地贫基础知识与地贫筛查

Mar4,2014地贫基础知识与地贫筛查伯乐公司临床诊断部郑建树现在是1页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血历史回顾1925年，意大利医生Cooley首次报道5例具有严重贫血、脾脏肿大、异常的骨骼病变以及外周血出现大量幼稚红细胞的小儿病例,由于所有病人均来自地中海之滨的意大利和希腊，Cooley将其称之为“地中海贫血”（mediterraneananemia）。1932年，Whipple和Brasford借用希腊语thalassa（,意为“海洋”）将地中海贫血定义为海洋性贫血（Thalassemia）。现在是2页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血历史回顾1940年，美国血液学家Wintrobe报道地中海贫血患者的家族中存在轻型地中海贫血的患者，指出地中海贫血系常染色体不完全性显性遗传，有纯合子与杂合子之分。在我国，长期以来多数学者一直将海洋性贫血的原文Thalassemia译为“地中海贫血”.现在是3页\一共有99页\编辑于星期三地贫地域分布地中海沿岸国家：如意大利、希腊、塞浦路斯。非洲：主要在北非国家，阿尔及利亚及利比亚北部、埃及、苏丹和索马里北部亚洲：中东国家（沙特阿拉伯、伊朗、伊拉克）、中国、东南亚各国（印度、巴基斯坦、泰国、印度尼西亚、马来西亚等）。中国：长江以南省份，尤其以广东、广西、海南、四川、云南、台湾等省份为多发。现在是4页\一共有99页\编辑于星期三中国南方地中海贫血人群携带率地区Carrierrate(%)

a

地贫β地贫广西17.556.43广东8.532.54四川1.922.18台湾4.21.1香港5.023.41Xu,etal.JClinPathol2004.

Xiongetal.ClinGenet.2010.现在是5页\一共有99页\编辑于星期三广东省不同地区和地贫人群携带率地区

Carrierrate(%)a

地贫β地贫广州8.792.85珠海8.932.21湛江8.863.28韶关10.243.44汕头5.610.96平均数8.532.54JournalofClinicalPathology,2004;57(5):517-22.

现在是6页\一共有99页\编辑于星期三广西地区地中海贫血的流行病学调查地区Carrierrate(%)

a地贫

β地贫贺州19.557.36防城港15.635.8玉林14.386.23柳州13.166.1百色21.76.95南宁16.425.97平均数16.976.43现在是7页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血定义定义：地中海贫血是常染色体隐性遗传性慢性溶血性贫血。本质特征：由于珠蛋白基因的缺失或点突变使血红蛋白中的珠蛋白肽链有一种或几种合成减少或不能合成(mRNA↓,但肽链结构正常)，导致血红蛋白的组分改变，肽链失平衡，导致RBC寿命缩短及过早破坏所致的慢性溶贫。现在是8页\一共有99页\编辑于星期三Hb的结构和功能结构：

Hb=血红素+珠蛋白血红素=原卟啉+Fe++

珠蛋白=1对类肽链+1对β类肽链每一条珠蛋白肽链结合一个血红素分子，构成一个血红蛋白单体，血红蛋白是由两种（类和β类）共4个血红蛋白单体构成的四聚体。只有由两条类肽链和两条β类链组成的四聚体才是最稳定的。功能：携带O2和CO2现在是9页\一共有99页\编辑于星期三Hb的种类人类及各种动物的Hb其血红素部分都是相同的，不同的只是珠蛋白。：珠蛋白肽链可分为两大类α类肽链——α和ζβ类肽链——β、γ、δ和ε以上6种肽链组成了6种Hb,在发育不同阶段出现。现在是10页\一共有99页\编辑于星期三正常人血红蛋白组成的演变

现在是11页\一共有99页\编辑于星期三主要血红蛋白成分1、HbA：2β2，成人血红蛋白，在成人及6岁以上儿童的红细胞中占95%以上，在胎儿、新生儿红细胞中约20%；2、HbF：2γ2，胎儿血红蛋白，出生前及新生儿期占80%，出生6个月后降至不足1%；3、HbA2：

