真菌李若瑜课件

真菌感染诊疗进展2005年12月13日真菌感染的流行特点+600%+300%+300%Martinetal,NEJM2003;348:1546真菌感染不断增加的现状——国内侵袭性真菌感染的发病情况

——协和医院感染科刘正印等，中华医学杂志2003年3月第83卷第5期54.84%12.9%3.23%9.68%19.35%国内西南医院尸解资料，(1971-2000)，郝飞教授提供AspergillusCryptococcusMucorCandidaAllothersAIDSIntravascularDevicesOncologyPatientsTransplantPatientsSpectrumAntibiotics真菌感染不断增加的原因—临床常见的条件性真菌感染念珠菌病:最常见，占血源感染的第4位。非粒缺病人,SICU常见(肾衰、插管）。曲霉菌病:血液系统恶性肿瘤病人发病可达30%，BMT常见合并症。隐球菌病:在艾滋病人发病率为10-20%。接合菌病（毛霉病）:多见于重症糖尿病和烧伤、器官移植病人。临床有增多趋势的条件致病性真菌非白念念珠菌感染(近平滑、光滑增加)毛孢子菌感染地霉感染镰刀菌感染枝顶孢霉感染暗色真菌感染马内菲青霉病系统性真菌感染的现状—危及生命的机会性、侵袭性感染不断增加，以念珠菌和曲霉最为常见，其它少见菌感染也在增多；对系统性感染仍然缺乏有效的诊断手段；抗真菌新药在不断增加，仍然不能满足临床需求；预防用药以及经验性药物治疗不断增加，耐药菌株逐渐增加。真菌病诊断感染病学家临床医师真菌学家生产研发者病理学家真菌感染的实验诊断方法及问题显微镜检查-阳性率？培养-时间？敏感性？意义？血清学-敏感性？特异性？分子生物学-标准化？真菌病的非培养诊断——乳胶凝集试验检测新生隐球菌抗原ELISA法检测念珠菌和曲霉抗原β-1,3葡聚糖检测免疫组化、原位杂交技术用于深部真菌病诊断寻找种特异性引物并应用于菌种鉴定——曲霉、外瓶霉、镰刀菌、孢子丝菌等PCR？？稳定、特异问题检测曲霉GM抗原的ELISA试验GM抗原检测用于侵袭性曲霉病诊断与临床诊断和疗效反应有良好的一致性。检测方法有ELISA、放射免疫分析（RIA）和乳胶凝集试验等。Platelia试剂盒采用ELISA方法，敏感性~80%，特异性>80%。儿童假阳性10%。Cut-off值影响结果—0.5:早期诊断,特异性差;1.5:特异性提高。可动态观察。Dr.MaschmeyerG.in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin曲霉抗原ELISA检测方法

（Platelia试剂盒）48例患者：确诊IA4例，3例阳性；高度怀疑IA13例，8例阳性；可疑IA31例，2例阳性。

王，等。临床皮肤科杂志，待发表。灵敏性为64.7%特异性为93.5%假阳性率为6.5%假阴性率为35.3%PCR过筛试验诊断IA每周监测2次—通用引物;确定采用巢式和实时定量;敏感性100%,特异性65%;早于临床症状2天,早于确诊9天;动态观察持续阴性可排除;Dr.MaschmeyerG.in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.PCR扩增ITS及18S区基因片段700bp500bp300bp临床株参考株临床株参考株ITS18SJunZhaoetal.JCM2001NestedPCRinAnimalModels余进，等。中华检验医学杂志，2003种特异引物巢式PCR扩增烟曲霉rRNA基因确诊和拟诊曲霉感染患者的诊断情况编号抗原检测巢式PCR传统方法1++烟曲霉免疫组化（+）2+-血培养黄曲霉3++痰培养烟曲霉4±+痰培养烟曲霉5-+痰培养烟曲霉6++尿培养为烟曲霉7++痰培养烟曲霉8+-痰、血培养阴性9--痰、血培养阴性10--痰、血培养阴性完成全基因序列测定的病原真菌白念珠菌等致病性念珠菌新生隐球菌粗球孢子菌烟曲霉、构巢曲霉组织胞浆菌卡氏肺孢子虫深部真菌感染诊断

