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文档简介

专题十一、生物技术实践一模64.(2022北京宣武4月质检I)以下有关生物技术实践的叙述中,不正确的是()A.在大肠杆菌的分离和培养实验中,划线后盖好培养皿,再将培养皿倒置培养B.某同学用带盖的瓶子制备葡萄酒的过程中,每隔12小时左右将瓶盖拧松一次,其目的是向瓶中通气,以保证微生物的发酵C.将显色后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量D.可以用稀释涂布平板法来测定某土壤溶液活菌数目65.(2022北京海淀4月期中练习)人们利用某些微生物制作食品时,需要分析微生物的特点,控制微生物的发酵条件。下列与此有关的各项内容都正确的是66.(2022北京东城4月综合练习I)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取1g,置于经过_______法灭菌处理的____(填“固体”或“液体”)培养基中,28℃振荡培养。(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行_______处理。之后,将菌液涂布接种于以________为唯一碳源的固体培养基上,30℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈__________状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计____________作为空白对照。(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是_________,则说明此种菌能够_________。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株,采用________法接种于新的培养基平板,可对菌株进行进一步的纯化。67.(2022北京崇文4月统一练习)请回答下列与大肠杆菌有关的问题:(1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于___________;它的同化作用类型是______。(2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。根据用途划分该培养基属于____________培养基(选择、鉴别)。该培养基中的碳源是_____________。(3)培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和___________。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行__________________。(4)现有一升水样,用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中,依次稀释103稀释度。各取已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为55、56、57,则每升原水样中大肠杆菌数为__________________。(5)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。A.制作果酒B.由果酒制作果醋C.制作泡菜D.制作腐乳(6)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。与微生物培养明显不同的是,用于组织培养的培养基中还需要加入______________。参考答案64.答案:B65.答案:B66.答案:(1)高压蒸汽灭菌;液体(2)系列稀释(或“梯度稀释”);淀粉;倒置;未接种的空白培养基(或“接种等量无菌水的培养基”)(3)出现透明圈;分泌淀粉酶使淀粉发生水解;(平板)划线67.答案:(1)分解者异养型(2)鉴别乳糖、蔗糖(蛋白胨)(3)稀释涂布平板法灭菌(4)×108(5)B.C(6)植物激素(或生长素和细胞分裂素)二模31.(丰台18分)某科研单位在调查湖水中细菌的污染情况时进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了___________________。对培养基进行灭菌,应该采用的方法是___________。接种时通常采用方法,把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面如果提高培养基中NaCl的浓度,可以用于筛选耐盐细菌,这种培养基被称为____________。(2)该细菌所含的耐盐基因可通过酶切法获取,作为基因工程中的目的基因导入小麦中,其过程如右图所示。其中A为,耐盐基因的小麦细胞还应经过,在此过程中还将使用两种植物激素,从而最终可获取含耐盐基因的小麦植株,当然这些小麦植株并不一定具有耐盐的特性,这是因为。(3)图中C还可用于其他工程细菌中,若成功导入大肠杆菌内,则可能使大肠杆菌获得哪些特性?31.(18分)(1)氮源(碳源)、碳源(答对1个给1分)高压蒸汽灭菌平板划线选择培养基(2)(运)载体植物组织培养生长素和细胞分裂素(答对1个给1分)基因选择性表达(或:目的基因未表达)(3)耐盐、抗氨苄青霉素(答对1个给1分)29.(通州)为了实现燃料供应来源多样化,如今,发展长期替代化石燃料的产品,如燃料酒精、生物柴油、沼气等的计划已经被列入我国未来10年的发展规划之中。广东省是我国甘蔗主产区之一。甘蔗是一种高光效的植物(C4植物),单位面积产量很高,种植面积日益扩大,目前已成为南方地区燃料酒精生产的重要原料。利用甘蔗生产燃料酒精的一般工艺流程为:甘蔗→榨汁(蔗糖)→酵母发酵→蒸馏→成品(燃料酒精)。请根据上述材料,回答下列问题:(共20分)⑴若要用甘蔗外植体为材料进行甘蔗大规模快速繁殖,请在下表中填出操作步骤第三步的名称。第一步第二步第三步第四步第五步第六步主要操作步骤配置培养基外植体消毒培养移栽栽培⑵若上述过程是在中学生物组培实验室里进行的,则第三步需要使用酒精(包括酒精灯)。