2δ2，约占2.5%；β地贫病人中含量上升，地贫、缺铁性贫血等病人中含量降低。现在是12页\一共有99页\编辑于星期三血涂片比较正常血象地贫血象地贫血象：红细胞着色不足、异形红细胞和骨髓成红血细胞增多症现在是13页\一共有99页\编辑于星期三

地中海贫血的病理生理一种或多种珠蛋白基因缺陷一种或多种珠蛋白肽链合成减少或缺如其他类型珠蛋白肽链相对过多珠蛋白肽链合成间的平衡异常正常Hb的生物合成降低--贫血过剩的珠蛋白肽链沉积于RBC，RBC被破坏–

无效造血和溶血骨髓造血代偿性增强，肠道铁吸收增加，输血--继发性铁负荷增多症现在是14页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血分类1、α肽链合成障碍—α地贫2、β肽链合成障碍—β地贫3、复合型肽链合成障碍---

αβ地贫现在是15页\一共有99页\编辑于星期三-地中海贫血

定义：

α地贫是由于16号染色体上α珠蛋白基因缺失（1~4个）或点突变，导致不同程度肽链合成不平衡,从而使血红蛋白生成障碍，并导致无效造血和红细胞破坏而产生溶血性贫血。分型：根据珠蛋白基因缺失程度的不同，分成4种类型：

HbBart’s胎儿水肿综合征

HbH病标准型地中海贫血静止型地中海贫血现在是16页\一共有99页\编辑于星期三分子生物学特征

珠蛋白基因位于16号染色体上。每条16号染色体上有2个珠蛋白基因，一对16号染色体上有4个珠蛋白基因。0地贫：一条染色体上2个基因都缺失。+地贫：一条染色体上只1个基因缺失，另1个正常。现在是17页\一共有99页\编辑于星期三-地中海贫血基因型链基因示意基因型基因型描述疾病状态

/0/0地中海贫血纯合子HbBart’s胎儿水肿

/

0地贫/+地贫杂合子HbH病

/0地中海贫血杂合子标准型地中海贫血

/+地中海贫血纯合子标准型地中海贫血

/+

地中海贫血杂合子

静止型地中海贫血

/正常无

现在是18页\一共有99页\编辑于星期三-地贫病理生理珠蛋白基因缺陷珠蛋白肽链合成减少或缺如胎儿期：肽链相对过多HbBarts(4)与非肽链合成之间的平衡异常，过剩的非肽链形成异常Hb正常Hb生物合成降低HbH沉积于RBC形成包涵体溶血生后：链相对过多HbH（4）宫内缺氧、水肿、死胎造血代偿性增强，肝脾肿大、骨骼病变

贫血肠道铁吸收增加，输血--继发性铁负荷增多症现在是19页\一共有99页\编辑于星期三静止型α地贫基因（α地贫2）发病机理

只缺乏1个肽链基因,链合成轻微受影响。

基因型：αα/-α、αα/ααT缺失一个基因，包括－

3.7缺失和－

4.2缺失或1个α基因突变临床表现无任何症状，与正常人无异。患者无任何症状，血象正常，MCV、MCH正常红细胞内无包涵体出生时脐血HbBart’s可达1-2%，但3个月后消失检测红细胞内/链合成率亦难以将其与正常人区分可通过DNA检测其基因型现在是20页\一共有99页\编辑于星期三轻型α地贫（α地贫1）发病机理2个肽链基因缺失（0地中海贫血杂合子，+地中海贫血纯合子），链合成仍有相当数量。基因型：--/，为东南亚型,以－－SEA表示或α-/α-、ααT/ααT