—需要解决的问题重视基础真菌学检验，将直接镜检与真菌培养方法联合应用；注重寻找组织学证据这一诊断的“金标准”，寻找病原真菌入侵机体的直接证据；对诊断新方法应严格评价并对其进行标准化和规范化；加强临床与实验室之间、实验室与实验室之间的交流与协作。真菌感染的治疗临床对抗真菌治疗的需求早期确切诊断对病原体的精确鉴定体外药敏试验方法的建立高效低毒的抗真菌药物合理正确选择抗真菌药物NystatinAmphotericinB(1958)Griseofulvin5-FCMiconazoleKetoconazoleFluconazoleItraconazoleL-AmBABCDABLCTerbinafineVoriconPosaconXMPSordarinsCaspofunginMicafunRavuconAnidulafungin抗真菌药物的发展抗真菌药物作用机制麦角固醇多烯类如两性霉素B唑类如氟康唑核苷类如5-氟胞嘧啶角鲨烯羊毛甾醇K+Mg2+丙烯胺如特比萘芬乙酰辅酶A棘白菌素类如卡泊芬净尼可霉素核酸合成葡聚糖合成甲壳质合成抗真菌药物的进展—降低多烯类药物的毒副作用二性霉素B脂质剂型（L-AmB、ABCD、ABLC），高效低毒唑类药物的优化和开发氟康唑和伏立康唑（Voriconazole，VOR）伊曲康唑和泊沙康唑（Posaconazole，Posa）发现新型抗真菌药物（作用于细胞壁）1，3葡聚糖合成酶：卡泊芬净（Caspofungin，CASP）、米卡芬净（Micafungin）和安尼杜拉芬净（Anidulafungin）几丁质合成酶：尼可霉素Z（NikkomycinZ）两性霉素B的三种脂质基制剂两性霉素B脂质体（AmBisome）：包裹在含磷脂的脂质微粒中两性霉素B胶状分散剂（Amphocil,Amphotec,ABCD）：与胆固醇硫酸酯结合形成小脂质片状物两性霉素B脂质体复合物（Abelcet,ABLC）：与磷脂复合构成带状结构抗菌谱与抗菌作用与常规制剂相同，剂量需达3-5倍多分布于网状内皮系统，减少了在肾组织中的分布，降低肾毒性在一定程度上减轻发热等急性反应，个别制剂耐受性差不宜作为一线药物新型抗真菌药物三唑类：--伏立康唑Voriconazole--泊沙康唑Posaconazole细胞壁成分合成抑制剂--β-1，3葡聚糖合成酶抑制剂：肺白菌素、棘白菌素--几丁质合成酶抑制剂：尼可霉素和多氧菌素--甘露聚糖旦白复合物：：普拉米星Pradimicins和贝拉米星Benanomycins作用于真菌细胞壁的抗真菌药物

β1-3葡聚糖合成酶几丁质合成酶甘露聚糖旦白真菌可能出现的耐药对策…

β-1，3葡聚糖合成酶抑制剂-

脂肽类抗生素

Pneumocandins：肺白菌素-Micafungin米卡芬净，Funguard-Caspofungin卡泊芬净，CandidasEchincandins：棘白菌素-Anidulafungin安尼杜拉芬净（LY-303366）抗真菌药物体外疗效评价评价新型抗真菌药物的体外抗菌活性，开发新药检测临床病原真菌对不同抗真菌药物的体外敏感性指导临床用药的选择监测耐药株

抗真菌药物体外敏感试验液基稀释法NCCLSM27A2：致病性酵母菌NCCLSM38A：产孢丝状真菌琼脂稀释法纸片扩散法——NCCLSM44-AE－test法联合用药：CheckboardCaspofungin微量液基稀释法-MIC的判定:MIC纸片扩散法——NCCLSM44-A

ABE-test检测曲霉的MIC酵母菌药敏试验A8B8A7B8A6B8A5B8A4B8A3B8A2B8A1B8ASBSGCMCA8B7A7B7A6B7A8B6A7B6A6B6A8B5A5B5A8B4A4B4A8B3A3B3A8B2A2B2A8B1A1B1B药联合用药测定方法A药几种抗真菌药物的Breakpoint定义

Drug药物名称NCCLSSuggestedMICBreakpointsEpidemiologicalMIC

Cut-OffValuesWT≦(mg/L)

