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文档简介

植物组培快繁实验室学时第1页,共35页,2023年,2月20日,星期五植物组培快繁实验室的设计新建组培室地址的选择:1、首先要保证水电供应;2、为节省能源,充分利用自然光,实验室应向南建设,使采光面积和时数达到最大;3、对于商业性实验室,交通条件是否便利是一个应该考虑因素。4、组培室最好避免建立在繁忙的交通线的附近;5、避免与温室、微生物实验室、昆虫实验室、种子或其他植物材料储藏室相邻,以免由于空气流通造成难以克服的污染。

第2页,共35页,2023年,2月20日,星期五植物组织培养实验室的设计新建组培室需考虑的问题:所从事的实验的性质,即是生产性的还是研究性的,是基本层次的还是较高层次的;实验室的规模,规模主要取决于经费和实验性质。第3页,共35页,2023年,2月20日,星期五植物组织培养实验室的设计植物组织培养实验室设计应遵守的原则:实验室设置的基本原则是:科学、高效、经济和实用。一个组织培养实验室必须满足3个基本的需要:实验准备、无菌操作和控制培养。第4页,共35页,2023年,2月20日,星期五保证绝对清洁植物组织培养一般需要光照和控温,为节省能源,应充分利用自然光,同时房间设计要便于控温。实验室的设计按自然工作程序的先后安排成一条连续的生产线,避免环节倒排。实验室设置防止昆虫、鸟类、鼠类等动物进入的设施。实验室内的地面、墙壁和顶棚等,要采用最小的产生灰尘建筑材料。实验室内安装的洗手池、下水道的位置要适宜,不得对培养带来污染。实验室应有消防火栓、报警装置等安全设施。植物组织培养实验室的设计第5页,共35页,2023年,2月20日,星期五组织培养实验室布局的总体要求

功能齐全布局合理环境清洁易于灭菌第6页,共35页,2023年,2月20日,星期五植物组织培养实验室设计实例第7页,共35页,2023年,2月20日,星期五第8页,共35页,2023年,2月20日,星期五基本实验室布局平面图实验台搁架培养架培养架培养架培养架药品及仪器柜无菌台无菌台搁架拉窗冰箱搁架水槽电炉门4.5m3.0m3.5m4.0m准备室缓冲室无菌室培养室第9页,共35页,2023年,2月20日,星期五基本实验室辅助实验室实验室组成准备室缓冲室无菌操作室培养室细胞生物学实验室温室生化分析实验室二、实验室组成第10页,共35页,2023年,2月20日,星期五基本实验室包括准备室、无菌操作室、培养室、缓冲间,是组织培养实验所必须具备的基本条件。(一)基本实验室第11页,共35页,2023年,2月20日,星期五第12页,共35页,2023年,2月20日,星期五第13页,共35页,2023年,2月20日,星期五第14页,共35页,2023年,2月20日,星期五功能:又叫化学实验室,进行一切与实验有关的准备工作。要求:最好有20平方米左右。要求宽敞明亮、以便于放置多个实验台和相关设备,方便多人同时工作;同时要求通风条件好,便于气体交换;实验室地面应便于清洁,并应进行防滑处理。1、准备室第15页,共35页,2023年,2月20日,星期五分类:(1)分体式-研究性质实验室。(2)通间式-规模化实验室。设备:准备室应具备工作台、柜橱、水池、仪器、药品等。第16页,共35页,2023年,2月20日,星期五功能:也叫接种室,进行材料的立体无菌操作。要求:房间一般不宜过大,10-20平方米即可。要求封闭性好,干燥清洁,能较长时间保持无菌;地面及内墙壁都应采用防水和耐腐蚀材料;地面要求平坦无缝;防止空气对流。