酒精(及酒精灯)在此的两个主要用途是:、⑶具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌是理想的酒精发酵菌种,对野生酵母菌进行诱变后,通过筛选可以得到具有这些特性的突变菌,诱变及筛选过程如下:步骤1:将野生菌液体培养一段时间后,接受紫外线照射诱变处理。步骤2:制备选择培养基。在配置基本培养基的基础上,还要额外添加,并将pH值,然后添加琼脂,在进行灭菌处理后,制成固体平板。步骤3:将经过紫外线照射后的菌液稀释,并涂布平板。步骤4:筛选突变菌:挑选_菌落,即为耐高糖、耐酸特性的酵母菌。(4)当第四步结束后,获得了大量幼苗。在此过程中,外植体通过脱分化产生,然后通过调整植物激素比例,进行,形成具有芽和根的幼苗。(5)甘蔗榨汁以后还有大量的蔗渣废弃物,主要成分为木质素、纤维素和半纤维素,但是酵母菌无法直接利用,原因是它们。请提出解决该问题的方法。(列举两种生物分解方法)、。(6)突变菌往往带有一些特殊的基因。在获得这些基因的过程中,PCR技术相当重要。PCR扩增反应中加入DNA聚合酶的作用是:从引物的3'端开始催化。29.每空2分,共20分。(特殊标注除外)(1)第一步第二步第三步第四步第五步第六步主要操作步骤接种(2)接种前用酒精擦拭双手和工作台;在酒精灯下完成接种操作和封口全过程(3)步骤2:高浓度蔗糖(或葡萄糖)(1分);调低(1分)步骤4:在此(选择)培养基上生长(4)愈伤组织(1分);再分化(1分)(5)缺乏相应分解酶系(或缺乏纤维素酶和半纤维素酶)①在酵母菌中转入分解纤维素酶系的相关基因②在蔗渣中加入含有能分解纤维素相关酶的微生物(或将分解纤维素的微生物与酵母菌混合发酵)(6)DNA链的延伸29.(顺义16分)金黄色葡萄球菌对人的危害很大,国家规定对食品要进行金黄色葡萄球菌的检测。葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂,在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环。请回答下列问题:(1)培养基中含有的牛肉膏和蛋白胨为金黄色葡萄球菌生长和繁殖提供。葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl,所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl可以将它分离出来。此培养基属于培养基。(2)检测果汁类食品中是否含有金黄色葡萄球菌的主要步骤如下:①配制培养基:称取适量的牛肉膏、蛋白胨、NaCl、琼脂等,加入蒸馏水,搅拌加热至完全溶解后调节,分装到锥形瓶后,在无菌状态下加入卵黄液(100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄,振荡均匀)摇匀,立即倒平板。②接种:取待检果汁加入到灭菌生理盐水中,制成接种样液。实验组:将接种样液用法接种在含卵黄的固体培养基上。对照组:将用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作空白对照。将上述接种后的培养皿同时放在36℃③观察:观察培养基表面。(3)某果汁厂生产的果汁中检测出金黄色葡萄球菌,他们认为不是果汁的问题,而是实验人员的操作有误差。如果实验结果出现,则可基本排除操作误差对实验结果的影响。29.(每空2分,共16分)(1)碳源和氮源选择(2)①pH灭菌②划线灭菌生理盐水③是否出现周围有乳浊环的菌落(3)只有实验组出现周围有乳浊环的菌落69.(海淀)(14分)酵母菌菌种A能耐高温,但产酒精率较低,而菌种B不耐高温,产酒精牢却较高。为获得耐高温、产酒精率高的酵母吲i-w(目的菌种),:进行了如图18所示的实验。清回答下列相关问题。(1)步骤①需要加入蜗牛酶,其作用是。步骤②需加入试剂诱导融合。(2)利用A、B两菌种对某一药物抗药性的差异,对融合子进行筛选。实验中,应将含有融合子的培养液利用方法接种到含有相关药物的培养基上。下表为A、B两菌种在几种药物的作用下,生长状况的实验结果。由于A种不能独立在基本培养基上生长,所以,据表可以判断,加入(药物),筛选出融合子。多菌灵三唑酮霜霉狂杀放线菌酮菌种A++--菌种B+-+- 注:“+”可以良好生长,“一”不能生长。(3)将配制好的麦芽汁分装到若干个如图19所示的装置中,每个装置中的麦芽汗主尖,再分别接种筛选出的融合子,密闭培养。一段时间后,观察比较并记录每个装置中,可初步判断融合子的发酵能力;进一步做条件下产酒精能力的测定,以获得所需的目的菌种。70.(宣武)(16分)目前,加酶洗衣粉中的蛋白酶主要是中温蛋白酶,最适酶活温度在50°C左右,由于日常洗涤用水的温度达不到该温度,导致蛋白酶活性受到影响。适冷蛋白酶是从适冷鱼类体内分离纯化或由深海适冷菌分泌出的酶类,最适酶活温度在据图回答问题:(1)在将配制好的牛肉膏蛋白胨培养基分装到三角瓶中时,为避免培养基沾到瓶口,必须使用进行分装,并及时进行操作。(2)将扩大培养后的深海微生物用法接种到含酪蛋白的固体培养基表面,在适宜条件下培养一段时间,挑出形成透明圈的菌落,即为初选出的适冷菌。(3)为进一步检测分离出的适冷菌分泌的适冷蛋白酶的最适酶活温度,将该菌按上图所示分7组进行培养,这7组实验问形成了,组所对应的温度为最适酶活温度。(4)由操作过程可知该适冷菌的代谢类型为。(5)若将分离到的适冷菌接种到一定容积的牛肉膏蛋白胨液体培养基中,置于适宜条件下振荡培养,细菌数量将呈增长,其环境容纳量主要取决于。71.(丰台)(16分)某实验小组为了探究细胞膜的通透性,将小鼠肝细胞在体外培养一段时间后,检测培养液中的氨基酸、葡萄糖和尿素含量,发现它们的含量发生了明显的变化(如图)。请回答问题。(1)由图可知,随培养时间延长,培养液中葡萄糖和氨基酸含量,尿素含量。由于在原培养液中没有尿素,推则其是的产物。(2)培养液中的氨基酸进入细胞后,可用于合成细胞中、、、(写出四种细胞结构)上的蛋白质。被吸收的葡萄糖主要通过(生理过程)为细胞提供能量。(3)转氨酶是肝细胞内参与氨基酸分解与合成的一类酶,正常情况下这类酶不会排出细胞外,若在细胞培养液中检测到该类酶,可能的原因是。(4)由(1)和(3)可初步判断,细胞膜对物质的转运具有的特性。生物技术实践69.(1

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