(mg/L)≦S≧RC.albicanC.parapsilosisC.tropicalisC.lusitanieC.kruseiC.glabrataAmB（两性霉素B）11(tentative)111Itraconazole（伊曲康唑）0.1250.50.50.5NAFluconazole（氟康唑）83222≧64Flucytosine（5氟胞嘧啶）41611C.g:0.5C.k:16Caspofungin（卡泊芬净）NANANANAVoriconazole（伏立康唑）NA0.250.25NANationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards2002:ReferenceMethodforbrothdilutionantifungalsusceptibilitytestingofyeasts:approvedstandardNCCLSdocumentM27-A2.NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards,Wayne,PA,USA棘白菌素对曲霉的体外抗真菌活性GrowthControl IncreasingConcentrationofEchinocandinHealthyHappyStubbyAberrantSickPointofTransition:MEC,orMinimumEffectiveConcentrationPhotomicrographsanddefinitionofMEC:Kurtzetal.,AAC38:1480,1994体外药敏试验与临床疗效的相关性体外抗真菌药敏试验与体内疗效NCCLSM27-A

600余株念珠菌MIC值：分离自150余例AIDS的食管念珠菌病，一致性好；治疗失败者，MIC值大于64µg/ml“90-60原则”—MIC值与临床疗效

药敏试验敏感菌株：90%对治疗有效药敏试验耐药菌株：60%对治疗有效

MahmoudA.G,JCM1996,34:489-495；RexJ,CID2002,35:982-989组织药物浓度的测定是联系药敏试验和临床用药的桥梁以FLC为例：

剂量组织浓度100mg/d6µg/ml400mg/d20-30µg/ml800mg/d40-60µg/mlRexJH,ClinMicrobRev1993,6:367-381

真菌体外药敏试验存在问题...如何与临床疗效相结合？如何简化方法并提高重复性？对不产孢真菌如何建立标准化方法？探索CASP等新药的药敏试验新方法推广标准的药敏试验，做好质量控制常见条件性真菌感染的诊疗念珠菌感染的实验室诊断（一）在正常无菌体液中显示酵母细胞和/或菌丝，24-48小时有菌落生长;组织病理学提供肯定证据;血培养阳性可诊断念珠菌血症，可能与插管有关，可能为一过性，可能为播散性疾病;念珠菌感染的实验室诊断（二）血清学试验对免疫正常个体有助，抗体滴度升高(1:8)应考虑活动感染，特别在念珠菌心内膜炎患者;抗念珠菌甘露聚糖IgG抗体定量检测;ELISA检测mannoprotein抗原;实验性PCR方法;念珠菌血症外科手术(插管、胃肠外营养）48%ICU38%恶性肿瘤23%血透15%粒缺11%HIV8%移植5%JCM,2004,Vol.42:1519-27.念珠菌血症的治疗(1)必须拔管!因易形成生物膜发生耐药!选择药物及剂量:_Flu400mg_AmB0.7-0.9mg/kg/day_CASP70/50mg_VOR3-6mg/kgq12hDr.Kulberg,in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.

几乎所有的念珠菌均对伏立康唑敏感PfallerMAetalJClinMicrobiol.2003;41:1440-1446.白色念珠菌(n=916)光滑念珠菌(n=235)近平滑念珠菌(n=198)热带念珠菌(n=150)克柔念珠菌(n=43)葡萄牙念珠菌(n=24)99%93%100%100%100%100%2001年全球61个研究中心1586株血液和其它正常无菌部位的体液中分离的念珠菌的研究资料(ARTEMIS研究)显示伏立康唑浓度<1g/mL时抑制的菌株数百分比(%)020406080100氟康唑耐药念珠菌对伏立康唑的敏感性02040608010057%0%79%13%0%57%98%2%2%白色念珠菌(n=85)光滑念珠菌(n=78)克柔念珠菌(n=60)伏立康唑*伊曲康唑*两性霉素B†敏感率(%)‡*采用NCCLS标准M27-A微量稀释法测定。†采用E试验纸条法测定。‡敏感性临界浓度标准：伊曲康唑MIC值<0.12g/mL；伏立康唑和两性霉素BMIC值<1g/mL。PfallerMAetal.AntimicrobAgentsChemother.2002;46(6):1723-1727.念珠菌血症的治疗(2)病死率30-40%，早期治疗重要；非白念比例近半,对Flu不敏感比例增加（仅限于白念未治疗者），根据菌谱选择药物;AmB一般不用，建议用3-7d改为Flu;AmBvsCASP疗效相当,但不良反应重;最新研究表明(Lancet,Oct.22.2005)VOR抗菌谱广,对Flu耐药者有效，疗效与AmB+Flu相当（65%vs71%），AE少，特别肾损害。伏立康唑治疗各种念珠菌感染有效率