2、无菌操作室第17页,共35页,2023年,2月20日,星期五一般新建实验室的无菌室在使用之前应进行灭菌处理,处理方法是甲醛和高锰酸钾熏蒸,并需定期灭菌处理,还可用紫外线照射1-2h/周,或每次使用前照射10-30min。设备:无菌操作室安装有紫外灯和空调,工作台和搁架,还有超净工作台和整套灭菌接种仪器、药品等。第18页,共35页,2023年,2月20日,星期五功能:对接种到培养瓶等器皿中的植物离体材料进行控制条件下的培养。要求:约需10-20平方米左右。应保持清洁和适度干燥;安装排风窗和换气扇等培养室的换气装置;配置适宜的培养架,并安装日光灯照明。设备:培养架、光照培养箱或人工气候箱、边台用于拍摄培养物生长状况,除湿机、显微镜、温湿度计、空调等。3、培养室第19页,共35页,2023年,2月20日,星期五功能:是进入无菌室前的一个缓冲场地,减少人体从外界带入的尘埃等污染物。工作人员在此换上工作服、拖鞋,戴上口罩,才能进入无菌室和培养室。要求:缓冲间需3-5平方米,可建在准备室外或无菌操作室外,应保持清洁无菌;备有鞋架和衣帽挂钩,并有清洁的实验用拖鞋、已灭菌过的工作服;墙顶用1-2盏紫外灯定时照射,对衣物进行灭菌。设备:1-2盏紫外灯、灭菌后的工作服、拖鞋、口罩。4、缓冲间第20页,共35页,2023年,2月20日,星期五1、细胞学实验室功能:对培养材料进行细胞学鉴定和研究,由制片室和显微观察室组成。要求:明亮、清洁、干燥、防止潮湿和灰尘污染。2、生化分析实验室功能:培养细胞产物为主要目的的实验室,应建立相应的分析化验实验室,随时对培养物成分进行取样检查。大型次生代谢物生产,还需有效分离实验室。(二)辅助实验室第21页,共35页,2023年,2月20日,星期五标准的植物组织培养实验室应该包括:洗涤室贮存室灭菌室化学实验室或培养基配制室无菌室或接种室培养室观察与鉴定室温室或苗圃第22页,共35页,2023年,2月20日,星期五洗涤室洗涤室主要对组织培养用的玻璃器皿、塑料器皿和其他实验用具进行清洗。房间要配备自来水管、水池或水槽、工作台和各种清洗器具的洗涤试剂,地面要光滑坚硬,要求有很好的排水设施。为了保证玻璃器皿的洁净干燥,还需要电热鼓风干燥箱(烘箱)。第23页,共35页,2023年,2月20日,星期五贮存室

贮存室用以对各类器皿和用具的存放和保管。植物组织培养需要较多的玻璃器皿,而且生产中使用数量有一定的周期性,宜用专门房间和专门货架、货柜等贮存,以免破损、脏污。第24页,共35页,2023年,2月20日,星期五化学实验室或培养基配制室化学实验室主要用来完成培养基配制的各个环节的工作,如药品的称量、溶解、培养基的配制和分装等。要有较大的平面工作台或实验台,低温冰箱或冰柜,各种橱架、药品柜及化学药品,各种型号玻璃器皿或其他器皿,各种型号的天平和称量器具,酸度计和搅拌器,蒸馏水器、离子交换系统或其他过滤渗透系统。

第25页,共35页,2023年,2月20日,星期五灭菌室

灭菌室用于对培养基、玻璃器皿及接种工具的灭菌。一般采用医用或微生物研究用的手提式高压蒸汽灭菌锅,或大型的立式、卧式高压灭菌锅。灭菌室室内应装备水、电、煤气等有关设备,墙壁宜防潮湿、耐高温。另要配备钟表和计时器。第26页,共35页,2023年,2月20日,星期五无菌室或接种室接种室应该保证洁净、无菌。目前多用超净工作台来代替这种要求严格的接种室。除超净工作台外,应配备接种用的酒精灯、各种医用镊子、解剖刀、手术刀、接种针、贮藏70%酒精棉球的广口瓶、试管架和载物台等工具。第27页,共35页,2023年,2月20日,星期五培养室培养室用于对植物组织器官、细胞或原生质体等外植体开始的各阶段的培养,以及各种形式和方法的培养。为了达到培养所需的各种光照、温度、湿度、空气等条件,要在培养室装有监测这些条件因子的仪器,如温度计、湿度计、照度计或自动监测记录温度、湿度的装置等。一般要用自动控温的空调、加热器、制冷机、电炉等。由于培养材料与方法的不同,还须配置各种摇床、转床等特殊设备。第28页,共35页,2023年,2月20日,星期五观察与鉴定室观察室用来对培养材料及培养后结果的观察、鉴定、记录和分析。一般要配置高倍显微镜、倒置显微镜、实体显微镜、恒温箱、切片机、烤片台、恒温水浴、滴瓶、载玻片、盖玻片等制片观察设备;还要配置记录本、绘图及照相或录像设备,用以记录观察结果。如果是研究性实验室,还要配备更多的仪器,用以细胞学方面的研究;同时应同时有摄影室或暗室,进行摄影、显影、印像、放大等操作。第29页,共35页,2023年,2月20日,星期五温室或苗圃温室用来对培养的再生植株的驯化和移栽。温室对于从培养室或实验室培养后的试管苗仍不能作为成品苗出售的生产性实验室是必要的。温室或苗圃除应配备有一定的供水设施外,还要有弥雾装置、荫蓬、移植床、钵、盆、塑料布、草炭、蛭石、粗沙及其他一些移栽及管理设备。第30页,共35页,2023年,2月20日,星期五(一)、基本设备配置1、常规设备1)天平2)冰箱3)酸度计4)离心机5)加热器6)其它:纯水器、分装设备三、仪器设备和器皿用具第31页,共35页,2023年,2月20日,星期五2、灭菌设备1)高压灭菌锅2)干热消毒柜3)过滤灭菌器3、无菌操作设备1)接种箱2)净化工作台4、培养设备1)培养架2)培养箱3)摇床4

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