基因工程知识点超全

基因工程知识点超全基因工程概念术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产的别名剪切→拼接→导入→表达实质(原理)克服远缘杂交不亲和的障碍，定向改造生物的遗传特性基本工具---“分子手术刀”3、基因进入受体细胞的载体-----“分子运输车”1．“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)存在：主要存在于原核生物中。 (2)特性：特异性，一种限制酶只能 特定的切点上切割(3)切割部位：DNA分子。磷酸二酯键(4)作用：能够识别双链DNA分子的中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(5)识别序列的特点：(6)切割后末端的种类：DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——在它识别序列的黏性末端和平末端。当限制酶中轴线两侧将DNA的两当限制酶在它识别序列的中轴线处切开：将限制酶切割下来的DNA片段拼接成DNA分子。 (2)类型TDNA连接酶种类E·coliTDNA连接酶T噬菌体来T噬菌体4缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低只能将双链4缝合两种末端，但连接平末端之间的效率较低的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来相同相同点：都连接磷酸二酯键构简单的、独立于细菌拟核之外，并。【解题技巧】，高温、强酸或强碱点，质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是()AA但基因与载体也可以连接起来。(2)为了防止载体或目的基因的黏性末端自己连接，可用不同的限制酶分别处理目体，使目的基因两侧及载体上具有两个不同的黏性末端端单链对间的氢键基因工程的操作步骤(1)直接分离法文库中获取目的基因(2)人工合成法不需要模板。(4)利用PCR技术扩增目的基因DNA聚合酶。知目的基因的脱氧核苷酸序列，以便合成引物。2．基因表达载体的构建——基因工程的核心胞。转P5物种类植物细胞动物细胞微生物细胞用方法农杆菌转化法显微注射技术感受态细胞法体细胞体细胞卵原核细胞过植物细胞→整合到受体细胞(1)标记基因的作用——筛选、检测目的基因是否导入受体细胞，常见的有抗生素抗(2)受体细胞常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物(大肠杆菌、酵母菌)等。要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必须用真核生物酵母菌(需内质网、高尔基体的加工、分泌)；一般不用支原体，原因是它营寄生生活；一定不能用哺乳动物成熟的红细胞，原因是它无细胞核，不能合成蛋白RNA最核心、最关键的一步，在体外进行。A．用同种限制酶切割载体与目的基因可获得相同的黏性末端B．以蛋白质的氨基酸序列为依据合成的目的基因与原基因的碱基序列相同C．检测到受体细胞含有目的基因就标志着基因工程操作的成功D．用含抗生素抗性基因的质粒作为载体是因为其抗性基因便于与外源基因连接药物的比较②工程菌是指用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类细胞株系。比较项目乳腺生物反应器工程菌基因的结构基本相同与人类基因的结构有较大差异药物蛋白与天然细菌细胞内没有内质网、高尔基体等细胞器，产生的药物蛋白可受体细胞动物的受精卵受体细胞导入目的基显微注射法不需严格灭菌，温生产条件度等外界条件对其生产条件影响不大(金榜P189)(金榜P189)微生物细胞感受态细胞法需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度等外界条件从微生物细胞中提取蛋白质工程蛋白质工程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列基因工程获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受检测与鉴定系程定向改造或生产人类所需的蛋白质可生产自然界没有的①蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来程定向改造生物的遗传特生物类型或生物产品只能生产自然界已有的②基因工程中所利用的蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生(1)概念：指利用正常基因置换或弥补缺陷基因的治疗方法。(2)方法：基因置换、基因修复、基因增补、基因失活等。如：腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症的基因治疗。(3)基因治疗的途径再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。如腺苷酸脱氨酶基因的转接向人体组织细胞中转移基因的治病方法。(1)概念：又称DNA诊断，是采用基因检测的方法来判断患者是否出现了基因异常行。当用一段已知基因的单链作探针(常用同位素、荧光分子等进行标记)，与变性(1)基因治疗后，缺陷基因没有改变。基因治疗是把正常基因导入受体细胞中，以表的基因没有清除或改变。(2)对蛋白质分子进行改造，其本质是改变其基因组成。如果对蛋白质直接改造，即A．基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