、α-/ααT临床表现临床无症状或症状轻微，无或仅有轻度贫血和血常规改变，易误诊为低色素性营养性贫血。实验室检查Hb：降低但常在100g/L以上

MCV、MCH：降低红细胞计数：相对增多脐血Bart’s含量（0.034~0.14))，生后6月时完全消失。

HbA2和HbF正常或稍低

现在是21页\一共有99页\编辑于星期三中间型a地贫（HbH病）发病机理3个肽链基因缺失或缺陷，仅有少量链合成。胎儿期少量链与链形成HbF(22)，故能存活至出生。出生后随年龄增长，链合成迅速增加，由于链合成不足，仅有少量的HbA(22),过剩的链聚合成HbH(4).HbH与氧亲和力高，失去运氧功能，导致组织缺氧。HbH结构不稳定，易变性形成包涵体，红细胞变僵硬，变形能力差，不能通过脾窦，致红细胞寿命缩短，发生溶血性贫血。现在是22页\一共有99页\编辑于星期三中间型a地贫：HbH病临床表现出生时一般无明显症状，肝脾不肿大，但红细胞形态异常.多在婴儿期以后出现溶血性贫血，一般为轻~中度贫血，肝、脾肿大，以脾大为主。可出现黄疸，胆结石。继发感染或服用氧化性药物可使溶血性贫血加重。年龄较大患者可以出现类似

-地贫的特殊面容。现在是23页\一共有99页\编辑于星期三中间型a地贫：HbH病实验室检查血象：Hb：低于100g/LMCV、MCH：降低,小细胞低色素贫血，网织红细胞升高骨髓象：增生性贫血骨髓象红细胞渗透脆性降低Heinz小体（变性珠蛋白小体）（+）异丙醇试验（+）。Hb电泳：有HbH区带初生：HbBart’s约25%，HbH很少随年龄增长：HbBart’s，HbH。年长儿：HbBart’s微量，HbH0.024~0.44现在是24页\一共有99页\编辑于星期三重型α地贫（HbBart’s胎儿水肿综合征）发病机理缺失4个肽链基因，链完全不能合成。胎儿期合成的链因缺乏链，不能形成HbF(22)，大量的链聚合成HbBart’s(4)。HbBart’s与氧亲和力高，造成胎儿组织严重缺氧。HbBart’s结构不稳定，以致红细胞寿命缩短，发生溶血性贫血，胎儿发育不良。现在是25页\一共有99页\编辑于星期三重型α地贫临床表现胎儿在宫内死亡或早产后数小时内死亡。严重贫血，胎儿苍白、皮肤剥脱、可有黄疸，肝、脾肿大。心脏扩大，水肿、胸腔、心包、腹腔积液、巨大胎盘。低体重、发育不良。孕妇可有妊娠高血压综合征实验室检查严重贫血，小细胞低色素贫血，有核红细胞和网织红细胞明显升高红细胞渗透脆性明显降低Hb电泳：80%--90%为HbBart’s（γ4），不等量的HbPotland(22)(10-29%)及微量HbH（β4），没有HbA（2β2）、HbA2(22）及HbF（2γ2）现在是26页\一共有99页\编辑于星期三HbBart`s含量HbBart’s检出的百分率与地贫基因型的关系

HbBart’s%基因型

2~3地贫24~20地贫1杂合子或地贫2纯合子20~25HbH病50~90HbBart’s水肿胎现在是27页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险一、夫妇双方是静止型α地贫，每一次怀孕，有25%的机率是正常，50%的机率是无症状基因携带者，25%的机率是α地贫基因携带者现在是28页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险二、夫妇为轻型α地贫，但是基因缺陷在不同染色体上,每一次怀孕，100%机率是α地贫基因携带者现在是29页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险三、夫妇为轻型α地贫，基因缺陷在同一条染色体上,每一次怀孕，有25%的机率是正常，50%的机率是α地贫基因携带者,25%是重型α地贫现在是30页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险四、夫妇一方为轻型α地贫，基因缺陷而且在同一条染色体上，而另一方为静止型地贫,每一次怀孕，有25%的机率是正常，50%的机率是无症状的基因携带者,25%是HbH病,现在是31页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险五、夫妇一方为静止型α地贫，而另一方为HbH病,每一次怀孕，有25%的机率是无症状的基因携带者,25%是HbH患者，50%的机率是基因携带者

