药物分析维生素类药物的分析

维生素：是维持人体正常代谢机能所必需的活性物质。人体不能合成维生素。第一节概述VitA、D2、D3、E、K1等脂溶性水溶性VitB族(B1、B2、B6、B12)VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺VitMVitPP现在是1页\一共有98页\编辑于星期二-H维生素A醇-COCH3维生素A醋酸酯-COC15H31维生素A棕榈酸酯R:第二节维生素A现在是2页\一共有98页\编辑于星期二（一）为一个具有共轭多烯侧链的环己烯一、结构与性质具有UV吸收存在多种立体异构化合物现在是3页\一共有98页\编辑于星期二维生素A325.5100%新维生素Aa32875%新维生素Ab320.524%新维生素Ac310.515%异维生素Aa32321%异维生素Ab32424%相对生物效价现在是4页\一共有98页\编辑于星期二VitA2VitA3易发生脱氢、脱水、聚合反应鲸醇现在是5页\一共有98页\编辑于星期二△或有金属离子存在时氧化↑（二）共轭多烯侧链易被氧化现在是6页\一共有98页\编辑于星期二环氧化物VitA醛VitA酸现在是7页\一共有98页\编辑于星期二（三）与三氯化锑发生呈色反应CHCl3（四）溶解性不溶于水；易溶于有机溶剂和植物油等（一）三氯化锑反应条件无水无醇CHCl3二、鉴别现在是8页\一共有98页\编辑于星期二蓝色紫红现在是9页\一共有98页\编辑于星期二（BP（1998））λmax为326nm一个吸收峰UV法（二）λmax为350～390nm三个吸收峰现在是10页\一共有98页\编辑于星期二去水VitA（VitA3）↓VitA现在是11页\一共有98页\编辑于星期二现在是12页\一共有98页\编辑于星期二USP显色剂磷钼酸规定斑点颜色和Rf值BP杂质对照品法显色剂三氯化锑（三）TLC法立体异构体氧化产物及光照产物合成中间体去氢维生素A（VitA2）去水维生素A（VitA3）（一）UV法三、含量测定现在是13页\一共有98页\编辑于星期二三点校正法1.条件：（1）杂质的吸收在310~340nm波长范围内呈一条直线，且随波长的增大吸收度减小；（2）物质对光的吸收具有加和性。2.波长的选择：（1）1

VitA的max（328nm）（2）23

分别在1的两侧各选一点现在是14页\一共有98页\编辑于星期二现在是15页\一共有98页\编辑于星期二测定对象——VitA醋酸酯第一法等波长差法第二法等吸收度法(皂化法)测定对象VitA醇现在是16页\一共有98页\编辑于星期二现在是17页\一共有98页\编辑于星期二测定法（1）基本步骤:第一步A选择选择依据：所选A值中杂质的干扰已基本消除注意：

C为混合样品的浓度第二步求现在是18页\一共有98页\编辑于星期二第三步求效价换算因数由纯品计算而得：现在是19页\一共有98页\编辑于星期二第四步：求标示量％现在是20页\一共有98页\编辑于星期二方法：（2）第一法维生素A醋酸酯判断是否在326～329nm之间在326～329nm之间改用第二法是否求算并与规定值比较现在是21页\一共有98页\编辑于星期二

规定值差值现在是22页\一共有98页\编辑于星期二

判断差值是否超过规定值的有一个以上超过无超过计算A328（校正）用A328计算现在是23页\一共有98页\编辑于星期二03%－15%－3%第二法第二法现在是24页\一共有98页\编辑于星期二VitAD胶丸中VitA的含量测定