(n/N)念珠菌血症 52% (11/21)播散性念珠菌感染 46% (5/11)其它侵袭性念珠菌病 65% (11/17)*包括完全或部分有效病例PerfectJRetal.ClinInfectDis.2003;36:1122-1131.总体有效率*为55%(27/49)曲霉病——曲霉头曲霉病双分支菌丝曲霉感染的实验室诊断（一）组织病理：最可靠的诊断方法真菌镜检：

痰液—对ABPA有助—对侵袭性感染有限BAL—有时对侵袭性感染有助培养：有助于确定诊断，但解释困难

鼻窦、痰及BAL多见，血、尿、CSF少见曲霉感染的实验室诊断（二）血清学

—沉淀试验（precipitintesting）对ABPA和曲霉球（aspergilloma）有助—抗原试验对侵袭性感染有助—ELISA检测半乳甘露糖（galactomannan)PCR:试验阶段“HaloSign”_早期诊断的可靠依据

-治疗成功率高!对曲霉菌具有强大的杀菌活性

临床分离的曲霉菌菌株的MIC90*(菌株数>10的曲霉菌)MIC90(g/mL)*采用NCCLS标准M38-P微量稀释法测定MIC。Dataonfile.PfizerInc.,NewYork,NY.HerbrechtRetal.NEngJMed.2002;347(6):408-415.侵袭性曲霉菌病全球对照研究结果抗曲霉菌感染的强效药物基于2002年发表在新英格兰医学杂志上的由Herbrecht等进行的一项随机临床试验。该项研究在277例急性肺侵袭性曲霉病患者中观察了伏立康唑与AmBisome（3mg/kg/d）的疗效。证实伏立康唑在治疗有效率以及患者存活率等方面均优于AmBisome。伏立康唑的治疗剂量是6mg/kg，q12h，用药两天，然后以4mg/kg，q12h维持或以200-300mg，bid口服。*完全或部分有效病例。HerbrechtRetal.NEngJMed.2002;347(6):408-415.53%(76/144)32%(42/133)P