现在是32页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险六、夫妇一方为轻型α地贫，但是基因缺陷在同一条染色体上，而另一方是HbH病,每一次怀孕，有25%的机率是无症状的基因携带者,25%的机率是基因携带者，25%的机率是HbH病，25%是重型α地贫现在是33页\一共有99页\编辑于星期三α地贫遗传风险七、夫妇一方为轻型α地贫，基因缺陷在不同的染色体上，而另一方为HbH病，每一次怀孕，有50%的机率是地贫基因携带者,50%的机率是HbH病现在是34页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血

β地贫主要是由于11号染色体上β珠蛋白结构基因突变，导致β珠蛋白链合成障碍。1、主要分两种类型，即β0地贫和β+地贫。

β0地贫—β链完全不能合成，

β+地贫—β链合成量减少所致。2、一些大片断基因缺失致：δβ地贫、遗传性持续性胎儿血红蛋白综合症（HPFH）。现在是35页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血基因型基因的突变已发现有100多种，国内已报道28种，常见有6种：41-42（-TCTT）：占45%，缺失4个硷基，造成框架突变，使终止密码提前出现，几乎无-链合成（0地贫）IVS-II654（CT）：约占24%，内含子II中654位点CT硷基替换，导致潜在拼接位点活化，mRNA加工异常，不能翻译成正常的链（0地贫）。17（AT）：约占14%，导致终止密码TAG形成，链不能合成（0地贫）。现在是36页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血基因型TATA盒-28（AT）：约9%，突变位于起始位点上游的启动子TATA盒，使转录效率降低，mRNA生成量减少（β+地贫）。71-72（+A）：约2%，在71和72位插入1个硷基A，造成阅读框架改变，mRNA不能翻译为正常链（0地贫）。26（GA）：占2%，链26密码子由G变A（HbE），影响了mRNA加工，EmRNA合成减少，链减少（β+地贫）。现在是37页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血基因型基因型基因型描述疾病0/00地贫纯合子重型地贫0/+0地贫和+地贫双重杂合子重型地贫+/++地贫纯合子中间型地贫0/0地贫杂合子轻型地贫+/+地贫杂合子轻型地贫/正常正常人现在是38页\一共有99页\编辑于星期三地贫发病机理珠蛋白基因缺陷，链合成减少或不能合成，、链合成代偿性增加，HbF(22)、HbA2（22)升高。过剩的链在红细胞内沉淀形成包涵体，使幼红细胞膜受损而在骨髓内破坏，产生无效红细胞生成（原位溶血）。含有包涵体的红细胞进入血液循环，在脾脏破坏,产生溶血性贫血。溶血和贫血引起骨髓造血和髓外造血亢进，骨骼改变和肝、脾肿大。溶血和反复输血导致含铁血黄素沉着症。现在是39页\一共有99页\编辑于星期三

-地贫病理生理

-珠蛋白基因缺陷珠蛋白肽链合成减少或缺如HbF比例显著增高,HbA2增高珠蛋白肽链合成间的平衡异常正常HbA生物合成降低溶血(原位、外周）多余的链形成包涵体沉积于RBC缺氧骨髓造血和髓外造血代偿性增强--骨骼病变、肝脾肿大

贫血肠道铁吸收增加，反复输血--继发性铁负荷增多症现在是40页\一共有99页\编辑于星期三轻型β-地中海贫血（

thalassemiaminor）0地贫杂合子（0/）、+地贫杂合子（+/）临床表现无症状或仅有轻度贫血，可有轻度脾大。多在家系调查时发现。实验室检查红细胞形态正常或轻度改变，Hb：降低，但在100g/L以上，MCV、MCH：降低红细胞计数：相对增多，红细胞脆性正常或降低HbA2升高（0.04~0.09)，HbF（0.01~0.05）。预后寿命与正常人相似。现在是41页\一共有99页\编辑于星期三

中间型地中海贫血（Thalassemiaintermedia)

