牙周病微生物学

牙周病微生物学第1页，共35页，2023年，2月20日，星期日掌握：牙周炎致病机制；牙菌斑生物膜的新概念、形成和结构；龈上菌斑和龈下（附着性和非附着性龈下菌斑）的分布、主要特性。熟悉：牙周生态系的概念及其意义；菌斑致病的三个学说；各型牙周病相关的可疑致病菌（着重证据充分的致病菌）。了解：牙周病病因研究观点的变迁；牙菌斑的生态学；菌斑微生物作为牙周病始动因子的证据；牙周细菌的致病机制（细菌侵袭、体内繁殖、抑止或躲避宿主的防御功能、损害宿主的牙周组织）。第2页，共35页，2023年，2月20日，星期日5-1概述菌斑的细菌及其产物是引发牙周炎必不可少的始动因子直接和间接的参与牙周病的全过程第3页，共35页，2023年，2月20日，星期日口腔固有菌群Indigenousflora或口腔正常菌群Normalflora口腔菌群错综复杂的共栖关系（commensalism)，菌群间的相对平衡，保持着菌群与宿主之间的动态平衡第4页，共35页，2023年，2月20日，星期日口腔固有菌群与宿主动态平衡的重要性作为生物屏障，抑制外源性微生物维持口腔或全身微生物的生态平衡刺激宿主免疫系统营养功能第5页，共35页，2023年，2月20日，星期日相互有利的共生（Symbiosis)负性关系竞争(Competition)拮抗作用(Antagonism)口腔微生物主要的三种相互关系第6页，共35页，2023年，2月20日，星期日牙周生态系

PeriodontalEcosystem牙周菌群之间以及它们与宿主牙之间的相互作用称为牙周生态系第7页，共35页，2023年，2月20日，星期日釉质区暴露的病变牙骨质区上皮附着区结缔组织附着区骨缺损区

牙龈结缔组织区

牙龈上皮区

牙周生态区的划分根据临床和组织学特点,将牙周袋病损分为：意义用于分析牙周袋的生态系。不同部位其菌群组成和修复潜能不同。研究牙周菌群时必须在同一层次上方有意义第8页，共35页，2023年，2月20日，星期日

牙周生态系影响因素

InflunceFactorsofPeriodontalEcosystem牙周组织的解剖结构与理化性质宿主的健康状况牙周环境的特性营养源氧化还原电势pH，温度湿度，渗透压，等温度唾液及龈沟液的作用微生物的相互作用第9页，共35页，2023年，2月20日，星期日第10页，共35页，2023年，2月20日，星期日5-2牙周病的始动因子牙菌斑生物膜InitialFactorofPeriodontalDiseases-DentalPlaqueBiofilm第11页，共35页，2023年，2月20日，星期日生物膜海洋、湖泊、土壤、船底、和沉积物口腔肠道膀胱皮肤自然界广泛存在，一般在膜表面或界面发生较多第12页，共35页，2023年，2月20日，星期日

牙菌斑生物膜的新概念：NewConcept

是口腔中不能被水冲去或漱掉的细菌性斑块，是由基质包裹的相互粘附、或粘附于牙面、牙间或修复体表面的软而未矿化的细菌性群体，它们构成较多相互有序生长的建筑式样生态群体，是口腔细菌生存、代谢和致病的基础。该概念强调：微生物生态群体形成及适应过程对外界的防御作用第13页，共35页，2023年，2月20日，星期日AcquiredpellicleAdhesionandcoaggregationPlaquematuration菌斑成熟12h可染色9h复杂生态群体10-30d成熟高峰获得性薄膜1-2h,1-20UM细菌粘附和共聚细菌与宿主的高度选择性

牙菌斑生物膜的形成FormationofDentalPlaqueBiofilm第14页，共35页，2023年，2月20日，星期日牙菌斑生物膜结构示意图基质细菌群体水性通道获得性膜牙面第15页，共35页，2023年，2月20日，星期日牙菌斑微生物作为牙周病始动动因子的证据

1,实验性龈炎:停止口腔卫生,菌斑聚集2,流行病学调查:菌斑与牙周病的关系3,机械去除菌斑或抗菌治疗效果4,动物实验研究:无菌动物5,宿主免役反应:特异性抗体增高第16页，共35页，2023年，2月20日，星期日菌斑生物膜分类接触组织优势菌致病性龈上菌斑生物膜釉质或龈缘处G+需氧菌和兼性菌龋病、牙龈病、龈上牙石附着性龈下菌斑生物膜保留在牙周袋内的根面牙骨质G+兼性菌和厌氧菌根面龋、根吸收、牙周炎、龈下牙石非附着性龈下菌斑生物膜龈沟上皮、结合上皮、袋内上皮G-厌氧菌和能动菌牙周炎、牙槽骨快速破坏牙菌斑生物膜的分类及主要特性第17页，共35页，2023年，2月20日，星期日龈上菌斑生物膜A.牙面球菌占优势的龈上菌斑（SEM×7500）B.龈缘处“玉米棒”状或“谷穗”状龈上菌斑（SEM×7500）AB第18页，共35页，2023年，2月20日，星期日白垢或称软垢微生物，脱落上皮，白细胞，涎蛋白，脂类，食物残渣等常在菌斑上沉积易去除第19页，共35页，2023年，2月20日，星期日A.附着性龈下菌斑（SEM×5000）