精密称取本品(规格10000VitAIU/丸)装量差异项下（平均装量0.08262g/丸）的内容物0.2399g至250ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀；精密量取2.0ml，置另一20ml量瓶中，用环己烷稀释至刻度，摇匀。以环己烷为空白，测定最大吸收波长为328nm，并在下列波长处测得吸收度为A300：0.354A316：0.561A328：0.628A340：0.523A360：0.216A300/A328：0.555A316/A328：0.907A328/A328：1.000A340/A328：0.811A360/A328：0.299求本品中维生素A的含量？现在是25页\一共有98页\编辑于星期二A300/A328：0.564A316/A328：0.893A328/A328：1.000A340/A328：0.833A360/A328：0.3440.5550.9071.0000.8110.299+0.01－0.010+0.02+0.04－－－－－=====现在是26页\一共有98页\编辑于星期二适用于维生素A醇（等吸收度法）第一法无法消除杂质干扰时用此法[皂化法、6/7A法]（3）第二法现在是27页\一共有98页\编辑于星期二水溶性脂溶性现在是28页\一共有98页\编辑于星期二判断max是否在323～327nm之间取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定计算是否现在是29页\一共有98页\编辑于星期二判断A300/A325是否小于等于0.73是否取未皂化样品采用色谱法纯化后再测定计算A325(校正)现在是30页\一共有98页\编辑于星期二03%－3%现在是31页\一共有98页\编辑于星期二三氯化锑比色法（二）优点简便快速λmax618nm～620nm标准曲线法缺点呈色不稳定（5~10s内）水分干扰与标准曲线温差≤1℃专属性差三氯化锑有腐蚀性现在是32页\一共有98页\编辑于星期二苯并－二氢吡喃醇第三节维生素E

现在是33页\一共有98页\编辑于星期二名称R1R2相对活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***现在是34页\一共有98页\编辑于星期二生物效价右旋体：消旋体=1.4：10（天然品）（合成品）dl－α－生育酚醋酸酯现在是35页\一共有98页\编辑于星期二结构与性质一、苯环+二氢吡喃环+饱和烃链1、易溶于有机溶剂，不溶于水2、UV3、酯键易水解△现在是36页\一共有98页\编辑于星期二75℃15′（一）硝酸反应橙红色鉴别二、现在是37页\一共有98页\编辑于星期二（橙红色）生育红生育酚HNO3强氧化剂现在是38页\一共有98页\编辑于星期二取本品约30mg，加无水乙醇10ml溶解后，加硝酸2ml，摇匀，在75℃加热15分钟，溶液应显橙红色。三氯化铁－联吡啶反应△[O]（二）现在是39页\一共有98页\编辑于星期二生育酚对-生育醌[O]弱氧化剂现在是40页\一共有98页\编辑于星期二红色现在是41页\一共有98页\编辑于星期二=41.0～45.5λmax=284nmλmin=254nm0.01%无水乙醇中UV法（三）现在是42页\一共有98页\编辑于星期二薄层板硅胶G展开剂环己烷-乙醚（4：1）显色剂硫酸（105℃5′）VitERf

=0.7TLC法（四）现在是43页\一共有98页\编辑于星期二游离生育酚硫酸铈滴定液（0.01mol/L）二苯胺（亮黄→灰紫）利用游离生育酚的还原性，将硫酸铈还原成硫酸亚铈检查