+地贫纯合子临床表现介于轻型和重型之间，中度贫血，肝、脾轻~中度肿大，可有黄疸，骨骼改变轻。实验室检查血象：小细胞低色素贫血。Hb：降低，在60-100g/L之间。MCV，MCH：降低骨髓象：增生性贫血骨髓象红细胞脆性降低

HbF升高（0.4~0.8)，HbA2正常或升高预后可能需要输血，病人可活至成年甚至老年。现在是42页\一共有99页\编辑于星期三重型地中海贫血（

Thalassemiamajor)β0纯合子或β0β+双重杂合子。临床表现：出生时正常，半岁左右（3~12月）发病慢性进行性贫血：苍白、轻度黄染、生长发育迟缓。肝脾进行性肿大。特殊外貌：1岁后颅骨改变明显，表示为头颅变大，额部隆起，颧高、鼻梁塌陷，两眼距增宽，形成地中海贫血特殊面容。现在是43页\一共有99页\编辑于星期三重型地中海贫血（

Thalassemiamajor)实验室检查血象：Hb<60g/L，MCV，MCH：降低，小细胞低色素贫血，易见靶形红细胞骨髓象：增生性贫血骨髓象红细胞脆性降低HbF升高（0.8~1），如是β地贫复合血红蛋白E则HbA2增多预后需要终生输血，如不治疗，多于5岁前死亡。现在是44页\一共有99页\编辑于星期三β地贫遗传风险一、夫妇一方是轻型β地贫，一方正常，50%生出轻型β地贫的孩子，50%是正常。现在是45页\一共有99页\编辑于星期三β地贫遗传风险二、夫妇双方都是轻型β地贫，25%机率生出正常的孩子，50%生出轻型β地贫的孩子，25%生出重型β地贫孩子。现在是46页\一共有99页\编辑于星期三β地贫遗传风险三、夫妇一方是HbE另一方是轻型，25%机率生出正常的孩子，25%生出轻型β地贫的孩子，25%是HbE，25%生出同时有β地贫和HbE孩子。

现在是47页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血的治疗一般性治疗轻型者一般不需治疗可适当补充叶酸，VitC等忌用铁剂（常误诊为缺铁性贫血）避免用氧化性药物现在是48页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血的治疗常规治疗输血除铁现在是49页\一共有99页\编辑于星期三其他的治疗方法－脾切除和脾栓塞消除和减少脾组织，减少红细胞的髓外破坏，达到缓解症状的目的适用于血红蛋白H病，重型地中海贫血合并脾脏功能亢进现在是50页\一共有99页\编辑于星期三预防措施加大宣传力度，让准父母们意识到地贫的危害性。全民教育，有效筛查策略，严格产前检查要更多的人参与进行宣传教育做好产前检查如果父母双方均患小细胞低色素性贫血，立即做地贫基因检查。如果父母双方被证实为地贫同种基因携带者，应及早进行产前诊断，如果查出为地贫纯合子，立即中止妊娠。任重而道远！现在是51页\一共有99页\编辑于星期三地中海贫血的筛查地中海贫血和异常血红蛋白症很难治愈长期、昂贵的治疗家庭沉重的精神负担预防是最好的措施筛查地贫携带者成为关键现在是52页\一共有99页\编辑于星期三按国家分类：I类：地中海国家很早就建立了完善的预防体系80-100%得到有效的预防提供高质量的治疗现在是53页\一共有99页\编辑于星期三成功的例子:塞浦路斯1974年:每年出生重型B-地贫患儿大约53个1981年:当年出生重型B-地贫患儿10个(当年出生婴儿10780个)从1986~现在每年平均只有1个重型B-地贫患儿出生Lancet1990,336:1119-1120现在是54页\一共有99页\编辑于星期三按国家分类：II类：发达的工业化国家(欧洲,美国，澳大利亚)人口迁移使地贫发病率上升能提供有效的控制手段由于不同的文化背景，部分移民很难接受地贫筛查现在是55页\一共有99页\编辑于星期三按国家分类：III类：亚洲国家发病率高不能提供有效的控制手段困境：经济困难,优先解决的医疗问题(降低新生儿死亡率,控制传染性疾病),宗教/文化的束缚。现在是56页\一共有99页\编辑于星期三中国的现状：世界上地贫人口最多的国家参加地贫筛查的人数很少