<0.0001有效率*(%)(病例数)6050403020100伏立康唑组OLAT两性霉素B组OLAT第12周时的临床有效率确诊或拟诊病例临床有效率HerbrechtRetal.NEngJMed.2002;347(6):408-415.有效率(%)伏立康唑两性霉素B肿瘤患者合并曲霉感染早期:AmB1.0-1.5mg/kg/dorVOR;替代:LFAmB>=5mg—Itra维持;外科配合Dr.MaschmeyerG.in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.肿瘤患者合并曲霉感染的药物选择VOR:优于AmB,对脑组织感染有效;CASP:有效,但体外不可靠;Micafungin:有一定效果;Posa:有效;联合用药:白菌素类+AmB或唑类Dr.MaschmeyerG.in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.隐球菌病—隐球菌感染的实验室诊断（一）脑脊液墨汁涂片可见带荚膜的酵母细胞脑脊液、痰、血液、尿、胸水培养（30–35°C）两周艾滋病人35–70%血培养阳性咖啡酸琼脂可用于区分隐球菌（棕色菌落）与念珠菌(白色菌落)隐球菌感染的实验室诊断（二）脑脊液、血清、尿和BAL的抗原检测(LPAorELISA)非常可靠隐脑90%的病人LPA阳性;在艾滋病人滴度较高早期限局性感染可测到抗体PCR诊断处试验阶段接合菌（毛霉）病—粗大无分隔菌丝毛霉病的危险因素糖尿病(36%,75%为II型),多为鼻脑毛霉病;肿瘤(17%),多为肺毛霉病;移植后发病在上升;外伤;ICU；VOR预防后相关（Dr.Kantoyanis,JID,2005)？？Dr.Kauffman,in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.毛霉（接合菌）病的实验室诊断镜检——坏死损害、痰或BAL中检出宽大、无分隔、直角菌丝有重要意义培养——可确定诊断，鼻、腭部、痰的培养意义不大，如分离自糖尿病或免疫抑制病人则应重视毛霉病的治疗早期诊断至关重要,但十分困难;外科切除病灶+LFAmB5mg/kg-10mg/kg/d;纠正酮症;其它可选Posa,FC,Terb;AmB+Terb;AmB+CASP;G-CSF\IFN-rDr.Kauffman,in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.深部真菌病防治中的问题了解危险因素对真菌血症和播散性真菌病的诊断不断积累我国的临床经验力争作到早期确切诊断-开始治疗的时机?-药物选择和剂量疗程？-预防治疗的作用?-经验性治疗的适应症?如何选择抗真菌治疗？病原体—念珠菌：唑类、多烯类或白菌素类，注意用药史和药敏;曲霉：唑类=多烯类>白菌素类;毛霉:多烯类,泊沙康唑?宿主—移植：多烯类=唑类>白菌素类;胃肠障碍:IV制剂;肝功受损:多烯类;肾功受损:唑类,白菌素类;菌谱与疗效:多烯类>唑类>白菌素类;耐受性:唑类>白菌素类>多烯类;药物相互作用:多烯类>白菌素类>唑类;Dr.Anassiae,in2ndTrendsinMedicalMycology,23-26October2005,Berlin,Germany.6551122-3056愿与各界同道合作努力提高真菌病诊治水平伏立康唑-抗菌谱源于氟康唑；2001年FDA批准用于临床，2005年我国正式上市（VFEND，威凡）；抗菌谱广，体外试验对念珠菌（包括氟康唑耐药的克柔念珠菌和光滑念珠菌）、新生隐球菌、和毛孢子菌都有良好的抑制活性；对霉菌如曲霉、尖端赛多孢菌、镰刀菌、皮炎芽生菌和荚膜组织胞浆菌等都有抑制作用；对于接合菌无抑制活性。伏立康唑-药代特点口服吸收迅速(1-2小时达Cmax)，口服生物利用度高(~96%)经肝脏CYP2C19、CYP2C9和CYP3A4同工酶代谢在体内分布广泛，能穿透脑膜，在脑脊液以及脑组织可达到有效浓度。78-88%的药物经过肾脏排泄，其中原型小于5%。肾功能减退者不宜用注射剂，因其赋形剂经肾排泄伴有慢性肝脏疾病的患者药物暴露量增加药物相互作用特征明显伏立康唑-药物相互作用类别不需要调整用药监察合用药物的作用并调整其剂量调整伏立康唑或合用药物的剂量并予以监察禁止合用详见产品说明书药物相互作用：禁忌症禁忌合用的药物原因特非那定、阿司咪唑、西沙必利、匹莫齐特、奎尼丁伏立康唑可使这些药物的血药浓度升高,从而导致QTc间期延长，并罕有发生尖端扭转性室性心动过速西罗莫司伏立康唑可增加西罗莫司的暴露量利福平、卡马西平、苯巴比妥

