60Co诱变晋大78后代贮藏蛋白亚基相对含量的策略分析

60Co诱变晋大78后代贮藏蛋白亚基相对含量的策略分析目前，世界上人类所得到的蛋白质80％来源于植物蛋白，其中16％来源于大豆［1。］大豆是蛋白质含量最高的作物之一，栽培大豆蛋白质含量一般为40％左右，野生大豆中有的材料蛋白质含量高达55％［2］。大豆种子中的蛋白绝大部分为贮藏蛋白，主要是11和球蛋白。因此，研究11和球蛋白就成为大豆蛋白质研究的主要内容。im等r和 i等4对11和 组分的亚基进行遗传学研究，发现部分亚基是由显性基因控制的。研究表明，增加11球蛋白的含量，降低球蛋白的含量，可以提高大豆蛋白的营养品质，调节11和 球蛋白的比例可以提高大豆的加工品质［5。］本研究以诱变后代为材料，对其大豆蛋白亚基相对含量进行检测分析，探讨诱变后代大豆品系的蛋白遗传特性和变异规律，为通过诱变育种筛选大豆优质品种提供理论基础和实践依据。1材料和方法材料本试验所用的材料是山西农业大学选育的农艺性状好、品质优良的诱变亲本——晋大及其诱变后代： 代。200年利用00剂量率为100R・min）对晋大号的风干种子进行辐照处理，得到1代共份材料；2010年收获2弋后，2011年4月0日种植2弋与亲本晋大，行长m行距0.5m，株距0.2m，二行区，重复3次。在生长期间按照当地水平进行管理，及时中耕锄草，收获后统一进行大豆贮藏蛋白的电泳分析。代写论文方法贮藏蛋白的提取及电泳脱脂豆粉的制备：选取籽粒饱满的大豆种子去皮，置于无菌的三层滤纸间用小铁锤砸碎后放入研钵中研磨至粉末，分两份分别放入1.5mL的离心管中，每管中加入1mL乙醚脱脂过夜。脱脂结束后倒去上清液，风干后-20℃保存备用。贮藏蛋白的提取：1.0脱脂豆粉加20mL50mmo1-L1的ri（值 ，0含0.01mo1・L|B巯基乙醇）提取液，室温下提取1,离心（10000r-min，20min，4℃），取上清，用1mo1・L1调 值至4.5，离心（10000r・min，15min，4℃），弃掉上清，得到沉淀，经低温干燥后得到大豆贮藏蛋白。电泳：采用不连续垂直板状凝胶电泳，凝胶厚度1,浓缩胶浓度为,电流1 ,分离胶浓度为1，电流3,用考马斯亮蓝 染色，用蒸馏水漂洗〜3次，再用甲醇、冰醋酸溶液(甲醇：冰醋酸：水=1：6：3)在脱色摇床上脱色，直至各亚基条带清晰，最后冰醋酸固定。电泳完成后用 型凝胶成像分析系统拍照。1 数据分析蛋白谱带用 型凝胶成像分析系统拍照，并用其自带的软件进行分析，各试验数据采用 及 3软件进行分析。□毕业论文□2结果与分析晋大及其诱变后代贮藏蛋白 谱带划分口部分诱变后代的大豆贮藏蛋白质 图谱见图1、图，由此可以看出，大豆储藏蛋白质都是由一系列亚基组成，其中包括含量较高的a,,a,p, 3和几条未命名的谱带，各条带在凝胶上可以清晰分辨，含量差异较大。□这与国外的两个 图谱中 球蛋白的a,、a、p和11球蛋白的酸性亚基及碱性亚基的带型位置完全吻合，进一步说明本试验的 图谱划分是正确的。，.晋，大78及其诱变后代大豆球蛋白各亚基相对含量统计分析由表1可知，人工诱变晋大后代贮藏蛋白不同亚基含量变异较大，大豆球蛋白中的a,,a,p,y和球蛋白总量平均数分别为 ，11 31 6,6, ；1大豆11球蛋白中的3亚基、 亚基含量、 亚基和11组分平均含量分别为7.5,61冰7.6,0，冰5.9,53冰.3，。由冰各亚基平均含量分析可知，11球蛋白含量高于球蛋白含量；11组分中各亚基含量 亚基〉亚基〉3亚基；组分中各亚基含量p亚基〉a亚基〉a/亚基〉y亚基。□代写论文□同时，表1中各个亚基的变异系数为a'( 3,a( 3、p( )3Y( 7、总球蛋白(323()、亚基()3亚基（）、总球蛋白（）和（3。其中变异系数最大的为Y亚基，达到，变异系数最小的是亚基，为，而且各亚基变异系数都大于20，%进一步说明了诱变后代的不稳定性和大豆贮藏蛋白的各个亚基在不同大豆品系间含量变异也很大。晋大及其诱变后代 和组分亚基含量的相关性分析口对诱变后代 和组分亚基含量的相关性分析（表2可知，球蛋白与总球蛋白在 水平上呈显著负相关，相关系数为 ，说明和球蛋白之间彼此制约，此消彼长。