婚育男女对筛查没有正确的认识公众的教育/意识独生子女政策使优生更显重要现在是57页\一共有99页\编辑于星期三地贫筛查目的查出重型、中间型、轻型β地贫和静止型β地贫基因携带者查出部分标准型和静止型α地贫，中间型α地贫（血红蛋白H病）查出其它异常血红蛋白现在是58页\一共有99页\编辑于星期三现在是59页\一共有99页\编辑于星期三常见的筛查方法：低

高电泳(ELP)Bio-RadHPLC红细胞脆性实验血常规分析现在是60页\一共有99页\编辑于星期三血常规指标：地中海贫血的重要特征之一是小细胞低色素性贫血，如MCV<80fl，MCH<27Pg，则可疑为地中海贫血患者或基因携带者。国际地贫协会认为最广泛使用的地贫判断值：MCV<80fl，MCH<27pg即MCV<80fL、MCH<27pg为地贫表型阳性（广西标准为MCV<82fL）β地贫、中间型α地贫(血红蛋白H病)、轻型α地贫基因携带者均为地贫表型阳性现在是61页\一共有99页\编辑于星期三MCV筛查地贫准确吗？静止型α地贫基因携带者（α地贫2），MCV，MCH为正常表型。缺铁性贫血也会出现MCV偏低情况，所以MCV偏低只能表示患者存在小细胞低色素，须同时测定血清铁和铁蛋白，以排除缺铁性贫血。

所以MCV不是一个明确的标准，只能是初步筛选现在是62页\一共有99页\编辑于星期三红细胞脆性试验原理：其原理是地中海贫血红细胞膜表面粗糙、凹陷、折叠和浆膜扩展，膜与内容物之比增大，对渗透溶解的抗性增加，在0．32％(或0．36％)NaC1中溶解度降低(脆性降低)。而正常RBC的抗性小，溶解度大（脆性增高）正常范围：红色澄清临床意义：地贫患者为混浊阳性结果局限：缺铁性贫血也呈阳性；HbE和HbS呈弱阳性红细胞脆性试验在基层单位可用，但在有血细胞分析仪的单位就不应该单用于地贫筛查，此项检测误漏诊率高，且英美地贫筛查指南中均没有此项目。现在是63页\一共有99页\编辑于星期三电泳法：原理:根据不同Hb自带电荷的不同、分子量大小的不同、结构和等电点的不同,在一定pH值的缓冲液中朝特定方向泳动，在一定的电压下经一定时间，因迁移速率不同可分离出各自的区带。主要类别:醋酸纤维素膜电泳法琼脂凝胶电泳法HbA2含量测定:洗脱法扫描法现在是64页\一共有99页\编辑于星期三全自动Hb电泳仪目前国内使用的主要有美国的Helena电泳仪、扫描仪和分析系统（也有毛细管电泳）。法国的Sebia电泳仪、扫描仪和分析系统。（也有毛细管电泳）国产的金桑特电泳仪、扫描仪和分析系统。1.通过扫描定量给出HbA、HbA2和HbF值。2.异常区带通过查表确定。现在是65页\一共有99页\编辑于星期三电泳用于筛查的不足之处：

主观血红蛋白条带的错判样品处理依赖于检验人员的经验：人工洗涤红细胞、溶血、抽提、离心，工作量大自动化程度低耗费人力/时间很难做质量控制，不能保证系统稳定性进样方式：手工加样，通常要成批做电泳，不能使用原始管重复性差，精确性差醋纤膜血红蛋白电泳（20%假阳性）微柱法（20%假阳性）涉及到安全因素:有害物质的处理通风设备RoyalCollegeofPathologistsofAustralasia,1997InformationprovidedbyProf.Elizabeth

