慢病毒实验原理和慢病毒包装系统介绍

———慢病毒实验原理和慢病毒包装系统介绍

慢病毒是一种有包膜的RNA病毒，直径为80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。

慢病毒实验原理

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，基因组为双链RNA。但区别于一般的逆转录病毒，慢病毒具有更广的宿主范围，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

重组慢病毒载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的工具载体，其毒性基因已经被剔除并被外源目的基因所取代，属于假型病毒。（一次性感染能力而无复制产生新病毒能力）

将靶基因随机整合到宿主的基因组中，并且能够在细胞系中稳定表达若干代，可以进行稳转细胞株的筛选。被广泛应用于各种细胞系基因敲除、基因过表达、RNA干扰。包装系统

慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。

慢病毒包装质粒可提供转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的辅助蛋白。

1.外壳糖蛋白识别并感染宿主细胞

2.结构蛋白病毒复制所需要的酶

慢病毒特点

1.慢病毒有广泛的宿主范围，能够有效地感染分裂细胞、非分裂细胞，特别适合于一些难转染的细胞（如原代细胞、干细胞、不分化的细胞）和对腺病毒感染具有较强免疫反应的细胞（如树突状细胞、单核细胞和间充质干细胞）等，能大大提高目的基因转导效率，而且目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加。

2.慢病毒能将外源基因有效地整合入宿主染色体上，介导目的基因稳定、长期的表达。因此，可以利用慢病毒建立稳定细胞株。

3.适用范围更广，不仅能用于体外实验，还能用于活体动物模型，尤其是动物成瘤实验。

慢病毒包装系统采用的包装系统是2代包装系统，即三质粒系统，该系统包括1个包装质粒(psPAX2)、1个包膜质粒(pMD2G)、1个目的基因质粒和1株包装细胞(293Tcell)。

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慢病毒实验原理和慢病毒包装系统介绍

慢病毒是一种有包膜的RNA病毒，直径为80-120nm，呈二十面体对称结构、球形。病毒颗粒最外层是包膜(包膜蛋白决定了感染细胞的类型)，再往里依次为基质蛋白和衣壳，最里面是两条相同的正股RNA链和酶(逆转录酶、整合酶和蛋白酶)。慢病毒实验原理

慢病毒（Lentivirus）是逆转录病毒的一种，基因组为双链RNA。但区别于一般的逆转录病毒，慢病毒具有更广的宿主范围，对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。

重组慢病毒载体是以HIV-1（人类免疫缺陷I型病毒）为基础发展起来的工具载体，其毒性基因已经被剔除并被外源目的基因所取代，属于假型病毒。（一次性感染能力而无复制产生新病毒能力）

将靶基因随机整合到宿主的基因组中，并且能够在细胞系中稳定表达若干代，可以进行稳转细胞株的筛选。被广泛应用于各种细胞系基因敲除、基因过表达、RNA干扰。包装系统

慢病毒载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。

慢病毒包装质粒可提供转录并包装RNA到重组的假病毒载体所需要的辅助蛋白。

1.外壳糖蛋白识别并感染宿主细胞

2.结构蛋白病毒复制所需要的酶

慢病毒特点

1.慢病毒有广泛的宿主范围，能够有效地感染分裂细胞、非分裂细胞，特别适合于一些难转染的细胞（如原代细胞、干细胞、不分化的细胞）和对腺病毒感染具有较强免疫反应的细胞（如树突状细胞、单核细胞和间充质干细胞）等，能大大提高目的基因转导效率，而且目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加。

2.慢病毒能将外源基因有效地整合入宿主染色体上，介导目的基因稳定、长期的表达。因此，可以利用慢病毒建立稳定细胞株。

3.适用范围更广，不仅能用于体外实验，还能用于活体动物模型，尤其是动物成瘤实验。

慢病毒包装系统采用的包装系统是2代包装系统，即三质粒系统，该系统包括1个包装质粒(psPAX2)、1个包膜质粒(pMD2G)、1个目的基因质粒和1株包装细胞(293Tcell)。

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