总球蛋白与a亚基、Y亚基在水平上达极显著正相关，相关系数分别为 和，与a,亚基在水平上达显著正相关，相关系数为 ；球蛋白与亚基和亚基在水平上达到极显著正相关，相关系数分别为 和，但是球蛋白与a亚基、Y亚基在0.0水，平上达到极显著负相关，相关系数分别为和；与a亚基、a,亚基、 球蛋白在 水平上达到极显著负相关，相关系数分别为 ， ， ，与亚基、亚基和总在水平上达到极显著正相关，相关系数分别为， ， 。由此可知，大豆球蛋白各组分之间相互影响，改变其中任一组分的含量都会直接和间接的影响其它组分。作文/zuowen/□大豆球蛋白 比值分布口从表中可以看出，大豆球蛋白 比值最大值为 ，最小值为，平均值为。然而从图诱变后代球蛋白 比值分布图来看， 比值主要分布于 〜之间，为对照， 比值为 ，最高值达到 ，是人工诱变后代，2号材料，该材料较晚熟，株高适中，有效分枝较多，株型较好，产量也较高，是一个综合性状比较好的材料。 比值最低的品种是、、号诱变后代，其单株产量较低，而且 的比值也低，所以其蛋白的营养□开题报告/html/lunwenzhidao/kaitibaogao/□：品质不是很好，进而说明人工诱变后代大豆品种间 差异较大。□根据表中 比值的百分比分布可以将诱变后代分为个类群，其中有材料的 比值分布在 〜之间，其中包括的 比值4材料的比值在〜之间，还有 材料的 比值小于，以及个蛋白品质比要好， 比值大于的材料。这为选育球蛋白含量高或 高的大豆品种提供了一定的依据。□诱变后代大豆贮藏蛋白 1 组分与其种子总储藏蛋白和脂肪含量的相关性口表所示为诱变后代个品系的总蛋白质和脂肪含量结果， 组分与组分及比值与种子总蛋白和脂肪含量的相关性见表料结果表明： 与组分及 比值与诱变后代大豆种子的总蛋白和脂肪含没有显著相关性。□3讨论3，大1豆贮藏蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳方法的探讨大豆种子富含脂类物质，达20左的右。因此，脱脂的好坏直接影响电泳结果，脱脂越彻底，电泳图谱也越清晰、稳定。本试验采用乙醚脱脂过夜，基本上消除了脂肪对电泳结果的影响，效果比较理想。由于在分离胶浓度较低（〜）时，组分亚基分辨效果较好；在分离胶浓度较高（3时， 组分蛋白亚基分辨效果较好；在既要考虑分辨率又要考虑 和组分亚基分离综合效果时，大豆贮藏蛋白亚基电泳分离胶浓度以12为的佳。因此，本试验采取的分离胶浓度以12最的佳。简历大全/html/jianli/□3，关2于亚基含量计算本试验采用亚基百分含量作为分析数据。由于影响 凝胶的因素较多，扫描相同大豆品种两次 凝胶得到的亚基含量数据可能差异很大。大豆贮藏蛋白亚基占大豆贮藏蛋白质百分比是大豆品种的遗传特性，不易受其它因素的影响，即使在两次电泳时相同亚基占总蛋白含量也是不变的。因此，采用亚基百分含量作为分析数据能够取得比直接采用扫描亚基含量峰面积更可信、更准确的试验结果。诱变后代蛋白质 组分与组分亚基变异的分析口诱变育种与常规育种方法相比，具有方法简便、育种周期短、效果好等特点，变异谱也有很大的差异，不仅扩大了选择范围，而且提高了选择效果。由于突变育种所观察到的性状通常是单个或少数基因的性状，因此，在其保持原有亲本特征、改良单一性状上尤为优越材本研究结果表明， 诱变大豆亲本与后代贮藏蛋白亚基组成基本相同，但是各亚基在两种球蛋白中所占百分量在不同品系间差异较大，变异系数最大的为Y亚基，达到 ，变异系数最小的是亚基，为，而且各亚基变异系数都大于 0说明 对晋大进行诱变，效果非常明显，诱变后后代具有明显的遗传多样性，变异幅度较大。另外，通过、以及的比值与大豆总蛋白和脂肪含量的相关性分析表明，它们之间没有显著的相关性，说明通过降低，、组分的含量或者提高，，组、分的含量对大豆的总蛋白和脂肪含量没有影响，由此说明可以从诱变后代中选育，，、/比，值、高的品种。作文/zuowen/□如果良好的变异能够在后代中稳定遗传，其在选育出良好营养价值和加工品质的大豆新品种具有重大的意义。所以由于本研究是在代的基础上研究的，到底这些贮藏蛋白的变异能不能够稳定遗传，还要进行进一步研究。参考文献：[，杨]春燕，姚利波，刘兵强，等．国内外大豆品质育种研究方法与最新进展[J．]华北农学报，20