)isoftentheonlypotentiallycurativetherapyforleukemiaandlymphoma第12页，共57页，2023年，2月20日，星期二BM-HSC（骨髓干细胞）全麻、多点穿刺植活时间短、GVHDPBSC（外周血造血干细胞，正常外周血中<0.1%动员后1～10%）植活时间短、GVHDCBSC（脐带血）100ml总量不足，适用于40kg以下儿童，GVHD少、但植活时间长

HSC来源第13页，共57页，2023年，2月20日，星期二造血干细胞移植1、对象：白血病，恶性肿瘤后造血功能破坏，造血系统疾病（AA）等2、HSCT原理超大剂量化疗、放疗最大限度杀灭肿瘤细胞，同时又造成致死性损伤，特别是骨髓功能；预先准备HSC，化疗、放疗3.HSCT的必要条件①有HSC供体：auto-（自体）;allo-（异体）②Allo-HSCT必须HLA相容③足够HSC数量CD34+

２～３×１０６/kg

MNC２～３×１０8

/kg

CBSC可少一些④清除受体自身BM和免疫系统，以便HSC植入⑤层流病房，相关抢救治疗措施4.回输:将造血干细胞混悬液直接输到病人体内第14页，共57页，2023年，2月20日，星期二移植后并发症感染排异:移植物抗宿主病(graft-versus-hostdisease,GVHD)复发第15页，共57页，2023年，2月20日，星期二移植成功的关键患者与供者的HLA配型相合第16页，共57页，2023年，2月20日，星期二HLA(白细胞表面抗原)主要组织相容性复合物（MHC）是决定同种异体组织、器官移植时，是否引起移植排斥反应的一组基因。在人类主要组织相容性复合物的产物称为HLA（HumanleukocyteAntigens）。HLA系统是至今所知人类最高度多态性的遗传系统，构成人体生物学“身份证”。每个个体的免疫活性细胞都以HLA抗原为识别“自己”和“非己”的标志，从而通过免疫反应排除“非己”，保持个体的完整性。在进行骨髓移植或肾等器官移植时，要进行精确的HLA配型，受者供者之间HLA相合程度越高，造成排斥反应（HVG）和移植物抗宿主病(GVHD)的机率越低，反之则高，极易造成移植失败。第17页，共57页，2023年，2月20日，星期二HLA的基础知识

HLA基因复合体，位于第６号染色体短臂，有HLA-A、B、C、DR、DP、DQ六个位点，还有补体，备解素，TNF基因紧密连锁（supergene），高度多态，共显性遗传第18页，共57页，2023年，2月20日，星期二

HLA家系遗传规律

子代一条单倍型来自父亲，另一条来自母亲，可以做亲子鉴定,例如某人HLA分型如下：

HLA-A1,B5,DR1（父源）

HLA-A2,B7,DR3（母源）因此,子女与父母均为单倍型相同。第19页，共57页，2023年，2月20日，星期二

HLA家系遗传规律

同胞兄妹1/4机会完全相同1/4机会完全不同1/2机会一半相同第20页，共57页，2023年，2月20日，星期二

HLA抗原群体分布HLA抗原分布呈现多态性人群地区种族差异第21页，共57页，2023年，2月20日，星期二移植面临的问题(为什么要建立中华骨髓库)供者干细胞来源的限制:

大约只有30%的患者有机会在亲缘中找到HLA配型相合的供者，而70%需要在非亲缘间寻找到。中国的独生子女政策使患者在兄弟姐妹(亲缘)中找到配型的可能性大大减小。同时,不同种族间遗传差异很大,华人在国外找到配型的可能性很小,所以要建立一个有一定库容的非血缘关系华人骨髓捐献者资料库第22页，共57页，2023年，2月20日，星期二HLA多态性使配型相合的概率在几万、几十万甚至几百万分之一，所以骨髓库库容要达到一定数量才具有临床意义。自20世纪80年代以来，世界各国纷纷建立骨髓库。人类自救与互助行动标志着人类文明程度的提高无关供者骨髓库的建立和应用第23页，共57页，2023年，2月20日，星期二骨髓库的概念存贮志愿捐献者有关资料的计算机数据库。是为骨髓（外周血造血干细胞）移植的志愿捐献者和患者（移植医院）提供服务的工作体系。第24页，共57页，2023年，2月20日，星期二