三、原理（一）试剂（二）现在是44页\一共有98页\编辑于星期二

取本品0.10g，加无水乙醇5ml溶解后，加二苯胺试液1滴，用硫酸铈液（0.01mol/L）滴定，消耗硫酸铈液（0.01mol/L）不得过1.0ml。≤2.15％Chp（2000）限量（三）（M生育酚=430.8）现在是45页\一共有98页\编辑于星期二现在是46页\一共有98页\编辑于星期二药典规定消耗硫酸铈液（0.01mol/L）≤1.0ml设：应消耗硫酸铈液≤Vml 0.01×1.0＝实际浓度×V若硫酸铈液浓度不是0.01000mol/L，应重新计算硫酸铈的消耗量现在是47页\一共有98页\编辑于星期二例Ce(SO4)2=0.01020mol/L现在是48页\一共有98页\编辑于星期二四、含量测定GC法（一）GC特点1、选择性好灵敏度高速度快分离效能好挥发性低、不稳定、极性强→衍生化易受样品蒸气压限制现在是49页\一共有98页\编辑于星期二载气→N2固定液→硅酮（OV-17）担体→硅藻土或高分子多孔小球柱温→265℃检测器→氢火焰离子化检测器(FID)内标→正三十二烷n≥500R≥2VitE测定的色谱条件2、内标法加校正因子现在是50页\一共有98页\编辑于星期二现在是51页\一共有98页\编辑于星期二内标法供试液（样品+内标）内标物对照液（对照+内标）是样品中不存在的物质与被测组分峰靠近能与各组分完全分离与被测组分的量接近现在是52页\一共有98页\编辑于星期二利用生育酚的易氧化性还原型氧化型二苯胺（亮黄→灰紫）△原理1、铈量法（二）指示剂2、现在是53页\一共有98页\编辑于星期二防止Ce(SO4)2的水解减慢生育酚被O2氧化速度C、酸性条件Ce(SO4)2易溶于水生育酚易溶于醇B、溶剂分子量较大，反应慢易被O2氧化A、反应速度H2SO4讨论3、现在是54页\一共有98页\编辑于星期二含量计算4、MVitE=472现在是55页\一共有98页\编辑于星期二氨基嘧啶环－CH2－噻唑环(季铵碱)第四节维生素B1HClCl-现在是56页\一共有98页\编辑于星期二（一）溶解性1、易溶于水2、水溶液呈酸性反应（二）UV共轭双键λmax=246nm结构与性质一、现在是57页\一共有98页\编辑于星期二嘧啶环——伯氨噻唑环——季铵1、可与酸成盐2、与生物碱↓→↓3、含量测定——非水碱量法（三）硫色素反应（四）碱性现在是58页\一共有98页\编辑于星期二ChP鉴别试验二、（一）硫色素反应现在是59页\一共有98页\编辑于星期二现在是60页\一共有98页\编辑于星期二硫色素＋2H现在是61页\一共有98页\编辑于星期二VitB1H+H+H+H+（二）沉淀反应S元素反应（三）其他反应现在是62页\一共有98页\编辑于星期二三、含量测定喹那啶红－亚甲蓝（紫红→天蓝）（一）非水溶液滴定法现在是63页\一共有98页\编辑于星期二UV法（二）现在是64页\一共有98页\编辑于星期二片剂、注射剂（每片）相当于标示量的%=规格g/片gChP现在是65页\一共有98页\编辑于星期二第五节维生素CL－抗坏血酸1、易溶于水2、水溶液呈酸性结构与性质一、（一）溶解性现在是66页\一共有98页\编辑于星期二二烯醇结构二酮基结构二烯醇结构（二）强还原性现在是67页\一共有98页\编辑于星期二有活性有活性无活性现在是68页\一共有98页\编辑于星期二△糖类的显色反应50℃结构与糖类相似（三）具糖的性质现在是69页\一共有98页\编辑于星期二C3－OH的pKa=4.17C2－OH的pKa=11.57酸性（四）一元酸现在是70页\一共有98页\编辑于星期二L(+)－抗坏血酸活性最强手性C（C4、C5）（五）光学活性**现在是71页\一共有98页\编辑于星期二与碱反应（六）水解反应现在是72页\一共有98页\编辑于星期二（七）UV特征现在是73页\一共有98页\编辑于星期二与氧化剂的反应（一）鉴别试验二、现在是74页\一共有98页\编辑于星期二1、与AgNO3反应2、与2，6-二氯靛酚反应(ChP2000)氧化型玫瑰红色还原型蓝色OHˉ(ChP2000)现在是75页\一共有98页\编辑于星期二（玫瑰色）（无色）现在是76页\一共有98页\编辑于星期二3、与碱性酒石酸铜反应USP4、与KMnO4反应糖类的反应（二）或盐酸50℃吡咯USP现在是77页\一共有98页\编辑于星期二现在是78页\一共有98页\编辑于星期二（蓝色）(糠醛)（戊糖）50℃(吡咯)现在是79页\一共有98页\编辑于星期二UV（三）BP0.01mol/LHCl指示剂淀粉指示液原理1、碘量法（一）含量测定三、现在是80页\一共有98页\编辑于星期二H+现在是81页\一共有98页\编辑于星期二取本品约0.2g，精密称定，加新沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液（0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于8.806mg的C6H8O6方法2、现在是82页\一共有98页\编辑于星期二（1）酸性环境d.HCl减慢VitC被O2氧化速度