B.试管刷样附着性龈下菌斑（SEM×5000）AB第20页，共35页，2023年，2月20日，星期日A.非附着性龈下菌斑（SEM×7000）B.袋壁溃烂处可见较多入侵细菌（TSM×6000）AB第21页，共35页，2023年，2月20日，星期日

非特异和特异性菌斑学说

Non-specificandspecificPlaqueHypothesis(一)

非特异学说：细菌的量是原因，流调显示：菌斑牙石多的，牙周病重。但临床常见结石多不得牙周病的。(二)特异性学说MicrobialSpecificityofPeriodontalDiseases(见下面图表)：口腔菌群中存在特异性致病菌。不同的牙周病致病菌不同，图表。如局限性青少年牙周炎---拌放线放线杆菌；但仍无明确证据：健康部位可检出致病菌，没有单纯去除致病菌治愈牙周炎的证据等。(三)菌群失调学说：某些是由特异性菌引起，有些是正常菌的菌群失调引起。现代牙周病学家：不满足单纯的细菌学说，而强调微生态规律的研究，即细菌与宿主之间的动态关系，任重道远。第22页，共35页，2023年，2月20日，星期日5-3牙周微生物的致病机制第23页，共35页，2023年，2月20日，星期日细菌在牙周定植、存活-生长繁殖牙周微生物在牙周病发病中的直接作用入侵宿主组织抑制或逃避宿主防御功能损坏牙周组织牙菌斑矿化为牙石第24页，共35页，2023年，2月20日，星期日细菌及产物对宿主的破坏

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菌体表面物质毒素细菌酶类代谢产物脂磷壁酸膜泡外膜蛋白蛋白酶纤毛蛋白内毒素胶原酶透明质酸酶蛋白酶白细胞毒素（Aa的外毒素）神经氨酯酶硫酸软骨素酶

各种有机酸类抗中性白细胞因子各种有机酸类各种有机酸类微生物直接损害宿主牙周组织的四大类物质第25页，共35页，2023年，2月20日，星期日

引发宿主免疫反应在牙周病发病中的作用白细胞补体抗体细胞因子第26页，共35页，2023年，2月20日，星期日

牙周致病菌的概念

ConceptofPreiodontalPathogen

口腔及牙菌斑中多为口腔正常菌群,仅少数细菌(目前发现30种左右)与牙周病有关。在各型牙周病损种区，常可分离出一或几种优势菌，它们具有显著的毒力或致病性，能通过多种机制干扰宿主防御能力，具有引发牙周破坏的潜能，称之为牙周致病菌。第27页，共35页，2023年，2月20日，星期日

识别牙周致病菌的标准CriteriaforIdentificationsofPeriodontalPathogens经典Koch法则（1984）：在同样的疾病中能发现同一种病原菌；能从该疾病组织中分离出病原菌并纯培养；这种纯培养物接种到易感动物能引起相似疾病；能从实验动物中重新获得病原菌的纯培养。1979年学者根据牙周病特点进行修正，均未背离上述法则第28页，共35页，2023年，2月20日，星期日各型牙周病有关的致病菌牙周病类型致病菌种类牙龈炎黏放线菌(A.viscosus)内氏放线菌(A.naeslundii)微小微单孢菌(M.micro)黄褐二氧化碳噬纤维菌(C.orchracea)牙龈二氧化碳噬纤维菌(C.gingivalis)妊娠期龈炎中间普氏菌(P.intermedia)坏死性溃疡性龈炎具核梭杆菌(F.nucleatum)中间普氏菌(P.intermedia)齿垢密螺旋体(T.denticola)慢性牙周炎牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)中间普氏菌(P.intermedia)福赛坦氏菌(T.forsythia)直肠弯曲菌(C.rectus)具核梭杆菌(F.nucleatum)局限性侵袭性牙周炎伴放线聚集杆菌(A.actinomycetemcomitans)第29页，共35页，2023年，2月20日，星期日牙周病的重要致病菌证据充分的致病菌中等证据的致病菌伴放线聚集杆菌(Aggregatibacteractinomycetemcomitans)牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonasgingivalis)福赛坦氏菌(Tannerellaforsythia)直肠弯曲菌(Campylobacterrecta)缠结优杆菌(Eubacteriumnodatum)具核梭杆菌(Fusobacteriumnucleatum)中间普氏菌(Prevotellaintermedia)变黑普氏菌(Prevotellanigrescens)微小微单孢菌(Micromonasmicro)中间链球菌(Streptococcusintermedius)齿垢密螺旋体(Treponemasdenticola)第30页，共35页，2023年，2月20日，星期日伴放线聚集杆菌Ａａ

Ｇ-，厌氧和微需氧，分a-f6个血清型(serotype)，国人c型为主

Aa与侵袭性牙周炎的关系密切Aa菌毛结构易附着荚膜抵抗吞噬和消化膜泡LSP，白细胞毒素，骨吸收因子等Aa的致病性和临床意义:第31页，共35页，2023年，2月20日，星期日Aa的致病性和临床意义:Aa的致病性白细胞毒素内毒素白细胞死亡,释放溶酶体,牙周组织损伤降低宿主抵抗力骨吸收骨吸收作用成纤维细胞抑制因子胶原酶抑制胶原合成,降解胶原组织破坏作用毒性因子致损机制临床结果唯一第32页，共35页，2023年，2月20日，星期日伴放线聚集杆菌A．菌落形态B．革兰染色菌体形态C．扫描电镜图像(SEM×5000)D．透射电镜图像，可见膜泡(TEM×15000)ABCD第33页，