George现在是66页\一共有99页\编辑于星期三CAP的立场：从2004年起，碱性电泳和等电聚焦电泳均不能用于HbA2的定量测定。精确度差：CV>35%变异系数CV比别的方法高2到6倍。筛查B—地贫需要一个准确和精确的方法测定HbA2,基于这个目的，HPLC是可信赖的方法。CAPSurveys2003,HG-CHemoglobinopathy,p.11现在是67页\一共有99页\编辑于星期三离子交换HPLC法原理原理：是利用能交换离子的材料为固定相来分离离子型化合物的方法。基于不同种类血红蛋白理化性质的差异所导致不同血红蛋白在相应色谱柱中保留时间不同，使各组分按顺序被洗脱出来，根据冼脱时间进行血红蛋白种类定性，以及特定组洗脱峰面积进行定量。现在是68页\一共有99页\编辑于星期三高效液相色谱法血红蛋白分析操作静脉血2ml，EDTA-K2抗凝经定标、质控，标本直接上机，通过电脑操作，便能实现红细胞内Hb溶解释放、梯度洗脱、定性、定量的全过程。现在是69页\一共有99页\编辑于星期三HPLC优点快速高效：6min样品处理：自动化程度高，原始采血管直接上机，无需前处理，无需开盖，无污染进样方式：连续自动进样，带条码阅读器。单个样本检测检测波长双波长：415nm690nm，减少背景干扰分析检测管路：1根分析柱，无系统误差，重复性好仪器校正：每套试剂盒标配校正液，保证结果的准确性和重复性。每次只需做一个校正分离效果：自动准确定量A2、F及异常Hb质控：每批次做一次质控,保证仪器系统状态稳定结果判读：软件自动判读，客观的结果，不需人工编辑图谱方法权威性：世界地贫协会推荐，A2定量金标准HPLC特异性99%,灵敏度99.9%现在是70页\一共有99页\编辑于星期三结果可报告准则可报告范围:HbA2:1–13%；HbF:1–40%HbA2

和HbF峰均出现如果HbA2

和HbF值小于可报告范围:可报告为<1.0%校准应该通过：HbA2或HbF的反应因子需在0.7—1.3之间的范围内。校准品HbA2的最佳保留时间是3.65±0.05

如变化幅度超过0.05分钟，建议进行温度调节。

若滞留时间变化幅度超过0.20分钟，注意泵的流率和压力指数。并向技术中心寻求支持可接受TotalArea总面积:100万to300万如果低于100万，10ul样本+1ml稀释液如果高于300万，5ul样本+2ml稀释液现在是71页\一共有99页\编辑于星期三结果判读正常人范围:说明书：HbA2:1.75–3.25%；HbF:<1%中国VariantII客户：A2（2.5%~3.5%）;F（0~2.6%）ß-Thal:HbA2:4.0–9.0%(杂合子)HbA2>10%则可能为HbEHbF:1–5%(杂合子)HbF:80–100%(纯合子)血红蛋白D和E也可与HbA2一同被洗脱。样本中HbA2大于10%时应检测是否有其它类型血红蛋白干扰的可能。现在是72页\一共有99页\编辑于星期三各种Hb出峰时间、峰宽、范围现在是73页\一共有99页\编辑于星期三总面积校准因子HbFHbA2校准报告图现在是74页\一共有99页\编辑于星期三正常成人样本现在是75页\一共有99页\编辑于星期三

ß-地中海贫血（轻型）

现在是76页\一共有99页\编辑于星期三轻型-地贫(/,0/N)

HematologicalDataHb(g/dl)12.5MCV(fl)62.7MCH(pg)20.2MCHC(g/dl)32.3RDW(%)15.6HemoglobinTypingHbtypeA2AHbA2(E)5.4%HbF1.0%HbA82.3%现在是77页\一共有99页\编辑于星期三重型-地贫(/,0/0)HematologicalDataHb(g/dl)4.9MCV(fl)65.5MCH(pg)24.2MCHC(g/dl)26.3RDW(%)31.3HemoglobinTypingHbtypeA2FHbA2(E)4.5%HbF95.4%HbA0.2%现在是78页\一共有99页\编辑于星期三中间型-地贫(/,0/+)HbF55.4%HbA28.0%现在是79页\一共有99页\编辑于星期三静止型-地贫