（2）新沸冷H2O赶走水中O2讨论4、（3）立即滴定减少O2的干扰

（4）附加剂干扰的排除片剂——滑石粉——过滤注射剂——抗氧剂——丙酮甲醛Na2SO3NaHSO3Na2S2O3Na2S2O5现在是83页\一共有98页\编辑于星期二CHHOOaS3aSO+H2NHON2252HONHCOS3a现在是84页\一共有98页\编辑于星期二2，6-二氯靛酚钠滴定法法（二）USPJP原理1、现在是85页\一共有98页\编辑于星期二自身指示终点法方法2、现在是86页\一共有98页\编辑于星期二（2）快速滴定2min内

（1）酸性环境HPO3-HAc

稳定VitC防止其他还原性物质干扰（3）剩余比色测定

（定量过量）（测剩余染料）讨论3、现在是87页\一共有98页\编辑于星期二（4）缺点

需经常标定贮存≤一周不稳定干扰多氧化力较强现在是88页\一共有98页\编辑于星期二HPLC法（三）1、HPLC的优点灵敏度高选择性高分离分析同步微量分析干扰少

快速现在是89页\一共有98页\编辑于星期二2、HPLC法分离VitC常用方法及测定对象

对象制剂、生物样品、果汁方法离子交换色谱法离子对色谱法分配色谱法（正、反相）血、尿、组织、细胞等现在是90页\一共有98页\编辑于星期二例多种维生素片中VitA、VitB1、VitB2、VitB6、烟酰胺、VitC、VitE的含量测定色谱柱

ODS流动相

A、水-甲醇（4：1）B、甲醇

（梯度洗脱）抗氧剂

二巯基丙烷磺酸钠现在是91页\一共有98页\编辑于星期二水溶性维生素

离子对色谱法（樟脑磺酸）内标法+校正因子内标物——苯酚脂溶性维生素

外标法现在是92页\一共有98页\编辑于星期二108．在三氯醋酸或盐酸存在下，经水解、脱羧、失水后，加入吡咯即产生蓝色产物的药物应是（）A.氯氮卓B.维生素AC.普鲁卡因D.盐酸吗啡E.维生素C99：77.下列药物的碱性溶液，加入铁氰化钾后，再加正丁醇，显蓝色荧光的是（）A.维生素AB.维生素B1C.维生素CD.维生素DE.维生素E现在是93页\一共有98页\编辑于星期二97：77．既具有酸性又具有还原性的药物是（）A.维生素AB.咖啡因C.苯巴比妥D.氯丙嗪E.维生素C99m：132.维生素C的鉴别反应，常采用的试剂有（）A.碱性酒石酸铜B.硝酸银C.碘化铋钾D.乙酰丙酮E.三氯醋酸和吡咯99m：84.测定维生素C注射液的含量时，在操作过程中要加入丙酮，这是为了（）A.保持维生素C的稳定B.增加维生素C的溶解度C.使反应完全D.加快反应速度E.消除注射液中抗氧剂的干扰现在是94页\一共有98页\编辑于星期二98：85.能发生硫色素特征反应的药物是（）A.维生素AB.维生素B1C.维生素CD.维生素EE.烟酸97：81．使用碘量法测定维生素C的含量,已知维生素C的分子量为176.13，每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当于维生素C的量为（）A.17.61mgB.8.806mgC.176.1mgD.88.06mg