由于各国骨髓库的组织形式不同，工作内容亦有差异，但至少包括如下几方面内容：征募志愿者；进行志愿者HLA－A、B、DR分型；血样及资料的保存；向患者（医院）提供检索服务；对与患者HLA分型相合的志愿者进行再动员；骨髓或外周血造血干细胞采集及应用。骨髓库的任务第25页，共57页，2023年，2月20日，星期二世界骨髓库（BMDW）简介1986年美国最早成立，英国、德国、法国等数十个国家相继建立。1994年，为消除跨国查询、捐献和移植障碍，成立世界骨髓库，各国可自愿参加（中国尚未加入），总部位于荷兰莱顿市。截止2009年12月22日，有44个国家的63个骨髓库和26个国家的脐血库组成，造血干细胞捐献志愿者有1358多万人，其中美国(NMDP)志愿者最多，700多万。第26页，共57页，2023年，2月20日，星期二部分国家及地区资料库库容比较国家人口数志愿者数（约）现每年捐献例数（约）中国13亿100万300美国3亿700万4000德国8200万360万3000英国6060万76万2500台湾2300万32万350第27页，共57页，2023年，2月20日，星期二资金(血样HLA检测,每份在500元左右)病人及志愿者的HLA多态性程度（常见型还是罕见型）；有效库容（能联系得到、适龄、身体健康、并愿意捐献志愿者的多少）。因此，骨髓库的规模，因种族、地区不同，要求也不同，如果要求80％的患者能找到一例HLA－A、B、DR全相合的供者，在种族混杂的美国，库容至少要达到300万份；在HLA多态性程度较低的日本，只需3万份即可；在中国，要100万。每年还有因疾病、超龄、死亡等原因淘汰影响骨髓库规模的因素第28页，共57页，2023年，2月20日，星期二中华骨髓库概况中国造血干细胞捐献者资料库（中华骨髓库），成立于1992年。由于种种原因，发展缓慢，至2001年底入库资料仅有3万份，远远不能满足患者的需要。因此，2001年，在国务院领导的关心下，中国红十字会受卫生部委托，全面扩容中华骨髓库。在全国31个省设立分库，负责本省的志愿者招募、组织、血样检测、再动员、捐献服务及捐献后随访及本地区患者的检索配型等工作。目标:服务于全球的华人患者第29页，共57页，2023年，2月20日，星期二中华骨髓库组织结构示意图：第30页，共57页，2023年，2月20日，星期二中华骨髓库网络结构图第31页，共57页，2023年，2月20日，星期二发展速度第32页，共57页，2023年，2月20日，星期二第33页，共57页，2023年，2月20日，星期二政策支持

1、为了规范和加强造血干细胞移植和采集技术管理，提高造血干细胞移植临床疗效，卫生部于2006年7月印发了《非血缘造血干细胞移植技术管理规范》和《非血缘造血干细胞采集技术管理规范》。中国红十字会总会于8月10日予以转发，总库将在理顺业务流程，完成网络技改的基础上完善检索查询、捐献者和患者随访等相关规定。第34页，共57页，2023年，2月20日，星期二

2、2006年8月卫生部办公厅、中国红十字会总会办公室、总后卫生部医疗管理局联合下发了《关于推荐2004-2005年度全国无偿献血先进单位和个人的通知》，“通知”明确，此次表彰增设“无偿捐献造血干细胞奉献奖”，从而使这项工作列入政府表彰范围。第35页，共57页，2023年，2月20日，星期二志愿捐献者的条件

1、年龄：报名年龄18～40周岁捐献年龄18～55周岁；2、身体健康、有无偿献血经历：符合献血条件就可以捐献造血干细胞，体重女＞45Kg,男>50Kg;