(-/,N/N)HematologicalDataHb(g/dl)11.8MCV(fl)77.3MCH(pg)27.3MCHC(g/dl)34.4RDW(%)12.6HemoglobinTypingHbtypeA2AHbA2(E)3.4%HbF0.7%HbA86.5%Normalhemoglobintype;Not-ruleout-Thalassemia2trait现在是80页\一共有99页\编辑于星期三HemoglobinTypingHbtypeA2AHbA22.6%HbF0.2%HbA87.9%HematologicalDataHb(g/dl)12.1MCV(fl)68.9MCH(pg)21.4MCHC(g/dl)31.1RDW(%)14.9标准型-地贫

(--/,N/N)Not-ruleout-Thalassemia1trait现在是81页\一共有99页\编辑于星期三

缺失型HbH病(HbH出峰时间0.47分钟，峰值13.5%。HbF出峰时间1.08分钟，峰值0.3%。HbA出峰时间2.54分钟，峰值81.9%。HbA2出峰时间3.60分钟，峰值1.8%。)现在是82页\一共有99页\编辑于星期三HbH病(--/-,N/N)HemoglobinTypingHbtypeA2ABart’sHHbA21.6%HbF0.5%HbA91.8%HematologicalDataHb(g/dl)7.7MCV(fl)72.9MCH(pg)18.2MCHC(g/dl)25.0RDW(%)24.2Bart’sH现在是83页\一共有99页\编辑于星期三HemoglobinTypingHbtypeHbBart’sHbA2(E)-HbF-HbA-HbBart’s100HematologicalDataHb(g/dl)7.6MCV(fl)107.4MCH(pg)26.3MCHC(g/dl)24.5RDW(%)22.2HbBart’s胎儿水肿综合征

(--/--,N/N)HbBart’s现在是84页\一共有99页\编辑于星期三HbCS杂合子

(CS/,N/N)HemoglobinTypingHbtypeA2AHbA22.6%HbF1.9%HbA85.9%HematologicalDataHb(g/dl)11.5MCV(fl)76.6MCH(pg)24.3MCHC(g/dl)31.7RDW(%)13.6Normalhemoglobintype;Not-ruleout-Thalassemia2trait现在是85页\一共有99页\编辑于星期三HbCS纯合子

(CS/CS,N/N)HemoglobinTypingHbtypeCSA2AHbCS1.9%HbA20.7%HbF0.9%HbA88.7%HematologicalDataHb(g/dl)8.1MCV(fl)90.4MCH(pg)26.1MCHC(g/dl)28.8RDW(%)18.5Notrule-outHbCShomozygoteGenotyping现在是86页\一共有99页\编辑于星期三

HbCS复合HbH病

(HbH出峰时间0.47分钟，峰值13.5%。HbF出峰时间1.12分钟，峰值1.4%。HbA出峰时间2.48分钟，峰值82.1%.HbA2出峰时间3.61分钟，峰值0.9%。HbCS出峰时间5.03分钟，峰值0.9%。)

现在是87页\一共有99页\编辑于星期三HbH-CS病

(--/CS,N/N)HemoglobinTypingHbtypeCSA2ABart’sHHbCS0.9%HbA20.9%HbF0.3%HbA90.3%HematologicalDataHb(g/dl)8.1MCV(fl)81.5MCH(pg)20.8MCHC(g/dl)25.6RDW(%)21.2现在是88页\一共有99页\编辑于星期三HbE杂合子

(/,E/N)HematologicalDataHb(g/dl)13.0MCV(fl)89.9MCH(pg)29.3MCHC(g/dl)32.6RDW(%)13.0HemoglobinTypingHbtypeEAHbA2(E)27.9