饲料中总磷量的测定

饲料中总磷量的测定

饲料与营养系饲料营养教研室一、适用范围：本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、预混合饲料和单一饲料。测定范围磷含量0~20µg/ml。二、方法原理：将试样中的有机物破坏，使磷游离出来，在酸性溶液中，用钒钼酸铵处理，生成黄色的(NH4)3PO4NH4VO3·16MoO3，在波长420nm下进行比色测定。三、试剂：本标准中所用试剂，除为特殊说明外，均为分析纯。实验室用水为蒸馏水或同等纯度的水。1.盐酸：1+1水溶液2.硝酸3.钒钼酸铵显色剂：称取钒钼酸铵1.25g，加硝酸250ml，另称取钼酸铵25g，加水400ml溶解之，在冷却的条件下，将两种溶液混合，用水定容1000ml。避光保存，若生成沉淀，则不能继续使用。4.磷标准液：将磷酸二氢钾在105℃干燥1h，在干燥器中冷却后称取0.2195g溶解于水，定量转入1000ml容量瓶中，加硝酸3ml，用稀释至刻度，摇匀，即为50µg/ml的磷标准液。

盐酸：1+1水溶液硝酸钒钼酸铵显色剂磷标准液四、仪器设备：1．

实验室用样品粉碎机或研钵2．

分样筛：孔径0.45mm（40目）3．

分析天平：感量0.0001g4．

分光光度计：有10mm比色池，可在420nm测定吸光度5．

高温炉：可控温度在550℃±20℃6．

瓷坩埚：50ml7．

容量瓶：50ml、100ml、1000ml8．

刻度移液管：1.0ml、2.0ml、3.0ml、5.0ml、10ml9．可调温电炉：1000W分析天平分光光度计高温炉可调温电炉瓷坩埚容量瓶移液管试样制备：取有代表性试样，粉碎至0.44mm（40目），用四分法将试样缩分至200g装入密封容器，防止试样成分变化或变质。五、测定步骤：（一）试样的分解干法：[不适用含Ca(H2PO4)2的饲料]：

1.坩埚洗涤干净、烘干备用。2.样品约重3.称取试样2~5g(精确至0.0002g)于坩埚中，1号

2号

。4.在电炉上小心炭化，再放入高温炉，在550℃灼烧3h（或测定灰分后继续进行），取出冷却。5.加酸溶解加入10ml盐酸溶液和硝酸数滴，小心煮沸。6.分解液的转移与定溶冷却后借助漏斗转入100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，为试样分解液。测定步骤1.坩埚烘干２.试样称取样品称重1号=35.3520-32.3087=2.9650样品称重2号=33.2702-30.4254=2.8448３.样品的炭化、灰化４.试样分解液制备容量瓶和漏斗洗涤干净、编号。玻棒洗涤干净。在盛灰分的坩埚中加入10毫升盐酸溶液（10毫升刻度吸管移取）。加数滴浓硝酸，在电炉上小火煮沸。将此溶液借助漏斗无损转移到250毫升容量瓶中，用蒸馏水冲洗坩埚几次，洗液转入容量瓶中，冷却到室温，用蒸馏水定容，摇匀即为样品分解液。

◆试样分解液制备坩埚中加入10毫升盐酸溶液溶解灰分滴入3~5滴浓硝酸◆试样分解液制备在电炉上小火煮沸。（低温）关闭电炉，冷却至室温。◆试样分解液制备溶液的转移与洗涤溶液的转移与洗涤◆试样分解液制备溶液定溶、摇均备用被移灰分液润洗3次（二）准确移取磷标准液：准确移取磷酸标准液0ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml、15.0ml于50ml容量瓶中，各加入钒钼酸铵显色剂10ml，用水稀释至刻度，摇匀，常温下放置10min以上，以0ml溶液为参比，用10mm比色池，在420nm波长下，用分光光度计测定各溶液的吸光度。以磷含量为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。P标准曲线的绘制测定步骤

P标准液比色液P标准曲线（三）试样的测定：准确称取试样分解液1~10ml（含磷量50~750µg）于50ml容量瓶中，加入钒钼酸铵显色剂10ml，按6.2的方法显色和比色测定，测得试样分解液的吸光度，用标准曲线查得试样分解液的含磷量（X值）。测定步骤

试样分解液比色液的制备移液管洗涤干净，用被移灰分液润洗3次。试样分解液比色液的制备试样分解液比色液的制备试样分解液比色液吸光度的测定1号样品测定值2号样品测定值试样分解液比色液吸光度值：1号0.538。2号0.467。从P标准曲线上查得X值：1号450

µg

。2号395µg

。测定结果的计算：样品中总磷的含量（P%）按下式计算：XV1P=——————×——×100％m

×106

V2式中：m——试样的质量（g）X——由标准曲线查得试样分解液总磷含量（µg）V1——试样分解液定容的体积（ml）V2——测定时移取的试样分解液体积（ml）1号：结果计算

XV1P=———————×———×100％m

×106

V2

450250P=———————×———×100％=1.84%3.0433×106

22号：结果计算XV1P=———————×———×100％m

×106

V2

395250P=———————×———×100％=1.74%2.8448×106

2★重复性：试样取两个平行样，其算术平均值为结果总磷含量低于0.5%，允许相对偏差不超过10%总磷含量大于或等于0.5%，允许相对偏差不超过3%相对偏差=│测定值-平均值│/平均值平均值、相对偏差计算平均值=(1.84%+1.74%)/2=1.79%相对偏差=│1.84%-1.79%│/1.79%×100%=2.79%磷测定记录表样品名称鱼粉样品号12坩埚号4849坩埚重（克）32.308730.4254坩埚+样品重（克）