3、在当地有相对固定的工作单位或住址；4、家庭成员的支持与理解。

5、学生：毕业后在本省工作，征求家长同意后可在当地报名，流动性很强的等待工作稳定时报名第36页，共57页，2023年，2月20日，星期二大学生报名经常遇到的问题流动性：工作的不确定，地址变化后未及时修改而造成流失；捐献意愿变化：在报名时未征求父母家人意见，忽视了他们对捐献的对抗情绪，而不得不终止；第37页，共57页，2023年，2月20日，星期二怎样加入中华骨髓库江苏分库1、与当地红十字会联系，填写《捐献造血干细胞志愿者同意书》；2、在当地红十字会安排下，采集5～6ml血液，由实验室进行HLA分型检测；(有的市可以直接在献血车上报名采样)3、分库将有关资料录入计算机数据库。第38页，共57页，2023年，2月20日，星期二捐献造血干细胞实际上就是献血捐献的过程、原理与捐献血小板相同独特性：操作程序较复杂报名后要等若干年才可能捐献需要有特定的患者高分辨相合根据患者的治疗时机选择志愿者的捐献时间捐献前注射动员剂在定点采集医院捐献（而不是在血站）第39页，共57页，2023年，2月20日，星期二成为志愿者注意事项报名时应确定自己了解捐献的全过程确定将来有患者需要你捐献的时候能履行承诺报名时不要有从众心理，勉强自己跟周围人一起报名逐项详细填写《志愿捐献者同意书》，字迹工整报名后你的联系方式有变化要及时通知分库修改保持良好的生活方式，维持最佳的健康状态第40页，共57页，2023年，2月20日，星期二志愿捐献者报名时要认真填写表格第41页，共57页，2023年，2月20日，星期二抽取血液标本做HLA分型检测第42页，共57页，2023年，2月20日，星期二资料录入检索第43页，共57页，2023年，2月20日，星期二捐献造血干细胞工作的基本原则

无偿、自愿报名时深思熟虑,捐献时义无反顾捐赠无特定对象供、患双方回避第44页，共57页，2023年，2月20日，星期二高分辨检测：志愿者被检索到后，红会的工作人员会通知您，在征得您的同意后采集5毫升血样送实验室做高分辨检测。体检：红会工作人员会带您去当地的三级医院进行体检，确认身体健康状况符合条件后安排捐献。捐献时假期由红会工作人员与志愿者所在单位领导协商、请假。第45页，共57页，2023年，2月20日，星期二造血干细胞捐献（采集）采集方式：骨髓采集和外周血采集外周血采集因痛苦少、安全、简便、普通人都能耐受2000年后世界各国采用外周血采集逐渐增多，骨髓采集逐渐减少中华骨髓库采用的是外周血造血干细胞采集第46页，共57页，2023年，2月20日，星期二1997-2006:Worldwideunrelateddonorhematopoietic

celltransplantation

1997-2006:全世界无关供者造血干细胞移植Bonemarrow骨髓Peripheralbloodstemcells周边血液Cordblood(approximate)脐带血(近似值）第47页，共57页，2023年，2月20日，星期二NMDPfacilitatedtransplants

(fiscalyear1987–2008)

(1987-2006通过NMDP进行配型的移植Cordblood脐带血Peripheralbloodstemcells周边血液Bonemarrow骨髓第48页，共57页，2023年，2月20日，星期二造血干细胞的动员正常情况下，外周血中造血干细胞含量很少，占有核细胞＜0.1%，需用药物才能使外周血中有核细胞数增多。重组人白细胞集落剌激因子（动员剂）G-CSF5～10μg/Kg体重/日，皮下注射，2次/日,连续4～5天。动员剂：将骨髓中的造血干细胞动员到外周血中，以便通过外周血静脉采集造血干细胞。国际通用动员剂——惠尔血，安全可靠,用于外周血采集已有10年多。动员剂副作用：感冒样症状，骨头酸痛感。第49页，共57页，2023年，2月20日，星期二造血干细胞采集血小板采集血细胞分离机将外周血中的造血干细胞分离出来，通过另一静脉通道将分离后的血液回输给志愿者，所用管道都是一次性的。造血干细胞悬液量：50-200毫升卫生部标准：MNC（有核细胞）5×