这些药物可减少伏立康唑的暴露量伏立康唑说明书。麦角生物碱类药伏立康唑可升高此类药物的血药浓度利福布丁伏立康唑血药浓度显著降低，利福布丁的血药浓度则显著增高伏立康唑-临床应用适应症侵袭性曲霉菌病对氟康唑耐药的严重侵袭性念珠菌感染(包括克柔念珠菌)由赛多孢菌属和镰刀菌属引起的严重感染伏立康唑应主要用于治疗免疫缺陷患者中进行性、可能威胁生命的感染移植病人的预防治疗_降低曲霉感染,尚无耐药发生;毛霉感染增加?(Dr.Kantoyannis)伏立康唑说明书。伏立康唑-不良反应视觉异常：如视力模糊、闪光感、色觉异常等，发生率为15-45%，均为一过性，与剂量呈正相关。一过性光敏感（5%）其它：发热，皮疹，碱性磷酸酶或胆红素水平升高。三唑类新药—泊沙康唑（Posaconazole）从伊曲康唑衍生而来的新型唑类抗真菌药物；难溶于水，目前只有口服剂型；抗菌谱广，对于曲霉、荚膜组织胞浆菌、赛多孢子菌、离蠕孢、接合菌、镰刀菌、酵母菌如念珠菌和隐球菌都有强大的抑制活性；毒副作用与其它唑类药物相似。卡泊芬净Caspofungin，Cancidas口服吸收不好，只有静脉用药剂型。半衰期为16-17小时，每日给药一次。对于念珠菌病70mg/d为负载量，然后50mg/d维持。对于曲霉病剂量为70mg/d，也可以加大用药剂量。通过肝脏的非细胞色素酶途径清除，在中度肝功能受损的患者必须调整用药剂量。毒副作用少，无肾毒性，肝毒性也小，但与环孢A同用时会引起肝功能异常，应引起注意。卡泊芬净，Caspofungin对于念珠菌病、曲霉病、组织胞浆菌病、球孢子菌病以及卡氏肺孢子虫病均有较好的效果。隐球菌对于卡泊芬净似乎耐药，部分原因是其细胞壁β-1，3葡聚糖的含量不够多。随机双盲的临床实验证实卡泊芬净对于念珠菌感染的疗效与氟康唑以及两性霉素B相似。对某些因为氟康唑耐药治疗失败的念珠菌感染也有不错的疗效。卡泊芬净，Caspofungin在两性霉素B、两性霉素B脂质剂型或伊曲康唑治疗失败的或两性霉素B不能耐受的侵袭性曲霉病患者中用卡泊芬净进行治疗：-总有效率为45%，-对于两性霉素B不能耐受者治疗有效率为75%，对于侵袭性曲霉病有良好的效果。在与多烯类、唑类的联合用药中，未观察到拮抗作用，大部分为相加作用，也有少数为协同作用。卡泊芬净，Caspofungin不良反应发生率大于1%，有发热、头痛、腹痛、腹泻、恶心、呕吐、肝酶增高、贫血、静脉炎、血栓性静脉炎、皮疹、瘙痒等。实验检查可有血白蛋白减低、白细胞减低、中性粒细胞减低、血小板减低、嗜酸粒细胞增多、凝血酶原时间及部分凝血活酶时间延长、血尿、蛋白尿、低血钙、低血钾等。米卡芬净，Micafungin，Funguard对白念珠菌（包括对氟康唑耐药菌株）、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌作用强，但对近平滑念珠菌作用较差。对曲霉具抑菌作用，MIC0.001～0.5ug/ml，无杀菌作用。对曲霉属包括对氟康唑、伊曲康唑、两性霉素B耐药菌株有效。对隐球菌、镰刀菌、毛孢子菌、接合菌无效。实验动物中对念珠菌属、曲霉感染有效，优于氟康唑、伊曲康唑。米卡芬净，Micafungin，Funguard本品供静脉滴注，血半衰期为10～16h，分布容积0.25～0.27L/kg,蛋白结合率高达99%。大部分药在肝脏代谢，尿中排出药量<1%，多剂给药后体内有一定蓄积，蓄积系数1.5。成人剂量50～100mg/d，一次静滴。曲霉感染可增至每日50～300mg。患者耐受性好，不良反应少，可有发热、头痛、腹泻、静脉炎、肝酶增高，多不需停药。可单用或与其他抗真菌药联合。

几丁质合成酶抑制剂

尼可霉素Z(nikkomycinz)通过细胞的主动转运过程发挥作用可能被拮抗对致病性双相真菌有效，联合用药有效临床经验不足

靶酶的改变靶酶基因的过度表达靶酶基因的突变药物流出泵唑类药物耐药机制-真菌标本的镜检是最简单也是最有用的实验室诊断方法。其优点在于简便、快速，阳性结果可确定真菌感染，阴性结果亦不能排除诊断。对于浅表和皮下真菌感染最有帮助。如在无菌体液的直接镜检中发现真菌成分常可确立深部真菌病的诊断。但一般在有菌部位则只有发现大量真菌菌丝方可作出诊断，通过直接镜检一般可以区分念珠菌、隐球菌、毛霉（接合菌）等菌的感染。真菌培养检查为了进一步提高对病原体检出的阳性率，同时确定致病菌的种类。一旦发现肯定的致病原如红色毛癣菌或新生隐球菌时，诊断即可确立。如果分离出条件致病菌如白念珠菌或烟曲霉时，应结合临床情况进行判断。从无菌部位如血液或脑脊液中分离出条件致病菌常提示肯定的感染，但对来自于脓、痰或尿的标本则应谨慎解释结果，单靠一次培养阳性往往不能确定诊断。有时还需结合直接镜检的结果，因此强调直接镜检与培养检查相结合的重要性。任何一株培养物都不应被视为污染菌。临床医师与实验室检验人员之间的相互联系是非常重要的。卡泊芬净(Caspofungin）

[概述]第一个被批准用于治疗侵袭性曲霉病的棘白菌素类抗真菌药物；经静脉给药，因为半衰期长（10-12小时），每天可以一次；对于念珠菌,曲霉等有良好的抑制活性，对于一些双相真菌也有抑制作用，但是对于新生隐球菌、镰刀菌、接合菌和白吉利毛孢子菌等无抑制活性；动物模型研究表明，对于曲霉病，棘白菌素与两性霉素B和唑类药物有协同治